發(fā)布時間：2017-08-01 20:30

  本文關(guān)鍵詞：miR-34c-3p調(diào)控腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、分化、凋亡的機(jī)制研究

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【摘要】：目的探討miR-34c-3p調(diào)控腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖、分化、凋亡的機(jī)制。方法用脂質(zhì)體分別將miR-34c-3p mimics和miR-34c-3p inhibitors轉(zhuǎn)入U87細(xì)胞中,用RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染效果;用MTT檢測轉(zhuǎn)染miR-34c-3p對U87細(xì)胞增殖的影響;用平板克隆法檢測轉(zhuǎn)染miR-34c-3p對U87細(xì)胞分化的影響;用流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染miR-34c-3p對U87細(xì)胞凋亡的影響;通過Pic Tar、miRanda和Target Scan靶基因預(yù)測庫預(yù)測miR-34c-3p的靶基因,用雙熒光素酶表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行靶基因鑒定,RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染miR-34c-3p對靶基因mRNA表達(dá)的影響,Western-blot檢測轉(zhuǎn)染miR-34c-3p對靶基因蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 miR-34c-3p在U87細(xì)胞中的表達(dá)顯著低于正常膠質(zhì)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染miR-34c-3p mimics后,U87細(xì)胞miR-34c-3p mRNA的表達(dá)上調(diào),細(xì)胞存活率降低,細(xì)胞形成克隆的能力下降,細(xì)胞凋亡率升高,與對照組相比均具有顯著性差異;轉(zhuǎn)染miR-34c-3p inhibitors后,U87細(xì)胞miR-34c-3p mRNA表達(dá)量下降,細(xì)胞存活率顯著升高,細(xì)胞形成克隆的能力上升,細(xì)胞凋亡率下降,與對照組相比差異均具有顯著性。靶基因庫預(yù)測Notch2是miR-34c-3p的靶基因,轉(zhuǎn)染miR-34c-3p mimics后,Notch2的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)下降,轉(zhuǎn)染miR-34c-3p inhibitors后,Notch2的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)上升,共轉(zhuǎn)染miR-34c-3p mimics和wt Notch2后熒光素酶活性顯著降低,與對照組相比均具有顯著性差異。結(jié)論 miR-34c-3p通過靶基因Notch2抑制腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖、分化,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
【作者單位】： 海口市人民醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】： 腦膠質(zhì)瘤 miR-c-p 增殖 分化 凋亡
【基金】：海南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(211108)
【分類號】：R739.41
【正文快照】： 腦膠質(zhì)瘤是發(fā)生于顱內(nèi)的惡性腫瘤,治療以手術(shù)為主。本研究將miR-34c-3p mimics和miR-34c-3pinhibitors分別轉(zhuǎn)染進(jìn)腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞,檢測了轉(zhuǎn)染miR-34c-3p后腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、分化以及凋亡的情況,并預(yù)測了miR-34c-3p可能的靶基因,探討了miR-34c-3p影響腦膠質(zhì)瘤增殖、分化、凋亡

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本文編號：606081