發(fā)布時間：2021-02-19 23:51

　　一、PTEN敲除小鼠前列腺癌模型的蛋白組學(xué)分析目的：通過高通量的質(zhì)譜技術(shù)以及SILAC精確的計量技術(shù),使蛋白組學(xué)能夠應(yīng)用于前列腺癌蛋白質(zhì)組的系統(tǒng)分析,明確在腫瘤進(jìn)程中有意義的蛋白指標(biāo)。方法：使用精氨酸10、賴氨酸8標(biāo)記的SILAC培養(yǎng)液對PTEN敲除小鼠前列腺癌細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)。RIPA液對細(xì)胞進(jìn)行裂解。正常組織、腫瘤標(biāo)本的石蠟切片及小鼠前列腺癌細(xì)胞系提取蛋白,胰蛋白酶消化,肽鏈的分離及液相質(zhì)譜分析,軟件數(shù)據(jù)分析。結(jié)果：數(shù)據(jù)分析最終得到約2000種蛋白。其中腫瘤標(biāo)本中明顯上調(diào)蛋白占264種,明顯下調(diào)蛋白303種。PTEN敲除標(biāo)本中有關(guān)細(xì)胞粘附的蛋白表達(dá)上調(diào)（膠原蛋白、層粘連蛋白、整合素…）；有關(guān)蛋白質(zhì)運(yùn)輸（RAB）上調(diào)；調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的部分蛋白下調(diào)（MAPK7、胞裂蛋白及組蛋白）,有關(guān)未折疊蛋白反應(yīng)中的一系列基因下調(diào)。結(jié)論：利用SILAC技術(shù)的定量蛋白組學(xué)研究能夠精確地對比腫瘤組織與正常組織之間的蛋白水平差異,能夠更好地了解前列腺癌進(jìn)展的分子生物學(xué)機(jī)制,為前列腺癌早期的生物學(xué)標(biāo)志物的篩選、尋找有效地靶向治療基因及對于前列腺癌治療效果進(jìn)行有效的監(jiān)測建立了良好的基礎(chǔ)。二、抑制PTEN表達(dá)后前列... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、PTEN敲除小鼠前列腺癌模型的蛋白組學(xué)分析
    1.1 對象和方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 實驗方法
        1.1.3 數(shù)據(jù)分析結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、沉默或抑制PTEN基因?qū)η傲邢侔┘?xì)胞生長和凋亡的影響
    2.1 對象和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 實驗方法
        2.1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 MTT 結(jié)果
        2.2.2 流式細(xì)胞儀檢測22Rv1轉(zhuǎn)染siRNA PTEN后細(xì)胞凋亡
        2.2.3 PTEN及Chop的mRNA表達(dá)水平
        2.2.4 PTEN及Chop的蛋白表達(dá)水平
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、Chop基因?qū)η傲邢侔┘?xì)胞生長和凋亡的影響
    3.1 對象和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 實驗方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 22Rvl細(xì)胞Chop基因抑制、Chop基因過表達(dá)時MTT檢測結(jié)果
        3.2.2 流式細(xì)胞儀檢測22Rvl抑制、過表達(dá)Chop基因后細(xì)胞調(diào)亡率變化
        3.2.3 檢測抑制Chop基因抑制及過表達(dá)時下游基因的蛋白表達(dá)水平變化情況.
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
四、構(gòu)建出可誘導(dǎo)表達(dá)c-myc基因的22Rv1細(xì)胞系
    4.1 對象和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 實驗方法
        4.1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 基因測序結(jié)果
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    PTEN與UPR在前列腺癌中表達(dá)相關(guān)性及意義
    c-myc基因在前列腺癌中的意義與四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3041886