本文關(guān)鍵詞：黃體酮促進(jìn)腦出血小鼠遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)的機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的腦出血為常見腦血管病。其具有高致殘率、高死亡率的特點(diǎn),并缺乏有效的治療措施日益危害人類健康,為醫(yī)學(xué)界所關(guān)注。既往其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究已經(jīng)證實(shí)黃體酮具有抗凋亡、抗自由基、抗炎、減輕神經(jīng)興奮毒性、減輕腦水腫、促進(jìn)髓鞘再生與神經(jīng)發(fā)生的作用。然而,目前尚未見到黃體酮治療腦出血的研究報(bào)道。為發(fā)現(xiàn)腦出血有效的治療手段及可能的治療靶點(diǎn),本項(xiàng)目擬研究黃體酮對腦出血小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及對遠(yuǎn)期神經(jīng)功能的影響。方法1.實(shí)驗(yàn)動物與分組:清潔級成年雄性C57BL/6小鼠(體質(zhì)量25-35g,n=130),按照隨機(jī)數(shù)字表法分為3組:(1)假手術(shù)(Sham-operated group,n=40),術(shù)中僅切開頭皮并縫合;(2)溶劑治療組(vehicle-treated ICH group,n=45),于腦出血成模后給予腹腔注射22.5%羥丙基-β-環(huán)糊精(HBC)溶液;(3)黃體酮治療組(progesterone-treated group,n=45),于腦出血成模后給予腹腔注射黃體酮溶液。2.小鼠腦出血模型:采用膠原酶尾狀核立體定位注射法建立小鼠腦出血模型。小鼠的尾狀核定位于前囟左2.2mm,前囟前0.8mm,進(jìn)針深度為2.9mm處。3.黃體酮溶液的配制及注射:將黃體酮粉末溶于22.5%羥丙基-β-環(huán)糊精(HBC)溶液中。黃體酮治療組于腦出血后1 h腹腔注射黃體酮溶液(8mg/kg),并分別于腦出血后6、24、48h皮下注射黃體酮溶液;溶劑治療組在相同時(shí)間點(diǎn)給予等體積的HBC治療。4.實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo):(1)早期組織病理學(xué)與形態(tài)學(xué)指標(biāo):(1)Ibal-1、MPO、GFAP免疫熒光染色檢測腦出血后3d血腫周圍活化的小膠質(zhì)細(xì)胞、單核細(xì)胞的形態(tài)與數(shù)量及活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度;FJB免疫熒光染色檢測腦出血后3d血腫周圍變性的神經(jīng)元;(2)Luxol fast blue/Cresyl Violet染色檢測腦出血后3d血腫體積大小,腦腫脹程度;(3)干濕重法檢測腦出血后3d時(shí)兩側(cè)大腦半球及小腦的含水量。(2)分子生物學(xué)指標(biāo):(1)細(xì)胞因子的檢測:應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測腦出血后1d時(shí)COX-1、COX-2、HMGB1、IL-1β、VEGF在血腫側(cè)大腦半球的表達(dá);(2)金屬基質(zhì)蛋白酶的檢測:運(yùn)用Gelatin Zymography(明膠酶譜法)檢測腦出血后1d時(shí)出血側(cè)大腦半球MMP-2與MMP-9的活性;⑶氧化應(yīng)激反應(yīng)的檢測:于腦出血術(shù)后12h應(yīng)用oxyblot評價(jià)出血側(cè)大腦半球蛋白羥基化程度,并用Western blot技術(shù)檢測nitrotyrosine的水平評價(jià)出血側(cè)大腦半球蛋白硝基化程度;(4)Na+-K+-ATP酶表達(dá)水平的檢測:應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測腦出血后1d時(shí)Na-K-ATPase Ser23(NKA Ser23)、Na-KATPase Ser943(NKA Ser943)、Na-K-ATPaseα1(NKA-α1)、Na-K-ATPaseα3(NKA-α3)在血腫側(cè)大腦半球的表達(dá)。(3)遠(yuǎn)期組織病理學(xué)及行為學(xué)評價(jià):于腦出血后28d應(yīng)用GFAP免疫熒光染色技術(shù)檢測出血側(cè)周圍膠質(zhì)瘢痕的厚度,Luxol fast blue/Cresyl Violet染色評價(jià)腦白質(zhì)損傷情況、腦萎縮程度、殘留腦損傷體積。分別于腦出血后1、3、7、14、21、28d應(yīng)用24分神經(jīng)功能評分系統(tǒng)評價(jià)神經(jīng)功能的變化,并在該過程中記錄肛溫、體質(zhì)量。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,定量資料均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(c±s)來表示。死亡率采用卡方檢驗(yàn)分析。Students’s t-檢驗(yàn)用于兩組間差異性比較。多組間差異性比較用單因素方差分析,組間兩兩比較采用Bonferroni檢驗(yàn)。體質(zhì)量、肛溫及神經(jīng)功能評分多組間的差異性分析采用重復(fù)測量方差分析,組間兩兩比較采用Bonferroni檢驗(yàn)。P0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.黃體酮對腦出血后組織病理學(xué)及遠(yuǎn)期神經(jīng)功能的影響。1.1黃體酮治療顯著減輕腦出血急性期腦損傷程度。黃體酮治療能夠顯著減小腦出血后3d腦血腫體積、腦腫脹程度(n=10-11/group,P0.05)及腦組織含水量(n=6/group,P0.05),與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1.2黃體酮治療顯著改善腦出血遠(yuǎn)期組織病理學(xué)改變并促進(jìn)遠(yuǎn)期神經(jīng)功能的恢復(fù)。