本文選題：輪狀病毒 + VP��； 參考：《現(xiàn)代免疫學》2015年02期

【摘要】：構建表達地方流行株輪狀病毒G1型外殼蛋白VP7的復制缺陷型重組腺病毒,免疫小鼠評價其體液及細胞免疫反應效果,探討基因工程輪狀病毒疫苗的實驗基礎及可行性。RT-PCR擴增輪狀病毒VP7基因并克隆至pshuttle-CMV穿梭質粒,pshuttle-VP7與腺病毒骨架質粒同源重組后轉染293細胞包裝重組腺病毒rAd-VP7。RT-PCR、western blot檢測rAdVP7在體外細胞中的轉錄及表達。rAd-VP7經(jīng)肌注或滴鼻免疫小鼠后檢測其血清IgG、腸道IgA及中和抗體效價;流式、ELISPOT檢測淋巴細胞亞群變化及IFN-γ分泌情況。結果顯示ELISA可檢測到免疫小鼠血清IgG和滴鼻組腸道IgA抗體的產(chǎn)生;肌注和滴鼻免疫組中和抗體平均滴度分別為228和322.5;免疫小鼠脾細胞IFN-γ的分泌增加。表達輪狀病毒VP7的重組腺病毒不但能夠激發(fā)體液及細胞免疫反應,滴鼻免疫途徑還可誘導粘膜免疫應答。
[Abstract]:A replication-deficient recombinant adenovirus expressing G1 coat protein VP7 of rotavirus was constructed and immunized mice to evaluate its humoral and cellular immune response. To investigate the Experimental basis and Feasibility of genetically engineered Rotavirus Vaccine. RT-PCR amplification of rotavirus VP7 gene and cloning into pshuttle-CMV shuttle plasmid pshuttle-VP7 homologous recombination with adenovirus skeleton plasmid, then transfection into 293 cell packaging recombinant adenovirus rAd-VP7.RT-PCRrwestern blot detection The transcription and expression of rAdVP7 in vitro. RAd-VP7 was immunized by intramuscular or nasal drip to determine the titer of serum IgG, intestinal IgA and neutralizing antibody. Lymphocyte subsets and IFN- 緯 secretion were detected by flow cytometry. The results showed that ELISA could detect the production of intestinal IgA antibody in serum IgG and nasal drip group, the average titers of neutralizing antibody were 228 and 322.5 in intramuscular and nasal immunization groups, respectively, and the secretion of IFN- 緯 in spleen cells of immunized mice was increased. Recombinant adenovirus expressing rotavirus VP7 can not only stimulate humoral and cellular immune responses, but also induce mucosal immune responses.
【作者單位】： 昆明學院醫(yī)學院;中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所 北京協(xié)和醫(yī)學院 云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點實驗室;昆明醫(yī)科大學;
【基金】：國家科技重大專項資助(20132X10004002-003-05) 云南省教育廳科學研究基金(2013Y256)
【分類號】：R392.11

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

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【共引文獻】

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本文編號：1840690