本文關(guān)鍵詞：脾臟巨噬細胞在凋亡細胞誘導的免疫反應中的作用的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討巨噬細胞和樹突狀細胞吞噬凋亡細胞后在機體免疫反應中的相互影響，闡明小鼠脾臟巨噬細胞在凋亡細胞誘導的機體免疫應答中的作用，為進一步闡明細胞凋亡在機體免疫自穩(wěn)和免疫調(diào)控中的重要作用機制奠定基礎(chǔ)。 研究方法 1.40Gy的X射線輻照劑量誘導小鼠脾臟免疫細胞凋亡，Annexin-V-FITC與PI雙標記法檢測細胞凋亡率。 2.用二醋酸羧基熒光素（CFSE）標記凋亡細胞，尾靜脈回輸小鼠后于0.5小時、1小時、2小時分別取其脾臟，用流式細胞儀檢測小鼠脾臟免疫細胞吞噬凋亡細胞的能力和吞噬凋亡細胞的免疫細胞亞群。 3.激光共聚焦顯微技術(shù)觀察小鼠脾臟冰凍切片中巨噬細胞和樹突狀細胞吞噬凋亡細胞的現(xiàn)象。 4.氯磷酸二鈉脂質(zhì)體（clodronate liposomes，CLs）清除小鼠脾臟巨噬細胞，流式細胞儀檢測注射CLs后第1天及第5天其脾臟與外周血中免疫細胞的清除率。 5.清除脾臟巨噬細胞后，尾靜脈回輸CD4+T細胞和凋亡細胞，流式細胞儀檢測巨噬細胞在凋亡細胞誘導的抗原特異性CD4+T細胞的免疫反應中的作用。 結(jié)果 1.觀察到40Gy的X射線輻照劑量可以誘導細胞凋亡，誘導的凋亡細胞于37℃、5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2小時之后檢測其細胞凋亡率，早期凋亡率為45.7%，晚期凋亡率為12.4%。 2.發(fā)現(xiàn)了小鼠脾臟免疫細胞具有吞噬凋亡細胞的能力，且在回輸?shù)蛲黾毎?h脾臟免疫細胞的吞噬率最高（吞噬凋亡細胞的免疫細胞占脾臟中所有免疫細胞的0.14%），其中巨噬細胞所占比例最大；樹突狀細胞也具有吞噬凋亡細胞的能力，其中淋巴樣樹突狀細胞的吞噬率約是髓樣樹突狀細胞的3倍。 3.小鼠尾靜脈注射CLs后第1天，與未注射CLs組相比較，，外周血中被清除掉的免疫細胞主要是單核細胞（p0.001），脾臟中清除最徹底的是F4/80+巨噬細胞（p0.001），淋巴樣樹突狀細胞的清除率也較高（p0.001）。注射CLs后第5天，除F4/80+巨噬細胞外，其它被清除掉的免疫細胞基本已回復正常水平。說明CLs可以有效清除小鼠脾臟巨噬細胞。 4.清除脾臟巨噬細胞后，樹突狀細胞具有提呈凋亡細胞相關(guān)抗原的功能，但凋亡細胞誘導的抗原特異性CD4+T細胞的免疫應答能力比清除巨噬細胞前降低了約50%（p0.001），提示巨噬細胞參與了抗原提呈過程。 結(jié)論 1. CLs能有效清除小鼠脾臟巨噬細胞，注射CLs后第5天是區(qū)分巨噬細胞與DC吞噬凋亡細胞的最佳時間點。 2.巨噬細胞參與了凋亡細胞誘導的機體免疫應答過程。 3.上述實驗結(jié)果豐富了對巨噬細胞在凋亡細胞誘導的免疫反應中的作用的認識，為今后進一步研究巨噬細胞在凋亡細胞誘導的免疫反應中的作用機制提供了理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：凋亡細胞 巨噬細胞 樹突狀細胞 免疫應答
【學位授予單位】：泰山醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符號說明8-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-42
• 討論42-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻48-52
• 綜述52-63
• 參考文獻58-63
• 致謝63

【共引文獻】

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  本文關(guān)鍵詞：脾臟巨噬細胞在凋亡細胞誘導的免疫反應中的作用的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：286721