本文關鍵詞：1、IC53基因促動脈粥樣硬化炎癥作用及機制研究 2、腎小球濾過率下降與出血性腦卒中復發(fā)和預后不良相關—前瞻性研究

  更多相關文章： IC53 動脈粥樣硬化 炎癥反應 MCP-1 粘附 腎小球濾過率 卒中 腦出血 死亡率 危險因素 預后

【摘要】：目的：動脈粥樣硬化是心血管疾病的主要病理生理基礎,是一種由脂質代謝異常、慢性炎癥、免疫紊亂、氧化應激、內皮損傷、血管新生及遺傳等多種因素作用下發(fā)生的一種慢性代償性炎癥反應。遺傳因素和環(huán)境因素共同導致動脈粥樣硬化的發(fā)生與進展,鑒定動脈粥樣硬化相關基因十分重要。動脈粥樣硬化的始動環(huán)節(jié)是單核細胞粘附、遷移到內皮層下引發(fā)炎癥反,靶向干預炎癥反應將會延緩動脈粥樣硬化斑塊的形成與破裂。我們前期發(fā)現(xiàn)IC53基因在斑塊中表達且促進血管新生。因而推測IC53基因能促進單核細胞的炎癥反應,以及單核細胞與內皮細胞的粘附、趨化,促進粥樣硬化。本研究旨在通過體外實驗研究IC53基因促進炎癥反應及功能改變,最后分析IC53促進炎癥的具體通路和機制。方法：為驗證我們的假設,我們首先利用動脈粥樣硬化炎癥刺激物ox-LDL刺激內皮細胞后,Western方法檢測IC53表達量的改變。然后,用siRNA干擾IC53基因后,通過細胞粘附實驗及transwell實驗分析檢測IC53在單核細胞與胞外基質的粘附作用及侵襲能力的改變。分別siRNA干擾IC53和腺病毒過表達IC53基因后用qRT-PCR方法檢測相關炎癥因子MCP-1、趨化因子ICAM、VCAM的表達變化,并選用Affymetrix HTA2.0芯片進行基因表達差異及可變剪接分析。為進一步明確IC53基因對炎癥因子MCP-1影響的具體機制,我們通過免疫共沉淀和質譜實驗篩選可能與其相互作用的蛋白。結果：HUVEC細胞在不同濃度的ox-LDL刺激48h后,IC53表達量上升。當ox-LDL濃度為100ug/ml,刺激HUVEC細胞48h后,與對照組相比,IC53的表達量升高到2.4倍。粘附實驗表明單核細胞干擾IC53基因后與HUVEC細胞的粘附率下降到0.31倍(P=0.007),劃痕實驗表明HUVEC細胞干擾IC53基因后橫向遷移率下降到0.84倍(P=0.04)。THP-1細胞干擾IC53基因表達后,MCP-1(降至0.4倍,P0.001)、ICAM(降至0.75倍,P0.001)以及VCAM(降至0.75倍,P0.001)的mRNA水平均下降。而腺病毒Ad5Max-IC53過表達基因IC53后,MCP-1的mRNA水平升高到2.8倍(P0.05)。芯片分析結果表明,差異表達的基因中與動脈粥樣硬化炎癥相關的基因有MCP-1、TLR8、EFTUD2。芯片分析與候選基因分析均發(fā)現(xiàn)IC53可調控MCP-1。免疫共沉淀實驗(Co-IP)和質譜實驗篩選與IC53相結合并調控MCP-1的蛋白,包括熱休克蛋白B1、鈣磷脂結合蛋白A2、肌球蛋白1E、異硫氰酸鹽。結論：綜上所述,我們研究發(fā)現(xiàn)IC53基因能通過調控MCP-1促進動脈粥樣硬化的炎癥反應。我們的研究結果為進一步理解動脈粥樣硬化的機制,尋找防治靶點提供了線索。目的：研究表明慢性腎臟疾病可以獨立預測腦卒中的不良預后和復發(fā),然而它與腦卒中各個亞型結局的關系仍然不明確,本研究的目的是分析估計的腎小球濾過率下降與不同類型腦卒中的復發(fā)和預后的相關性。方法：我們于2000年至2001年共納入2000例腦卒中患者并平均隨訪4.5年。根據MDRD公式計算eGFR,再根據eGFR將腦卒中患者(n=1506)分為腎小球濾過率正常組(n=493,eGFR90ml/min/1.73m2),腎小球濾過率輕度下降組(n=867,60eGFR≤90 ml/min/1.73m2),腎小球濾過率中重度下降組(n=146, eGFR≤ 60ml/min/1.73m2),比較三組間卒中復發(fā)與預后的差異性。以Kaplan-Meier分析法和Cox回歸模型分析eGFR和卒中復發(fā)及預后的關系。結果：在全部腦卒中患者人群中,與腎小球濾過率正常組相比,濾過率中重度下降組卒中復合終點事件(復發(fā)、心梗、全因死亡率)發(fā)生率更高(P0.001),卒中復發(fā)與死亡(死因為心血管病或卒中)也得到類似的結論(P=0.009,P=0.001)。在控制了年齡、性別及其它心血管危險因素后,濾過率中重度下降是復合終點事件(校正相對危險度RR=1.93,95%CI=1.39-2.69,P0.001).卒中復發(fā)(校正相對危險度RR=1.62.95%CI=1.07-2.47,P=0.024).心血管病或卒中死亡(校正相對危險度RR=1.96,95%CI=1.10-3.49,P=0.022)的獨立預測因子。在腦出血人群中,與腎小球濾過率正常組相比,濾過率中重度下降組卒中復合終點事件(復發(fā)、心梗、全因死亡率)發(fā)生率更高(P=0.012),卒中復發(fā)與死亡(死因為心血管病或卒中)也得到類似的結論(P=0.013,P=0.001)。在控制了年齡、性別及其它心血管危險因素后,濾過率中重度下降是復合終點事件(校正相對危險度RR=2.93.95% CI=1.58-5.43,P=0.001).卒中復發(fā)(校正相對危險度RR=3.06,95%CI=1.46-6.40, P=0.003).心血管病或卒中死亡(校正相對危險度RR=3.57,95%CI=1.46-8.70, P=0.005)的獨立預測因子。結論：低eGFR曾加腦卒中及出血性腦卒中復發(fā)和不良預后的風險。
【關鍵詞】：IC53 動脈粥樣硬化 炎癥反應 MCP-1 粘附 腎小球濾過率 卒中 腦出血 死亡率 危險因素 預后
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R743.3;R543.5
【目錄】：

