本文關(guān)鍵詞：MiR-29c在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后抑制柔腦膜纖維化的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：背景蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)是第三位急性腦血管事件,其發(fā)生率僅次于腦梗死和腦出血。慢性交通性腦積水是蛛網(wǎng)膜下腔出血后常見(jiàn)并發(fā)癥之一,文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)生率在8%～67%,可嚴(yán)重影響患者預(yù)后。目前認(rèn)為,柔腦膜纖維化是蛛網(wǎng)膜下腔出血后慢性交通性腦積水發(fā)生的主要原因。microRNA是一類長(zhǎng)度約18～25個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼調(diào)控單鏈小RNA分子,主要功能是通過(guò)結(jié)合靶基因mRNA,抑制靶基因轉(zhuǎn)錄或促使靶基因降解,從而抑制基因表達(dá)。miR-29家族成員包括miR-29a、miR-29b-1、miR-29b-2、 miR-29c。除參與腫瘤生長(zhǎng)、細(xì)胞衰老及分化過(guò)程外,抑制組織器官纖維化是目前文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iR-29家族主要功能。在肝臟、腎臟、心臟、肺等組織器官纖維化過(guò)程中,miR-29家族表達(dá)均下調(diào)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)性蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠柔腦膜中miR-29c表達(dá)亦存在下調(diào),miR-29a、miR-29 b表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)擬利用慢病毒感染的方式使miR-29c過(guò)表達(dá),觀察miR-29c對(duì)柔腦膜纖維化的影響。目的通過(guò)觀察高表達(dá)miR-29c后實(shí)驗(yàn)性蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠柔腦膜內(nèi)膠原蛋白及腦脊液中PICP的表達(dá)情況,探討miR-29c在蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后柔腦膜纖維化過(guò)程中的作用。方法選用(300±20)g健康雄性SD大鼠26只按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組(6只)、空白慢病毒組(8只)、LV-rno-miRNA-29c組(12只)。側(cè)腦室內(nèi)分別注入5μL生理鹽水、5μL空白慢病毒、5 μ L LV-rno-miRNA-29c。注射1周后,通過(guò)枕大池二次注血法建立蛛網(wǎng)膜下腔出血模型。造模21d后處死大鼠,采集大鼠柔腦膜及腦脊液標(biāo)本,采用Realtime PCR法檢測(cè)柔腦膜內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)及miR-29c表達(dá)量,酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)檢測(cè)腦脊液(CSF)中Ⅰ型膠原前端肽(procollagen I C-Terminal propeptide, PICP)含量,柔腦膜Masson染色觀察柔腦膜膠原纖維。結(jié)果1. Realtime PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),空白慢病毒組柔腦膜中TGF-β1mRNA表達(dá)顯著高于假手術(shù)組(0.0209±0.0018VS0.0025±0.0008,P0.05),miR-29c呈表達(dá)下調(diào)(0.0148±0.0054 VS 0.0177±0.0031,P0.05)。2.酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),LV-rno-miRNA-29c組腦脊液中PICP表達(dá)低于空白慢病毒組[(181.79±14.34)VS(255.16±20.10),P0.01] ug/L。3.柔腦膜Masson染色發(fā)現(xiàn),高表達(dá)miR-29c后纖維化指標(biāo)較空白慢病毒組顯著減小(77.64±6.43 vs 108.29±7.69,P0.01)。結(jié)論1.SAH模型大鼠柔腦膜內(nèi)TGF-β1表達(dá)升高,miR-29c表達(dá)降低。2. LV-rno-miRNA-29c組大鼠慢病毒成功高表達(dá)柔腦膜內(nèi)miR-29c。3.維持miR-29c高表達(dá)可抑制SAH后柔腦膜內(nèi)膠原合成及腦脊液內(nèi)PICP釋放,從而減少細(xì)胞外基質(zhì)形成,有效控制柔腦膜纖維化的形成。
【關(guān)鍵詞】：柔腦膜纖維化 蛛網(wǎng)膜下腔出血 腦積水 TGF-β1 微RNAs
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R743.35
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 符號(hào)說(shuō)明10-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-21
• 1 材料13-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-21
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21
• 結(jié)果21-24
• 討論24-31
• 1. MicroRNA-29家族與纖維化疾病24-30
• 2. 本研究結(jié)果的探討30-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 綜述 TGF-β1在組織器官纖維化過(guò)程中的研究現(xiàn)狀37-42
• 參考文獻(xiàn)40-42
• 附圖42-45
• 致謝45-46
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文46-47
• 附件47

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李合華;李彤;韓素改;劉傳寶;魏麗紅;張平;閆海清;常麗;貴永X;禹萌;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β_1對(duì)大鼠腦膜間皮細(xì)胞結(jié)締組織因子表達(dá)的影響[J];中華腦科疾病與康復(fù)雜志(電子版);2011年02期

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本文編號(hào)：898197