1、誘導(dǎo)供體特異性耐受的人鼠嵌合HLA-A2二聚體的構(gòu)建及表達(dá)2、體外研究IL-21和雷帕霉素單用或聯(lián)用對(duì)抗原特異性T細(xì)
發(fā)布時(shí)間:2020-12-29 03:13
器官移植給各種組織和器官終末期患者帶來了希望,然而,移植排斥反應(yīng)依然是目前所面臨的一項(xiàng)艱巨挑戰(zhàn),誘導(dǎo)移植耐受是目前亟待解決的問題,F(xiàn)有的免疫抑制劑在維持免疫耐受的同時(shí),使病人容易受到感染和罹患惡性腫瘤以及藥物相關(guān)毒性副作用等缺點(diǎn).研究顯示,MHC-IgG二聚體在體外可以誘導(dǎo)供者特異性的同種T細(xì)胞耐受。因此,我們嘗試去回答二聚體是否可以抑制排斥反應(yīng)。為此,我們構(gòu)建、克隆和表達(dá)了HLA-A2-IgG2bFc二聚體。利用重疊PCR將兩個(gè)不同基因片段連接,插入pcDNA3.1,形成pcDNA3.1HLA-A2β2α1α2murinea3克隆質(zhì)粒。IgG2bFc片段通過酶切、連接形成表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1HLA-A2β2α1α2murinea3IgG2bFc轉(zhuǎn)染入J558L細(xì)胞。G418抗性篩選單克隆,然后,通過ELISA證實(shí)轉(zhuǎn)染是否成功。通過單向MLC的方法檢測表達(dá)的可溶性二聚體是否能抗抑制排斥反應(yīng)的能力。我們利用攜帶有HLA-A2轉(zhuǎn)基因鼠作為供體,攜帶有HLA-A24轉(zhuǎn)基因鼠作為受體,MLC結(jié)果表明CD4+T的增殖顯著被二聚體抑制。這和我們預(yù)期的結(jié)果相悖,我們認(rèn)為二聚體可能對(duì)CD8+T細(xì)胞...
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:120 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
Table of Contents
List of Used Abbreviations
PartⅠ
中文摘要
Abstract
1.Background Information
2.Materials
3.Methods
4.Results
5.Discussion
6.Concluding Remarks
References
PartⅡ
中文摘要
Abstract
1.Background Information
2.Materials
3.Methods
4.Results
5.Discussion
6.Concluding Remarks
References
Review
References
Publication(s)
Acknowledgements
本文編號(hào):2944896
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:120 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
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List of Used Abbreviations
PartⅠ
中文摘要
Abstract
1.Background Information
2.Materials
3.Methods
4.Results
5.Discussion
6.Concluding Remarks
References
PartⅡ
中文摘要
Abstract
1.Background Information
2.Materials
3.Methods
4.Results
5.Discussion
6.Concluding Remarks
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