本文關(guān)鍵詞：土貝母苷甲誘導(dǎo)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞凋亡及其潛在機制的研究

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【摘要】：目的:土貝母是我國一種傳統(tǒng)的中草藥,具有廣泛的用途,土貝母苷甲(TBMS I)是從土貝母中分離純化出的一種天然化合物。本實驗以神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞為模型,初步探究土貝母苷甲在體外的抗膠質(zhì)瘤作用及其潛在機制。方法:我們運用MTT法檢測不同濃度的TBMS I對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響。通過倒置熒光顯微鏡來觀察細胞核形態(tài)學的變化。運用流式細胞儀分析TBMS I對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞凋亡的影響以及檢測細胞內(nèi)活性氧(ROS)的水平。實時熒光定量PCR技術(shù)檢測mi R-21以及PDCD4基因水平的變化。Western blot法分析相關(guān)蛋白表達水平的變化。結(jié)果:TBMS I以劑量和時間依賴方式抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞的增殖。TBMS I處理24h后,通過Hoechst 33258染色法,我們觀察到U251細胞出現(xiàn)了細胞核濃染、核碎裂、凋亡小體形成等凋亡形態(tài)學改變。流式細胞儀檢測顯示,TBMS I以劑量依賴方式誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞凋亡。Western blot結(jié)果提示,TBMS I通過上調(diào)FADD、caspase-8、caspase-3、Bax的表達以及下調(diào)Bcl-2的表達誘導(dǎo)U251細胞凋亡。此外,我們還發(fā)現(xiàn),TBMS I能夠?qū)е录毎谢钚匝?ROS)生成增加,從而促進細胞色素C(Cytochrome C)的釋放以及Caspase-3的活化,進而誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞凋亡。PCR結(jié)果顯示,TBMS I作用于U251細胞后,mi R-21的水平逐漸降低,而PDCD4基因的水平顯著增加。Western blot結(jié)果也表明,隨著TBMS I濃度的增加,PDCD4蛋白的表達水平顯著上調(diào)。結(jié)論:TBMS I能夠顯著抑制人膠質(zhì)瘤U251細胞的增殖并誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡。我們的研究結(jié)果提示TBMS I可能在神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療方面具備廣闊的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：土貝母苷甲 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 增殖 凋亡
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-9
• 材料與方法9-21
• 結(jié)果21-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-47
• 參考文獻42-47
• 縮略詞表47-48
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文48-49
• 致謝49-50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 翁昔陽,馬潤娣,于立堅;土貝母苷甲誘導(dǎo)人鼻咽癌細胞CNE-2Z凋亡[J];癌癥;2003年08期

2 李波;闕祥勇;李意;李新志;;cdc2基因在多種人類腫瘤細胞中的表達及意義[J];廣東醫(yī)學;2012年14期

3 胡章,馬潤娣,于立堅;土貝母皂苷對HL-60細胞周期作用的研究[J];腫瘤防治雜志;2005年03期

4 于立堅;胡定慧;馬潤娣;蘇偉明;王珍玉;廖銘能;張霄瑜;于廷曦;;土貝母苷甲對人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡和腫瘤誘導(dǎo)的血管生成的影響[J];細胞生物學雜志;2008年06期

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本文編號：855186