本文關(guān)鍵詞：探討炎癥因子對體外培養(yǎng)三叉神經(jīng)節(jié)的影響

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【摘要】：目的體外培養(yǎng)完整三叉神經(jīng)節(jié)組織,建立一種能夠易于控制的類似三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)環(huán)境過程的生物活性體系。探討腫瘤壞死因子(TNF-α)對其體外培養(yǎng)三叉神經(jīng)節(jié)的三叉神經(jīng)細(xì)胞降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)的影響及水平變化。方法18只SD大鼠急性分離左右兩個三叉神經(jīng)節(jié),完整獲取36個三叉神經(jīng)節(jié)后,取12個用4%多聚甲醛固定,余下24個行體外培養(yǎng)培養(yǎng)6天后,分為正常組12個和實(shí)驗(yàn)組12個。正常組繼續(xù)換液,對實(shí)驗(yàn)組的處理:將配制好一定濃度的腫瘤壞死因子(TNF-α)加入DMEM培養(yǎng)液中,與SD大鼠三叉神經(jīng)節(jié)離體培養(yǎng)24 h。然后通過HE染色觀察體外培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)組和新鮮未培養(yǎng)組的神經(jīng)元的細(xì)胞變化,再通過免疫組化技術(shù)和蛋白技術(shù)兩種方法,觀察加入TNF-α前后CGRP的水平變化,分析TNF-α對體外培養(yǎng)三叉神經(jīng)節(jié)的影響。結(jié)果1.新鮮未培養(yǎng)組和常規(guī)培養(yǎng)組的HE染色表明體外培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞未發(fā)生明顯的組織細(xì)胞水腫、變性、壞死和細(xì)胞凋亡等病理學(xué)改變。2.蛋白印跡技術(shù)表明常規(guī)培養(yǎng)組和炎癥因子實(shí)驗(yàn)組比,腫瘤壞死因子(TNF-α)使CGRP表達(dá)水平上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),進(jìn)一步證明了炎癥因子參與三叉神經(jīng)痛的發(fā)病機(jī)制。3.免疫組化染色顯示離體培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)對照組和實(shí)驗(yàn)組內(nèi)都有CGRP免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá),對照組圖表達(dá)量相對較低,實(shí)驗(yàn)組CGRP陽性反應(yīng)細(xì)胞數(shù)表達(dá)水平顯著增高,CGRP陽性細(xì)胞出現(xiàn)棕褐色,胞體染色深淺不一,部分細(xì)胞中心部位著色淺,周圍胞漿點(diǎn)狀著色較深。4.對CGRP的免疫組化切片圖像進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果顯示炎癥因子實(shí)驗(yàn)組CGRP陽性反應(yīng)細(xì)胞數(shù)除平均面積外,平均光密度、平均積分光密度、平均灰度值顯著高于對照組(P0.01)結(jié)論炎性因子TNF-α可顯著使離體培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元CGRP表達(dá)水平上升。從細(xì)胞形態(tài)分析,離體培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)方法可行,并且能夠易于控制三叉神經(jīng)節(jié)組織生存的內(nèi)環(huán)境,對于形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)研究易于實(shí)施,是一種三叉神經(jīng)功能活動發(fā)生機(jī)制和藥物開發(fā)研究的理想體外檢測模型之一。
【關(guān)鍵詞】：三叉神經(jīng)痛 三叉神經(jīng)節(jié) 體外培養(yǎng) 腫瘤壞死因子 降鈣素基因相關(guān)肽
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R745.11
【目錄】：

• 英文縮略表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-13
• 材料與方法13-21
• 結(jié)果21-26
• 討論26-30
• 結(jié)論30
• 參考文獻(xiàn)30-35
• 附錄35-38
• 致謝38-39
• 綜述39-45
• 參考文獻(xiàn)43-45

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1 張奎啟,王福,仲維劍,張?jiān)?三叉神經(jīng)節(jié)的動脈供應(yīng)[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年01期

2 林莉,于靜濤,劉純義;牙齒損傷時(shí)神經(jīng)生長因子和降鈣素基因相關(guān)肽在三叉神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)變化[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2002年02期

3 李付勇,衣服新,馬逸,郭文師,孫愛剛;微球囊壓迫三叉神經(jīng)節(jié)對兔三叉神經(jīng)的抑制作用[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年05期

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本文編號：750341