土貝母苷甲誘導人神經膠質瘤U251細胞凋亡及其潛在機制的研究
發(fā)布時間:2017-09-15 07:36
本文關鍵詞:土貝母苷甲誘導人神經膠質瘤U251細胞凋亡及其潛在機制的研究
【摘要】:目的:土貝母是我國一種傳統(tǒng)的中草藥,具有廣泛的用途,土貝母苷甲(TBMS I)是從土貝母中分離純化出的一種天然化合物。本實驗以神經膠質瘤U251細胞為模型,初步探究土貝母苷甲在體外的抗膠質瘤作用及其潛在機制。方法:我們運用MTT法檢測不同濃度的TBMS I對神經膠質瘤細胞增殖的影響。通過倒置熒光顯微鏡來觀察細胞核形態(tài)學的變化。運用流式細胞儀分析TBMS I對神經膠質瘤細胞凋亡的影響以及檢測細胞內活性氧(ROS)的水平。實時熒光定量PCR技術檢測mi R-21以及PDCD4基因水平的變化。Western blot法分析相關蛋白表達水平的變化。結果:TBMS I以劑量和時間依賴方式抑制神經膠質瘤U251細胞的增殖。TBMS I處理24h后,通過Hoechst 33258染色法,我們觀察到U251細胞出現了細胞核濃染、核碎裂、凋亡小體形成等凋亡形態(tài)學改變。流式細胞儀檢測顯示,TBMS I以劑量依賴方式誘導神經膠質瘤U251細胞凋亡。Western blot結果提示,TBMS I通過上調FADD、caspase-8、caspase-3、Bax的表達以及下調Bcl-2的表達誘導U251細胞凋亡。此外,我們還發(fā)現,TBMS I能夠導致細胞中活性氧(ROS)生成增加,從而促進細胞色素C(Cytochrome C)的釋放以及Caspase-3的活化,進而誘導神經膠質瘤U251細胞凋亡。PCR結果顯示,TBMS I作用于U251細胞后,mi R-21的水平逐漸降低,而PDCD4基因的水平顯著增加。Western blot結果也表明,隨著TBMS I濃度的增加,PDCD4蛋白的表達水平顯著上調。結論:TBMS I能夠顯著抑制人膠質瘤U251細胞的增殖并誘導細胞發(fā)生凋亡。我們的研究結果提示TBMS I可能在神經膠質瘤治療方面具備廣闊的應用前景。
【關鍵詞】:土貝母苷甲 神經膠質瘤 增殖 凋亡
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.41
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-8
- 前言8-9
- 材料與方法9-21
- 結果21-28
- 討論28-32
- 結論32-33
- 參考文獻33-37
- 綜述37-47
- 參考文獻42-47
- 縮略詞表47-48
- 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文48-49
- 致謝49-50
【參考文獻】
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,本文編號:855186
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