發(fā)布時間：2017-08-23 09:42

  本文關(guān)鍵詞：酪氨酸激酶2（DDR2）和血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）在腦膠質(zhì)瘤中的表達及相關(guān)性研究

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【摘要】：目的:通過對不同級別腦膠質(zhì)瘤組織及正常腦組織中的酪氨酸激酶2及血管內(nèi)皮細胞生長因子蛋白表達含量的測定,探討膠質(zhì)瘤中酪氨酸激酶2和血管內(nèi)皮細胞生長因子在腦膠質(zhì)瘤中的表達意義及兩者的相關(guān)性。方法:收集自2013年5月-2014年10月河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經(jīng)外科腦膠質(zhì)瘤組織標本85例,其中WHO分級I級腦膠質(zhì)瘤14例,II級腦膠質(zhì)瘤27例,III級腦膠質(zhì)瘤25例,IV級腦膠質(zhì)瘤19例。所取病例標本病理診斷均由河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院病理科按照WHO腦腫瘤分級診斷標準進行。正常腦組織標本取自因腦外傷或者腦出血患者需做顱內(nèi)減壓術(shù)所取的腦組織標本,共取15例作為對照組。本實驗所取腦膠質(zhì)瘤病理均為入院后初次診斷,手術(shù)前均未經(jīng)過任何放化療等抗腫瘤治療。所有實驗用標本,均于術(shù)中切下病理組織后立即取材,10%的福爾馬林固定及液氮罐-80℃保存。將以上標本分為五組:正常腦組織組,I級膠質(zhì)瘤組,II級膠質(zhì)瘤組,III級膠質(zhì)瘤組,IV級膠質(zhì)瘤組。采用免疫組織化學方法檢測VEGF和DDR2在上述五組病理組織切片中的表達情況,并用統(tǒng)計軟件SPSS13.0分析其表達特點及相關(guān)性,采用免疫熒光法檢測VEGF和DDR2在同一切片中表達情況并觀測兩種因子表達特點。應用Western Blot法同測定上述五組標本VEGF和DDR2的蛋白條帶,并應用相關(guān)軟件檢測五組條帶的灰度值,應用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:1免疫組化果顯示:VEGF在正常腦組織、I級腦膠質(zhì)瘤、II級腦膠質(zhì)瘤、III級腦膠質(zhì)瘤、IV級腦膠質(zhì)瘤表達陽性率分別為6.67%、71.43%、88.89%、100.00%、100.00%,隨著腫瘤惡性程度增高,VEGF表達量增加,Spearman等級相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.698,P0.01,VEGF表達與腫瘤分級呈正相關(guān),即腫瘤分級越高,VEGF表達陽性率越高,圖片見:Fig1。統(tǒng)計圖表詳見Table 1、Table 3;2免疫組化結(jié)果顯示:DDR2在正常腦組織、I級腦膠質(zhì)瘤、II級腦膠質(zhì)瘤、III級腦膠質(zhì)瘤、IV級腦膠質(zhì)瘤表達陽性率分別為33.33%、78.57%、88.89%、96.00%、100.00%,隨著腫瘤惡性程度增高,DDR2表達量增加,Spearman等級相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.588,P0.01,DDR2表達與腫瘤分級呈正相關(guān),即腫瘤分級越高,DDR2表達陽性率越高。圖片見:Fig2詳見Table 2、Table 4;3對VEGF、DDR2的表達情況進行相關(guān)性分析。Spearman等級相關(guān)得出相關(guān)系數(shù)r=0.928,P0.01,即VEGF表達與DDR2表達呈高度正相關(guān),即VEGF表達陽性等級越高,DDR2表達陽性等級越高,詳見Table 5;4采用免疫熒光雙標法觀察同一病理組織中兩種因子分布情況。紅色熒光為VEGF因子,綠色熒光為DDR2因子,藍色熒光為細胞核。可見在同一組織中兩種因子的分布有聚集性。詳見Fig3、Fig4、Fig5;5蛋白含量:采用western blot方法對標本的蛋白含量進行測定。觀察DDR2、VEGF及action在正常腦組織、I級腦膠質(zhì)瘤、II級腦膠質(zhì)瘤、III級腦膠質(zhì)瘤、IV級腦膠質(zhì)瘤中的蛋白表達情況,結(jié)果以測定的灰度值為準。分析VEGF、DDR2的相對表達量,VEGF的相對表達量逐漸升高,DDR2的相對表達量逐漸增高。各級別腦膠質(zhì)瘤組分別與正常腦組織組向比較,采用單因素方差分析。結(jié)果以均數(shù)±標準差表示,P0.05,均有統(tǒng)計學意義。詳見Table 6、Fig 6、Fig 7、Fig 8。結(jié)論:1與正常腦組織的對照組相比,各腦膠質(zhì)瘤組中的DDR2表達及VEGF表達明顯增高,且隨著腦膠質(zhì)瘤的級別增加表達增高越明顯,存在顯著性差異(P0.01)。2與正常腦組織的對照組相比,各腦膠質(zhì)瘤組中的DDR2及VEGF蛋白含量明顯增高,且隨著腦膠質(zhì)瘤級別增高,兩種因子所表達的蛋白表達越高。蛋白表達與腦膠質(zhì)瘤級別存在正相關(guān)性。提示腫瘤的惡性水平在一定程度上可以影響著DDR2的蛋白含量的表達。3在免疫熒光圖片中可以見到,在多組標本中,DDR2蛋白表達部位與VEGF蛋白表達部位是重合的。結(jié)合統(tǒng)計學分析結(jié)果,DDR2與VEGF存在一定的相關(guān)性。4通過對正常腦組織及不同級別腦膠質(zhì)瘤組內(nèi)免疫組化結(jié)果進行Spearman等級相關(guān)性分析,P0.01,VEGF表達與DDR2表達呈高度正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：人腦膠質(zhì)瘤 DDR2 VEGF 免疫組化 Western blot
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-25
• 附圖25-33
• 附表33-37
• 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-43
• 綜述DDR2 和VEGF在腦膠質(zhì)瘤中的表達及意義及相關(guān)性43-53
• 參考文獻49-53
• 致謝53-54
• 個人簡歷54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 姜華;孫成法;褚榮濤;葉凱;黃煒;趙富文;丘佳明;王君祥;;人腦膠質(zhì)瘤MMP2/TIMP2與腫瘤血管的相關(guān)性分析[J];臨床神經(jīng)外科雜志;2014年06期

2 段澤星;謝立群;;VEGF在腫瘤生長和血管生成中的作用[J];世界華人消化雜志;2010年27期

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本文編號：724355