發(fā)布時(shí)間：2020-12-23 21:42

　　目的:探討高溫?zé)釕?yīng)激方法構(gòu)建小鼠精原干細(xì)胞（SSCs）移植受體的可行性。方法:將4周齡的C57BL/6雄鼠和B6（Cg）-Tyrc-2J/J毛色基因純合突變雄鼠置于恒溫箱內(nèi),43℃熱應(yīng)激處理1 h,通過(guò)HE染色、免疫組化染色和TUNEL凋亡檢測(cè),尋找最佳移植時(shí)間;隨后將SSCs移植入小鼠生精小管,定期觀察移植后受體小鼠睪丸內(nèi)SSCs增殖、分化及形成精子的情況,并將受體小鼠與正常同周齡雌鼠交配,觀察其后代表觀遺傳學(xué)特征。結(jié)果:高溫?zé)釕?yīng)激3～5 d后受體小鼠睪丸生精小管內(nèi)生精細(xì)胞層數(shù)減少,排列紊亂、疏松且大量缺失,間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯減少,生精細(xì)胞凋亡明顯,自噬水平升高,12 d左右基本恢復(fù)。在分離純化后的SSCs移植8周后,受體小鼠睪丸生精小管內(nèi)分化形成生精細(xì)胞及具有遺傳功能的精子,經(jīng)過(guò)自然交配產(chǎn)生正常的后代。結(jié)論:高溫?zé)釕?yīng)激方法可快速、高效構(gòu)建小鼠精原干細(xì)胞移植受體模型。 

【文章來(lái)源】：中華男科學(xué)雜志. 2019年09期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 方法
        1.2.1 構(gòu)建高溫?zé)釕?yīng)激SSC移植受體小鼠
        1.2.2 樣本采集
        1.2.3 HE染色
        1.2.4 免疫組化染色
        1.2.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        1.2.6 Western印跡檢測(cè)LC3蛋白
        1.2.7 SSC細(xì)胞的分離、鑒定
        1.2.8 SSC移植
2 結(jié)果
    2.1 一般情況
    2.2 熱應(yīng)激后小鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)特征變化
    2.3 熱應(yīng)激后小鼠睪丸組織自噬水平變化
    2.4 熱應(yīng)激后小鼠睪丸組織凋亡水平變化
    2.5 SSC分離純化、鑒定
    2.6 SSC生精小管移植
    2.7 SSC移植后增殖分化觀察
    2.8 SSC移植后代表觀遺傳學(xué)特征觀察
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]睪丸中生殖細(xì)胞凋亡通路的調(diào)節(jié)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 姚重界,趙琛,劉世敏.  中華男科學(xué)雜志. 2018(09)
[2]男性青少年腫瘤患者的生育力保護(hù)[J]. 傅龍龍,張開(kāi)舒,谷翊群.  中華男科學(xué)雜志. 2017(03)
[3]三個(gè)品系小鼠白消安無(wú)精子癥模型的比較[J]. 暴國(guó),王尚明,張長(zhǎng)勇,魏剛,陳西華,王麗麗,張斌,許芮豪,王寧,石翠格,徐祥波,賀斌,王介東,張樹成.  生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2015(08)
[4]白消安注射法建立昆明小鼠精原干細(xì)胞移植受體模型[J]. 王菊花,解倩倩,范彩云,方富貴,周杰,曹鴻國(guó),章孝榮.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(08)
[5]男性避孕方法的研究概況和可行性分析[J]. 張曉偉,楊丹.  中國(guó)新藥與臨床雜志. 2014(02)
[6]精原干細(xì)胞自我更新與分化的調(diào)控[J]. 李冬梅,秦曉東.  中華男科學(xué)雜志. 2013(11)



本文編號(hào)：2934406