高鐵應(yīng)激對小鼠成肌細(xì)胞C2C12線粒體自噬和凋亡的影響
發(fā)布時間:2021-02-10 05:31
目的 觀察高鐵培養(yǎng)環(huán)境下小鼠成肌細(xì)胞C2C12生物學(xué)活性指標(biāo)的變化,探討高鐵應(yīng)激對骨骼肌細(xì)胞生物學(xué)活性的影響和相關(guān)機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)小鼠成肌細(xì)胞C2C12,在馬血清誘導(dǎo)作用下分化為骨骼肌細(xì)胞,以不同濃度(50、100、200 μmol/L)枸櫞酸鐵銨(FAC)干預(yù),細(xì)胞計數(shù)試劑盒(CCK-8)檢測細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率,活性氧(ROS)檢測試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平,線粒體熒光探針標(biāo)記線粒體,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)線粒體相對含量,Western blot法檢測細(xì)胞內(nèi)自噬相關(guān)蛋白輕鏈蛋白3Ⅰ、Ⅱ(LC3Ⅰ、LC3Ⅱ)、B淋巴細(xì)胞瘤2/腺病毒相互作用蛋白3及其同族體(BNIP3、BNIP3L)的表達(dá);Western blot法分別檢測細(xì)胞色素C(Cyt C)在細(xì)胞質(zhì)和線粒體內(nèi)的表達(dá),使用抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC 2.5 mmol/L)和FAC共同干預(yù),再次檢測細(xì)胞的增殖、凋亡指標(biāo)。結(jié)果 C2C12細(xì)胞在FAC干預(yù)后,細(xì)胞的增殖活性隨FAC干預(yù)濃度增加呈濃度依賴性下降(P<0.01),凋亡率呈濃度依賴性升高(P<0.01);ROS水平呈濃度依賴性升高(P<...
【文章來源】:中華實驗外科雜志. 2019,(01)
【文章頁數(shù)】:3 頁
本文編號:3026863
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