• 第一部分 IC53基因促動脈粥樣硬化炎癥作用及機制研究5-35
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 研究對象和方法11-19
• 一、研究對象11
• 二、實驗材料11-13
• 1. 實驗試劑11-12
• 2. 實驗儀器12-13
• 三、實驗方法13-19
• 1. 細胞培養(yǎng)和用相應刺激物處理13
• 2. THP-1細胞經過處理后的后續(xù)各項指標檢測方法13-18
• 3. 免疫共沉淀實驗18
• 4. 數據統(tǒng)計18-19
• 研究結果19-30
• 一、IC53參與動脈粥樣硬化炎癥反應19-25
• 1. 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激HUVEC,IC53蛋白表達水平升高19-21
• 2. 敲低IC53基因后THP-1細胞粘附能力及HUVEC細胞遷移能力被抑制21-25
• 二、IC53調節(jié)炎癥反應的具體機制25-30
• 1. 敲低IC53基因后MCP-1、ICAM、VCAM表達下降25-27
• 2. IC53基因過表達后MCP-1表達升高27-28
• 3. 芯片篩選差異表達基因28-29
• 4. 質譜實驗分析IC53調控炎癥因子的具體機制29-30
• 討論30-32
• 參考文獻32-35
• 第二部分 腎小球濾過率下降與腦卒中復發(fā)和預后不良相關-前瞻性研究35-62
• 中文摘要35-36
• Abstract36-37
• 前言37-39
• 研究對象和方法39-41
• 一、研究對象的臨床入選標準及排除標準39
• 二、生化指標檢測及臨床數據收集39-40
• 三、隨訪工作及腦卒中結局的判定40
• 四、統(tǒng)計分析40-41
• 結果41-55
• 一、臨床基本資料41
• 二、低腎小球濾過率與出血性腦卒中復發(fā)與預后的關系41-47
• 1. 腎小球濾過率中重度下降增加出血性卒中患者復合終點事件發(fā)生的風險41-43
• 2. 腎小球濾過率中重度下降增加出血性卒中患者卒中復發(fā)的風險43-45
• 3. 腎小球濾過率中重度下降增加出血性卒中患者心血管病或卒中死亡的風險45-47
• 三、低腎小球濾過率與全部腦卒中復發(fā)與預后的關系47-50
• 1. 腎小球濾過率中重度下降增加卒中患者復合終點事件發(fā)生的風險47
• 2. 腎小球濾過率中重度下降增加卒中患者卒中復發(fā)的風險47
• 3. 腎小球濾過率中重度下降增加卒中患者心血管病或卒中死亡的風險47-50
• 四、低腎小球濾過率與腦血栓復發(fā)與預后的關系50-53
• 1. 腎小球濾過率中重度下降增加腦血栓患者復合終點事件發(fā)生的風險50
• 2. 腎小球濾過率中重度下降與腦血栓患者卒中復發(fā)風險無關50
• 3. 腎小球濾過率中重度下降增加腦血栓患者心血管病或卒中死亡的風險50-53
• 五、低腎小球濾過率與腔隙性腦梗復發(fā)與預后的關系53-55
• 討論55-57
• 參考文獻57-62
• 綜述 趨化因子與動脈粥樣硬化的研究進展62-71
• 摘要62
• 一、趨化因子作用的細胞特異性62-63
• 二、趨化因子作用的階段特異性63-64
• 三、MCP-1、CCL3、CCR7、MIF的致粥樣硬化作用64
• 四、趨化因子抗凋亡、促增殖作用64-65
• 五、病毒編碼趨化因子及抗趨化因子藥物65
• 結論65-66
• 參考文獻66-71
• 附錄71-80
• 縮略詞表80-82
• 致謝82-83
• 個人簡歷83-84

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 宋莉,秦寶明,葉玨,韓玉,張震,王偉,石毅,汪一波,尚尉,孫凱,張紅葉,惠汝太;IC53基因多態(tài)性與腦卒中的關系[J];中國分子心臟病學雜志;2002年04期

2 陳敬洲,韓玉,張銀輝,石毅,汪一波,張禪那,鄭翼,惠汝太;IC53基因超表達改變系列心衰相關基因表達水平[J];中國分子心臟病學雜志;2005年01期

，

本文編號：669665