本文關(guān)鍵詞：沉默髓樣細(xì)胞白血病-1基因?qū)Υ笫竽X缺血再灌注后自噬和梗死體積的影響

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【摘要】：目的研究沉默髓樣細(xì)胞白血病-1(Mcl-1)基因?qū)Υ笫竽X缺血再灌注后自噬和梗死體積的影響。方法以線栓法制作SD大鼠大腦中動脈阻塞再灌注(MCAO)模型,腦缺血1 h再灌注72 h。SD大鼠按照體重隨機(jī)分為正常組、模型組和實(shí)驗(yàn)組,每組10只。分別在MCAO術(shù)前1 h,模型組和實(shí)驗(yàn)組以立體定位并腦內(nèi)注射慢病毒載體Mcl-1短發(fā)夾RNA(shRNA)及陰性對照shRNA液體。以免疫熒光染色檢測Mcl-1表達(dá),以免疫印跡法分析Mcl-1、自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白輕鏈3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和Beclin-1蛋白表達(dá),以噻唑藍(lán)(TTC)染色法測定并計算腦梗死體積。結(jié)果腦缺血再灌注后,在梗死灶周邊的皮質(zhì)和紋狀體區(qū),散在大量Mcl-1熒光陽性細(xì)胞。梗死灶周邊的皮質(zhì)和紋狀體區(qū)Mcl-1蛋白水平,模型組為1.17±0.03,約為正常組0.21±0.04的5倍,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。注射慢病毒Mcl-1-shRNA載體顯著下調(diào)腦缺血再灌注后Mcl-1表達(dá),實(shí)驗(yàn)組Mcl-1蛋白水平為0.43±0.06,約為模型組的36%,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。梗死灶周邊的皮質(zhì)和紋狀體區(qū)Beclin-1蛋白水平,模型組為0.86±0.03,約為正常組0.21±0.05的4倍,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。梗死灶周邊的皮質(zhì)和紋狀體區(qū)LC3-Ⅱ蛋白水平,模型組為0.83±0.04,約為正常組0.19±0.05的4.3倍,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。注射慢病毒Mcl-1-shRNA載體顯著上調(diào)腦缺血再灌注后LC3-Ⅱ表達(dá),實(shí)驗(yàn)組LC3-Ⅱ蛋白水平為2.17±0.06,約為模型組的2.6倍,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。注射慢病毒Mcl-1-shRNA載體后,實(shí)驗(yàn)組的Beclin-1蛋白水平為1.94±0.05,約為模型組的2.3倍,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。實(shí)驗(yàn)組大鼠腦梗死體積為(0.38±0.02)mm3,顯著高于模型組腦梗死體積的(0.29±0.01)mm3,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論沉默Mcl-1基因可顯著上調(diào)腦缺血后自噬反應(yīng)和增加腦梗死體積,推測Mcl-1在腦梗死中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院福建省立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 髓樣細(xì)胞白血病- 自噬 腦缺血
【基金】：福建省自然科學(xué)基金面上基金資助項(xiàng)目(2014J01401;2013J01275)
【分類號】：R743.3
【正文快照】： (福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院福建省立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,福州350001)ZHANG Xu,CHEN Xing-yong,LEI Hui-xin,WANG Xiao-song,JIANG Xiu-long(Department of Neurology,FujianProvincial Hospital,Provincial ClinicalMedical College,Fujian MedicalUniversity,Fuzhou 350001,China

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