目的:研究肌酸對缺氧H9C2心肌細(xì)胞GLUT4轉(zhuǎn)位的影響,旨在進一步探索改善和調(diào)控缺氧心肌細(xì)胞能量代謝的因素,以對缺血/缺氧心肌的保護提供理論依據(jù)。 方法:采用分化培養(yǎng)的H9C2心肌細(xì)胞為研究對象,利用疊氮鈉(特異性細(xì)胞色素C氧化酶抑制劑)模擬心肌細(xì)胞化學(xué)性缺氧。測定不同濃度及作用時間的肌酸溶液對H9C2心肌細(xì)胞2-[3H]脫氧葡萄糖平均攝取率的影響,確定實驗所需肌酸濃度和作用時間。分化培養(yǎng)的H9C2心肌細(xì)胞被隨機分為對照組、化學(xué)性缺氧組、肌酸組、化學(xué)性缺氧加肌酸組,然后利用差速離心及蔗糖密度梯度分離出細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)膜,再用蛋白質(zhì)印跡雜交法分別測定膜組分中GLUT4的表達,并進行比較。 結(jié)果:肌酸濃度為0.5mmol/L、作用時間為2.5 h時,細(xì)胞對2-[3H]脫氧葡萄糖攝取率達峰值;隨肌酸濃度增高,作用時間延長,細(xì)胞對2-[3H]脫氧葡萄糖攝取率不再增加。蛋白質(zhì)印跡雜交分析結(jié)果表明,同對照組相比,各處理組細(xì)胞膜GLUT4表達量明顯增加;同時,細(xì)胞內(nèi)膜GLUT4表達量相應(yīng)下降,提示各實驗組GLUT4在不同程度上發(fā)生了從細(xì)胞內(nèi)膜向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)位(P0.05)。其中,化學(xué)性缺氧加肌酸組發(fā)生最大程度轉(zhuǎn)位,且同其他各組相比差異具有顯著性(P0.05);而化學(xué)性缺氧組和肌酸組之間比較差異無顯著性(P 0.05)。 結(jié)論:化學(xué)性缺氧單獨或加入肌酸誘導(dǎo)H9C2心肌細(xì)胞GLUT4發(fā)生不同程度從細(xì)胞內(nèi)膜向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)位,其中化學(xué)性缺氧加肌酸組發(fā)生最大程度轉(zhuǎn)位�？梢�,肌酸能夠增加缺氧組GLUT4轉(zhuǎn)位。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R363

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本文編號：1832664