本文關(guān)鍵詞：脾臟巨噬細(xì)胞在凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)中的作用的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞后在機(jī)體免疫反應(yīng)中的相互影響，闡明小鼠脾臟巨噬細(xì)胞在凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的機(jī)體免疫應(yīng)答中的作用，為進(jìn)一步闡明細(xì)胞凋亡在機(jī)體免疫自穩(wěn)和免疫調(diào)控中的重要作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 研究方法 1.40Gy的X射線輻照劑量誘導(dǎo)小鼠脾臟免疫細(xì)胞凋亡，Annexin-V-FITC與PI雙標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡率。 2.用二醋酸羧基熒光素（CFSE）標(biāo)記凋亡細(xì)胞，尾靜脈回輸小鼠后于0.5小時、1小時、2小時分別取其脾臟，用流式細(xì)胞儀檢測小鼠脾臟免疫細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞的能力和吞噬凋亡細(xì)胞的免疫細(xì)胞亞群。 3.激光共聚焦顯微技術(shù)觀察小鼠脾臟冰凍切片中巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞的現(xiàn)象。 4.氯磷酸二鈉脂質(zhì)體（clodronate liposomes，CLs）清除小鼠脾臟巨噬細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測注射CLs后第1天及第5天其脾臟與外周血中免疫細(xì)胞的清除率。 5.清除脾臟巨噬細(xì)胞后，尾靜脈回輸CD4+T細(xì)胞和凋亡細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測巨噬細(xì)胞在凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的抗原特異性CD4+T細(xì)胞的免疫反應(yīng)中的作用。 結(jié)果 1.觀察到40Gy的X射線輻照劑量可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞于37℃、5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2小時之后檢測其細(xì)胞凋亡率，早期凋亡率為45.7%，晚期凋亡率為12.4%。 2.發(fā)現(xiàn)了小鼠脾臟免疫細(xì)胞具有吞噬凋亡細(xì)胞的能力，且在回輸?shù)蛲黾?xì)胞后1h脾臟免疫細(xì)胞的吞噬率最高（吞噬凋亡細(xì)胞的免疫細(xì)胞占脾臟中所有免疫細(xì)胞的0.14%），其中巨噬細(xì)胞所占比例最大；樹突狀細(xì)胞也具有吞噬凋亡細(xì)胞的能力，其中淋巴樣樹突狀細(xì)胞的吞噬率約是髓樣樹突狀細(xì)胞的3倍。 3.小鼠尾靜脈注射CLs后第1天，與未注射CLs組相比較，，外周血中被清除掉的免疫細(xì)胞主要是單核細(xì)胞（p0.001），脾臟中清除最徹底的是F4/80+巨噬細(xì)胞（p0.001），淋巴樣樹突狀細(xì)胞的清除率也較高（p0.001）。注射CLs后第5天，除F4/80+巨噬細(xì)胞外，其它被清除掉的免疫細(xì)胞基本已回復(fù)正常水平。說明CLs可以有效清除小鼠脾臟巨噬細(xì)胞。 4.清除脾臟巨噬細(xì)胞后，樹突狀細(xì)胞具有提呈凋亡細(xì)胞相關(guān)抗原的功能，但凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的抗原特異性CD4+T細(xì)胞的免疫應(yīng)答能力比清除巨噬細(xì)胞前降低了約50%（p0.001），提示巨噬細(xì)胞參與了抗原提呈過程。 結(jié)論 1. CLs能有效清除小鼠脾臟巨噬細(xì)胞，注射CLs后第5天是區(qū)分巨噬細(xì)胞與DC吞噬凋亡細(xì)胞的最佳時間點。 2.巨噬細(xì)胞參與了凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的機(jī)體免疫應(yīng)答過程。 3.上述實驗結(jié)果豐富了對巨噬細(xì)胞在凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)中的作用的認(rèn)識，為今后進(jìn)一步研究巨噬細(xì)胞在凋亡細(xì)胞誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)中的作用機(jī)制提供了理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：凋亡細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 樹突狀細(xì)胞 免疫應(yīng)答
【學(xué)位授予單位】：泰山醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符號說明8-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-42
• 討論42-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 綜述52-63
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 致謝63

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：286721