本文關(guān)鍵詞：離子交換整體柱的構(gòu)筑及固相萃取血清中抗癲癇藥物的研究

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【摘要】：目的對(duì)于血清中抗癲癇藥物的測(cè)定,在進(jìn)行色譜分析之前,往往需要通過適當(dāng)?shù)那疤幚砣コs質(zhì),濃縮目標(biāo)物。固相萃取由于操作簡(jiǎn)便、有機(jī)溶劑用量少、富集凈化效果好、易與現(xiàn)代分析儀器聯(lián)用等特點(diǎn),成為當(dāng)今發(fā)展最為迅速的樣品前處理方法,但商品化的固相萃取柱成本較高,難以重復(fù)使用。本論文旨在構(gòu)筑一種可以重復(fù)使用的離子交換整體柱,作為固相萃取吸附劑,結(jié)合高效液相色譜(HPLC),建立血清中抗癲癇藥物的分析測(cè)定方法。方法1通過原位聚合法制備離子交換聚(2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)(poly(AMPS-co-EDMA))(50 mm×2.1 mm,id)整體柱,考察單體的用量(69~137 mg)、反應(yīng)溫度(55~70℃)和反應(yīng)時(shí)間(4~20 h)對(duì)整體柱性能的影響,并從壓力、機(jī)械強(qiáng)度、保留因子、表面形貌等方面對(duì)整體柱進(jìn)行表征。2將最優(yōu)條件下制得的poly(AMPS-co-EDMA)整體柱作為固相萃取吸附劑,用于血清中卡馬西平、苯巴比妥、苯妥英鈉、奧卡西平代謝產(chǎn)物10,11-二氫-10-羥基卡馬西平等抗癲癇藥物及其代謝產(chǎn)物測(cè)定的前處理。實(shí)驗(yàn)考察了上樣流動(dòng)相種類(純水、磷酸二氫鈉緩沖鹽)、上樣流速(0.1 m L/min、0.3 m L/min、0.5m L/min)、洗脫流動(dòng)相種類(甲醇、乙腈)、洗脫體積(1.0~4.0 m L)、分離流動(dòng)相乙腈-磷酸二氫鈉緩沖鹽比例(v/v,55:45、50:50、45:55、40:60、35:65)、緩沖鹽濃度(5~20 mmol/L)及緩沖鹽的p H值(3.5、4.5、5.5、6.5)等因素。3在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)方法的特異性、檢出限、定量限、線性范圍和回收率等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。此外,通過同一根poly(AMPS-co-EDMA)整體柱不同使用次數(shù),以及相同批次和不同批次合成的整體柱對(duì)血清中抗癲癇藥物卡馬西平的固相萃取得到的色譜峰峰面積計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,評(píng)價(jià)該吸附劑的使用壽命和重現(xiàn)性。結(jié)果1實(shí)驗(yàn)表明,隨著反應(yīng)時(shí)間的增長(zhǎng)和反應(yīng)溫度的提高,poly(AMPS-coEDMA)整體柱的柱壓及對(duì)目標(biāo)物的保留時(shí)間呈規(guī)律性的變化。實(shí)驗(yàn)最終選擇整體柱的合成條件為65℃水浴反應(yīng)16 h,合成的整體柱柱床結(jié)構(gòu)均勻、連續(xù)多孔、通透性好。2將poly(AMPS-co-EDMA)整體柱作為固相萃取吸附劑,結(jié)合高效液相色譜法對(duì)血清中抗癲癇藥物進(jìn)行分析測(cè)定。方法使用純水上樣,上樣流速為0.1m L/min,以甲醇為洗脫流動(dòng)相,在洗脫體積為2.0 m L的條件下洗脫,進(jìn)行液相色譜分析。3方法的線性范圍為0.5~80.0mg/m L,檢出限為0.04mg/m L,定量限為0.13mg/m L�？R西平、苯巴比妥、苯妥英鈉及10-羥基卡馬西平在1.5、20.0、50.0mg/m L三個(gè)添加水平下的加標(biāo)回收率為83.1%~102.9%,日內(nèi)和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差￡5.33%。同一根整體柱第1次、第100次和第150次使用,卡馬西平色譜峰峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.73%。使用相同批次和不同批次合成的poly(AMPSco-EDMA)整體柱,得到卡馬西平色譜峰峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.26%和6.91%。結(jié)論基于2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸的離子交換整體柱固相萃取,結(jié)合高效液相色譜分析測(cè)定血清中卡馬西平、苯巴比妥、苯妥英鈉、10,11-二氫-10-羥基卡馬西平的方法,能夠滿足血清中抗癲癇藥物的常規(guī)分析測(cè)定要求。離子交換整體柱作為前處理吸附劑,制備方法簡(jiǎn)單,結(jié)構(gòu)連續(xù)多孔,比表面積大,通透性好,生物兼容性良好,重復(fù)使用次數(shù)不低于150次,能極大的降低成本。
【關(guān)鍵詞】：離子交換整體柱 固相萃取 抗癲癇藥物 血清 高效液相色譜
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R742.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-13
• 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-34
• 1.1 材料與方法13-16
• 1.1.1 主要試劑和材料13-14
• 1.1.2 樣品制備14
• 1.1.3 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱的制備14-15
• 1.1.4 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱固相萃取和HPLC分析測(cè)定15
• 1.1.5 方法驗(yàn)證15-16
• 1.2 結(jié)果16-27
• 1.2.1 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱的構(gòu)筑和表征16-18
• 1.2.2 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱固相萃取條件優(yōu)化18-22
• 1.2.3 HPLC分離分析條件優(yōu)化22-24
• 1.2.4 方法驗(yàn)證24-27
• 1.3 討論27-30
• 1.3.1 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱的構(gòu)筑27-28
• 1.3.2 Poly（AMPS-co-EDMA）整體柱固相萃取考察28
• 1.3.3 文獻(xiàn)方法與實(shí)驗(yàn)方法對(duì)比28-30
• 1.4 小結(jié)30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 第2章 綜述 血液樣品預(yù)處理技術(shù)及整體柱固相萃取在血藥濃度監(jiān)測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用34-49
• 2.1 前言34-35
• 2.2 血液樣品預(yù)處理35-41
• 2.2.1 蛋白沉淀法35-36
• 2.2.2 液-液萃取法36-37
• 2.2.3 超臨界流體萃取37-38
• 2.2.4 微透析38-39
• 2.2.5 固相萃取法39-41
• 2.3 整體柱41-44
• 2.3.1 整體柱分類41-43
• 2.3.2 整體柱固相萃取在血藥濃度監(jiān)測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用43-44
• 2.4 展望44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 結(jié)論49-50
• 致謝50-51
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介51-52
• 作者簡(jiǎn)介52-53
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集53

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本文編號(hào)：724537