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間充質(zhì)干細胞來源的Exosome對神經(jīng)損傷的保護作用

發(fā)布時間:2017-08-08 21:17

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【摘要】:目的研究脂肪間充質(zhì)干細胞(MSC)來源的Exosome對谷氨酸神經(jīng)損傷的保護作用及可能機制。方法采用透射電鏡和Western blot法檢測人脂肪MSC來源的Exosome的特征,ELISA法檢測Exosome中主要的細胞因子。用PC12細胞建立谷氨酸神經(jīng)細胞損傷模型,并分為對照組(未經(jīng)谷氨酸損傷的細胞)、Glu組(谷氨酸損傷未經(jīng)其他處理的細胞)、Glu+Exo組(谷氨酸損傷后用100 ng/ml MSC Exosome處理的細胞)、Glu+Exo+Akt組(谷氨酸損傷后用MSC Exosome同時加10μmol/L Akt抑制劑LY294002處理的細胞)、Glu+Exo+Erk組(谷氨酸損傷后用MSC Exosome同時加10μmol/L Erk抑制劑U0126處理的細胞)和Glu+Exo+Trk B組(谷氨酸損傷后用MSC Exosome同時加10μmol/L Trk B抑制劑K252a處理的細胞),MTS法檢測各組細胞的存活率并進行比較。結(jié)果透射電鏡下可見Exosome為40~100 nm的小囊泡結(jié)構(gòu),Western blot法檢測結(jié)果顯示其可表達CD63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白。ELISA檢測結(jié)果顯示Exosome中主要包含的細胞因子為肝細胞生長因子和胰島素樣生長因子,含量分別為9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、血管內(nèi)皮生長因子和神經(jīng)生長因子含量均較低,分別為1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43。MTS檢測結(jié)果顯示,對照組、Glu組、Glu+Exo組、Glu+Exo+Akt組、Glu+Exo+Erk組和Glu+Exo+Trk B組的PC12細胞存活率分別為0.842±0.047、0.306±0.024、0.566±0.026、0.461±0.016、0.497±0.003和0.515±0.034,其中,Glu組顯著低于對照組(P=0.02),Glu+Exo組顯著高于Glu組(P=0.01),Glu+Exo+Akt組顯著低于Glu+Exo組(P=0.01)。結(jié)論人脂肪MSC來源的Exosome具有保護谷氨酸神經(jīng)損傷的作用,這可能是通過激活磷脂;3激酶-絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶信號通路來實現(xiàn)的。
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院神經(jīng)外科;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所組織工程中心;
【關(guān)鍵詞】間充質(zhì)干細胞 Exosome 神經(jīng)損傷 治療機制
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81371344)~~
【分類號】:R741
【正文快照】: Protection of Nerve Injury with Exosome Extracted from Mesenchymal Stem CellWEI Jun-ji1,CHEN Yun-fei2,XUE Chun-ling2,MA Bai-tao1,SHEN Ya-mei2,GUAN Jian1,BAO Xin-jie1,WU Hao1,HAN Qin2,WANG Ren-zhi1,ZHAO Chun-hua21Department of Neurosurgery,PUMC Hospital,C

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本文編號:642092


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