【摘要】：目的建立分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞的模型,探討Toll樣受體2(TLR2)在分枝桿菌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡中的作用。方法使用豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)誘導(dǎo)U937細(xì)胞分化使之具有吞噬能力,分別用胞內(nèi)分枝桿菌(M.intracellulare)、結(jié)核分枝桿菌(MTB)、膿腫分枝桿菌(M.abscessus)感染已分化的U937細(xì)胞,于感染后0、4、8、24、48和72h提取細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)u937細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞膜TLR2的表達(dá),Western blot檢測(cè)U937細(xì)胞感染后72 h時(shí)細(xì)胞內(nèi)總TLR2的含量,并觀察阻斷TLR2后U937細(xì)胞感染分枝桿菌后的凋亡變化。結(jié)果 M.intracellulare M.abscessus感染U937細(xì)胞后的細(xì)胞凋亡率隨時(shí)間的推移逐漸升高,4h后凋亡率已顯著高于正常對(duì)照組,而MTB感染后的細(xì)胞凋亡率也有升高但與正常對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;3種分枝桿菌感染U937細(xì)胞后的細(xì)胞凋亡率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),由高到低的排列依次為M.abscessus、M.intracellulare和MTB。U937細(xì)胞的TLR2表達(dá)量在分枝桿菌感染后4 h內(nèi)迅速升高,8 h后TLR2的含量穩(wěn)定下來,不同分枝桿菌感染U937細(xì)胞后TLR2的表達(dá)并不相同(P0.05),由高到低的排列依次為MTB、M.intracellulare和M.abscessus。阻斷U937細(xì)胞的TLR2可以明顯降低感染分枝桿菌后細(xì)胞的凋亡率。結(jié)論 TLR2并不直接引起巨噬細(xì)胞的凋亡,但TLR2在分枝桿菌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡中有重要作用。
[Abstract]:Objective to establish a model of mycobacterium infection with macrophages and to investigate the role of Toll like receptor 2 (TLR2) in mycobacterium induced macrophage apoptosis. Methods U937 cells were induced to differentiate into phagocytic cells by (PMA). U937 cells were infected with Mycobacterium endocytogenes (M.intracellulare) and Mycobacterium tuberculosis (MTB), abscess (M.abscessus), respectively. The apoptosis rate of U937 cells and the expression of TLR2 in U937 cells were detected by flow cytometry. The total TLR2 content in U937 cells 72 h after infection was detected by, Western blot. The apoptosis changes of U937 cells infected with Mycobacterium after TLR2 blocking were observed. Results the apoptosis rate of U937 cells infected with M.intracellulare M.abscessus increased gradually with the passage of time, and the apoptosis rate of U937 cells was significantly higher than that of normal control group 4 hours later. The apoptosis rate of U937 cells infected with MTB was significantly higher than that of normal controls (P0.05), and the order from high to low was M. abscessus M. intracellulare and MTB.U937. The expression of TLR2 in the cells increased rapidly within 4 h after mycobacterium infection, and the content of TLR2 stabilized at 8 h after infection. The expression of TLR2 was not the same in U937 cells infected with different mycobacteria (P0.05). The order from high to low was MTB,M.intracellulare and M.abscessus. Blocking TLR2 of U937 cells could significantly reduce the apoptosis rate of mycobacterium infection. Conclusion TLR2 does not directly induce macrophage apoptosis, but TLR2 plays an important role in mycobacterium induced macrophage apoptosis.
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)南京臨床學(xué)院(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院)呼吸內(nèi)科;
【分類號(hào)】：R378.91

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本文編號(hào)：2290169