探討炎癥因子對體外培養(yǎng)三叉神經節(jié)的影響
發(fā)布時間:2017-08-29 00:24
本文關鍵詞:探討炎癥因子對體外培養(yǎng)三叉神經節(jié)的影響
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【摘要】:目的體外培養(yǎng)完整三叉神經節(jié)組織,建立一種能夠易于控制的類似三叉神經節(jié)內環(huán)境過程的生物活性體系。探討腫瘤壞死因子(TNF-α)對其體外培養(yǎng)三叉神經節(jié)的三叉神經細胞降鈣素基因相關肽(CGRP)的影響及水平變化。方法18只SD大鼠急性分離左右兩個三叉神經節(jié),完整獲取36個三叉神經節(jié)后,取12個用4%多聚甲醛固定,余下24個行體外培養(yǎng)培養(yǎng)6天后,分為正常組12個和實驗組12個。正常組繼續(xù)換液,對實驗組的處理:將配制好一定濃度的腫瘤壞死因子(TNF-α)加入DMEM培養(yǎng)液中,與SD大鼠三叉神經節(jié)離體培養(yǎng)24 h。然后通過HE染色觀察體外培養(yǎng)的三叉神經節(jié)組和新鮮未培養(yǎng)組的神經元的細胞變化,再通過免疫組化技術和蛋白技術兩種方法,觀察加入TNF-α前后CGRP的水平變化,分析TNF-α對體外培養(yǎng)三叉神經節(jié)的影響。結果1.新鮮未培養(yǎng)組和常規(guī)培養(yǎng)組的HE染色表明體外培養(yǎng)的三叉神經節(jié)神經元細胞未發(fā)生明顯的組織細胞水腫、變性、壞死和細胞凋亡等病理學改變。2.蛋白印跡技術表明常規(guī)培養(yǎng)組和炎癥因子實驗組比,腫瘤壞死因子(TNF-α)使CGRP表達水平上調,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),進一步證明了炎癥因子參與三叉神經痛的發(fā)病機制。3.免疫組化染色顯示離體培養(yǎng)的三叉神經節(jié)對照組和實驗組內都有CGRP免疫反應陽性細胞表達,對照組圖表達量相對較低,實驗組CGRP陽性反應細胞數表達水平顯著增高,CGRP陽性細胞出現棕褐色,胞體染色深淺不一,部分細胞中心部位著色淺,周圍胞漿點狀著色較深。4.對CGRP的免疫組化切片圖像進一步統(tǒng)計學分析,結果顯示炎癥因子實驗組CGRP陽性反應細胞數除平均面積外,平均光密度、平均積分光密度、平均灰度值顯著高于對照組(P0.01)結論炎性因子TNF-α可顯著使離體培養(yǎng)的三叉神經節(jié)神經元CGRP表達水平上升。從細胞形態(tài)分析,離體培養(yǎng)的三叉神經節(jié)方法可行,并且能夠易于控制三叉神經節(jié)組織生存的內環(huán)境,對于形態(tài)學和分子生物學研究易于實施,是一種三叉神經功能活動發(fā)生機制和藥物開發(fā)研究的理想體外檢測模型之一。
【關鍵詞】:三叉神經痛 三叉神經節(jié) 體外培養(yǎng) 腫瘤壞死因子 降鈣素基因相關肽
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R745.11
【目錄】:
- 英文縮略表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 引言10-13
- 材料與方法13-21
- 結果21-26
- 討論26-30
- 結論30
- 參考文獻30-35
- 附錄35-38
- 致謝38-39
- 綜述39-45
- 參考文獻43-45
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1 張奎啟,王福,仲維劍,張元鑫;三叉神經節(jié)的動脈供應[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2001年01期
2 林莉,于靜濤,劉純義;牙齒損傷時神經生長因子和降鈣素基因相關肽在三叉神經節(jié)中的表達變化[J];解剖科學進展;2002年02期
3 李付勇,衣服新,馬逸,郭文師,孫愛剛;微球囊壓迫三叉神經節(jié)對兔三叉神經的抑制作用[J];錦州醫(yī)學院學報;2005年05期
4 黃飛;張敏;張e,
本文編號:750341
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