本文關(guān)鍵詞：HDAC4在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后的表達(dá)變化及意義

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【摘要】：目的探討坐骨神經(jīng)夾傷后,HDAC4蛋白表達(dá)變化、細(xì)胞定位情況,以及HDAC4與坐骨神經(jīng)損傷后施旺細(xì)胞增殖的關(guān)系,初步分析其在坐骨神經(jīng)損傷和修復(fù)過程中的分子生物學(xué)作用。方法首先構(gòu)建有效的SD大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型,然后應(yīng)用蛋白免疫印跡、免疫組織化學(xué)、免疫熒光等方法檢測HDAC4在坐骨神經(jīng)夾傷后的表達(dá)變化及細(xì)胞定位情況,并通過觀察在施旺細(xì)胞體外培養(yǎng)模型中干擾HDAC4的表達(dá)后施旺細(xì)胞增殖情況,來初步分析HDAC4在坐骨神經(jīng)損傷后施旺細(xì)胞增殖過程中的分子生物學(xué)意義。結(jié)果大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后,蛋白免疫印跡結(jié)果提示,HDAC4的表達(dá)顯著增加,并且差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。夾傷后,坐骨神經(jīng)組織中的HDAC4蛋白水平于12h開始緩慢上升,于5d左右達(dá)到最高,然后逐漸下降,在4W時恢復(fù)正常水平。HDAC4的免疫組織化學(xué)結(jié)果與蛋白免疫印跡實驗結(jié)果一致,并提示HDAC4可能的細(xì)胞定位情況。免疫熒光雙標(biāo)實驗結(jié)果證明,HDAC4主要表達(dá)于坐骨神經(jīng)的施旺細(xì)胞中,部分表達(dá)于巨噬細(xì)胞,而較少表達(dá)在軸突中。同時HDAC4與增殖細(xì)胞相關(guān)抗原Ki-67的表達(dá)趨勢一致,并且HDAC4與Ki-67存在施旺細(xì)胞共定位。在施旺細(xì)胞體外增殖模型中,HDAC4的表達(dá)隨著施旺細(xì)胞的增殖不斷增加,而p21的表達(dá)逐漸減少。流式細(xì)胞技術(shù)及細(xì)胞增殖分析提示,干擾HDAC4引起施旺細(xì)胞增殖受損,且p21的表達(dá)下調(diào)。結(jié)論大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后,HDAC4蛋白表達(dá)明顯增加。HDAC4主要定位在施旺細(xì)胞中,蛋白表達(dá)變化趨勢與Ki-67一致,并且與Ki-67有細(xì)胞共定位。HDAC4可能通過下調(diào)p21來促進(jìn)施旺細(xì)胞增殖,從而參與坐骨神經(jīng)損傷后的再生與修復(fù)過程。
【關(guān)鍵詞】：HDAC4 p21 增殖 施旺細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：南通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R745.4
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 第一章 緒論10-13
• 1.1 課題來源、研究的目的和意義10-11
• 1.2 國內(nèi)外研究概況11
• 1.2.1 國外研究概況11
• 1.2.2 國內(nèi)研究概況11
• 1.3 論文的主要研究內(nèi)容11-13
• 第二章 材料與方法13-22
• 2.1 研究資料及儀器設(shè)備13-16
• 2.1.1 研究對象13
• 2.1.2 主要儀器與試劑13-16
• 2.2 實驗流程與方法16-22
• 2.2.1 建立大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型16
• 2.2.2 取材16
• 2.2.3 標(biāo)本處理及冰凍切片16-17
• 2.2.4 Western blot17-18
• 2.2.5 免疫組織化學(xué)染色18-19
• 2.2.6 免疫組織熒光19-20
• 2.2.7 免疫細(xì)胞熒光20
• 2.2.8 施旺細(xì)胞體外增殖模型構(gòu)建20
• 2.2.9 流式細(xì)胞分析20
• 2.2.10 細(xì)胞增殖分析20-21
• 2.2.11 統(tǒng)計學(xué)處理21-22
• 第三章 結(jié)果22-31
• 3.1 HDAC4在坐骨神經(jīng)夾傷后的蛋白表達(dá)變化22-23
• 3.2 HDAC4在坐骨神經(jīng)夾傷后的免疫活性變化23-24
• 3.3 HDAC4在坐骨神經(jīng)夾傷后的細(xì)胞定位24-26
• 3.4 HDAC4在坐骨神經(jīng)夾傷后的細(xì)胞定位情況26
• 3.5 HDAC4與坐骨神經(jīng)夾傷后細(xì)胞增殖的關(guān)系26-29
• 3.6 施旺細(xì)胞體外增殖模型中HDAC4的表達(dá)變化29-30
• 3.7 干擾HDAC4表達(dá)對施旺細(xì)胞增殖的影響30-31
• 第四章 討論31-34
• 第五章 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 英文縮寫詞表39-41
• 綜述41-49
• 綜述參考文獻(xiàn)45-49
• 在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文49-50
• 在攻讀碩士學(xué)位期間獲得的榮譽(yù)50-51
• 致謝51

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本文編號：982185