瘧疾是世界上最重要的感染性疾病之一。近年來，由于瘧原蟲對抗瘧藥， 特別是氯喹，產(chǎn)生抗藥性并且迅速的擴散，到九十年代，有惡性瘧原蟲分布的 地區(qū)幾乎都有抗氯喹惡性瘧原蟲株的存在。另一方面，由于瘧原蟲抗原的多態(tài) 性和變異以及宿主遺傳背景的限制性，使瘧疾疫苗的研究進展很慢。為此，人 們除了繼續(xù)從事瘧疾疫苗的研究外，逐漸把目光轉移到尋找預防發(fā)生重癥瘧 疾、減緩瘧疾病癥、降低瘧疾死亡率的新途徑。伯氏瘧原蟲氯喹抗性（RC） 株是藥物敏感（N）株經(jīng)藥物篩選獲得，N株是致死性蟲株，RC株感染后能自 愈康復。因此，本研究以該對蟲株作為對象，探索兩者致病力的差異及其機 制。 1．致病力差異： 1）原蟲血癥與體溫和體重的關系：N株瘧原蟲以1×10_6個感染瘧原蟲紅細胞／鼠 腹腔接種小鼠后第9天開始出現(xiàn)死亡，第11天全部小鼠死亡，死亡率為100％。 體重（體重／原始體重×％）在感染后的前6天呈上升趨勢，隨后逐漸減輕；體 溫在感染后的前7天維持在37℃左右，隨后逐漸下降，直到死亡。RC株瘧原 蟲以1×10_6個感染瘧原蟲紅細胞／鼠腹腔接種小鼠后第24天出現(xiàn)死亡，死亡 率為25％，第36天時，絕大多數(shù)感染小鼠原蟲血癥消失。體重（體重／原始體 重×％）在感染后最初16天呈上升趨勢，隨后逐漸減輕。體溫在感染后的前16 天維持在36.5℃左右。在第26～28天時，感染鼠體重降至92.60％± 4.59％（n＝6），體溫也降至29.90±0.58℃（n＝6）。第36天時，體重恢復至105.00 ±5.80（n＝6），體溫升至36.70±0.24℃（n＝6）。 2）紅細胞數(shù)、脾重和肝重的差異：N株和RC株瘧原蟲感染后，原蟲血癥分別 達到64.82±6.65％和63.35±9.66％時，紅細胞計數(shù)、脾重和肝重占體重的百 分比分別為2.45×10_6／mm_3±1.19×10_6／mm_3，1.71％±0.51％，7.20％±0.49％和 2.01×10_6／mm_3±0.79×10_6／mm_3，4.08％±1.12％，8.68％±1.18％。與正常組的紅 細胞計數(shù)仿．64 X 10‘／inln3士0．75 X 10fyIYUn勺、脾重占體重的百分比O．53Ol 0刀6叨和肝重占體重的百分比（．23％土0．29叨比較，差異非常顯著（P＜0刀1人 N株感染小鼠與RC株感染小鼠相比，紅細胞計數(shù)的差異不顯著（P＞0刀5）， 脾重占體重的百分比差異非常顯著o吻刀1），肝重占體重的百分比差異顯著 （＜0刀5）。 3）病理組織學的動態(tài)變化：N株感染小鼠肝、脾有較多的瘧色素沉著，肺臟 呈郁血性水腫。腦微血管充血和阻塞。感染瘧原蟲紅細胞在腦、心、肺等器官 小靜脈和毛細血管內(nèi)滯留，各臟器呈急性炎癥的病理變化特點。RC株感染小 鼠肝、脾臟的病理組織學改變與原蟲血癥的變化有關。肺臟呈間質性肺炎，各 臟器呈慢性增生性炎癥的病理變化特點。 4）超微結構的病理變化：N株感染后期小鼠腦部微血管含有較多的感染瘧原蟲 紅細胞和紅細胞，呈堵塞狀態(tài)，肺毛細血管內(nèi)皮細胞有多個突起與感染瘧原蟲 紅細胞相接觸。較多的肝、腎、肺實質細胞出現(xiàn)膜破潰，胞質流失，線粒體腫 脹等不可逆的壞死性病變。RC株感染后期鼠肝、腎實質細胞的病變以線粒體 腫脹為主的變性�？梢姼闻K部分變性肝細胞出現(xiàn)恢復狀態(tài)，腎小球毛細血管內(nèi) 皮細胞下、基膜、系膜區(qū)可見電子致密物沉著，肺臟的肺泡隔內(nèi)可見較多的淋 巴細胞、巨噬細胞和嗜中性白細胞。 2．伯氏瘧原蟲氯喳抗性株和敏感株感染鼠細胞因子mRNA表達、 血清細胞因子濃度、DC細胞活化及免疫應答反應的差異 1）伯氏瘧原蟲氯喳抗性株紅內(nèi)期蟲體的凋亡：在光鏡和電鏡下，原蟲血癥上 升期的RC株和N株蟲體，結構無異常。基因組DNA電泳為單一條帶。而 RC株感染小鼠自愈期蟲體密度下降，大部分蟲體固縮，周圍呈空泡狀。在 電鏡下呈球形或長圓形，胞膜完整，核固縮，胞質濃縮，線粒體和膜狀結構 消失，未見代謝窗結構�；蚪MDNA電泳呈典型的梯形條帶。 2）腦、肝、脾組織細胞因子mRNA動態(tài)變化：應用 RTICR技術，比較伯氏 二 ‘瘧原蟲 RC株和 N株感染 ICR小鼠后，不同原蟲血癥時，腦、肝、脾組 織細胞mRNA的差異。結果顯示N株和RC株感染小鼠后的腦組織中始終未 檢出IFNInRNA和hFmRNA的表達。RC株感染小鼠肝、脾一直有IFNallA 和TNTInRNA的表達。原蟲血癥為10～20％和30～60％時，肝臟表達高于脾 臟。原蟲血癥達高峰時，僅有脾IFNmmA和hF刪A和肝臟I剛側A 的表達。原蟲血癥下降為 10～20％時，肝、脾 IFNInRNA和 TNFmRNA表
【學位單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2001
【中圖分類】：R382.31
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株的致病力差異
    材料和方法
    實驗結果
    討論
    參考文獻
第二部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株誘導感染鼠細胞因子、DC細胞活化及免疫應答反應的差異
    實驗材料與方法
    結果
    討論
    參考文獻
第三部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株紅內(nèi)期蟲體超微結構和基因組DNA的差異
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結果
    討論
    參考文獻
文獻綜述： TNF-α在瘧原蟲感染中的作用
致謝

【引證文獻】

本文編號：2891014