腦出血后28d,溶劑治療組膠質(zhì)瘢痕的形成及腦白質(zhì)損傷比較明顯,經(jīng)黃體酮治療后,出血灶周圍的膠質(zhì)瘢痕厚度顯著降低,與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=6/group,P0.05);出血灶周圍腦白質(zhì)損傷程度顯著減輕,與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=12/group,P0.01)。腦出血后28d,溶劑治療組和黃體酮治療組均有不同程度的腦萎縮及殘存的腦損傷病灶,與溶劑治療組相比,黃體酮顯著減輕腦萎縮程度(n=12/group,P0.01);此外,黃體酮治療顯著減小殘留病灶的體積,與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=12/group,P0.01)。1.3黃體酮治療對小鼠肛溫、體質(zhì)量的影響。黃體酮治療組小鼠的肛溫與溶劑治療組小鼠的肛溫比較無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。黃體酮治療組1、3、7、14、21d的體質(zhì)量變化率與溶劑治療組的比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=12/group,P0.05),但是腦出血后28d黃體酮治療組小鼠的體質(zhì)量增加顯著高于溶劑治療組小鼠,與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。黃體酮治療組小鼠神經(jīng)功能評分比溶劑治療組顯著降低在觀察時(shí)間點(diǎn)7d至28d,與溶劑治療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=12/group,P0.05)。2.黃體酮對腦出血小鼠神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。2.1黃體酮治療顯著下調(diào)血腫周圍細(xì)胞炎癥反應(yīng)及變性神經(jīng)元的數(shù)量。黃體酮顯著下調(diào)腦出血3d病灶周圍腦組織活化的小膠質(zhì)細(xì)胞,變性神經(jīng)元及單核細(xì)胞的數(shù)量,顯著減少活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度,與溶劑治療組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(n=6/group,P0.05)。黃體酮治療對腦出血術(shù)后1d腦組織COX-1、COX-2的表達(dá)無影響,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.05)。但黃體酮治療顯著下調(diào)了腦出血后1d血腫周圍HMGB1、IL-1β、VEGF的表達(dá),與溶劑治療組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.05)。2.2黃體酮治療顯著減輕出血側(cè)大腦半球蛋白氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度。溶劑治療組和黃體酮治療組小鼠腦出血后12h出血側(cè)大腦半球蛋白羥基化和蛋白硝基化均有不同程度的升高。與溶劑治療組相比,黃體酮治療顯著減少了急性期蛋白羥基化產(chǎn)物及蛋白硝基化產(chǎn)物(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.05)。2.3黃體酮治療對基質(zhì)金屬蛋白酶活性的影響。黃體酮顯著下調(diào)腦出血后1d血腫側(cè)大腦半球腦皮質(zhì)MMP-9的活性,與溶劑治療組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.05);但是并不影響MMP-2的活性(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.05)。2.4黃體酮治療對出血急性期腦部Na+,K+-ATP酶水平的影響。黃體酮顯著下調(diào)腦出血后1d出血側(cè)大腦半球Na-KATPase Ser23的表達(dá),與溶劑治療組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.01)。黃體酮顯著上調(diào)腦出血后NKA-α3的表達(dá),與溶劑治療組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.01)。黃體酮治療對腦出血后12h出血側(cè)大腦半球腦組織NKA-α1、Na-K-ATPase Ser943的表達(dá)水平無影響(n=3 mice for sham group,n=5 mice for each treatment group,P0.01)。結(jié)論1.黃體酮治療能夠顯著減輕腦出血急性期血腫體積大小、腦腫脹程度及腦組織含水量。2.黃體酮治療能夠顯著減輕腦出血后急性期炎性細(xì)胞活化程度、降低炎癥因子表達(dá)水平,減少神經(jīng)元的變性程度、降低腦組織氧化應(yīng)激反應(yīng),具有腦保護(hù)作用。3.黃體酮治療通過顯著下調(diào)腦出血急性期腦部MMP-9的活性、降低VEGF的表達(dá)、改變NKA的活性,該作用可能與黃體酮減輕腦組織含水量有關(guān)。4.黃體酮治療可以顯著下調(diào)出血28d后病灶周圍膠質(zhì)瘢痕厚度及腦白質(zhì)損傷程度,并減輕腦萎縮程度及殘存腦損傷體積、促進(jìn)遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：黃體酮 腦出血 腦水腫 炎癥反應(yīng) 氧化應(yīng)激 神經(jīng)保護(hù) 神經(jīng)功能 小鼠
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R743.34
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-15
• 縮略詞15-16
• 緒論16-18
• 前言18-21
• 第一部分 黃體酮減輕腦出血小鼠腦水腫程度及促進(jìn)遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)21-40
• 1 材料和方法21-29
• 2 統(tǒng)計(jì)分析29-30
• 3 結(jié)果30-35
• 4 討論35-40
• 第二部分 黃體酮對腦出血小鼠神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制40-63
• 1 材料和方法40-51
• 2 統(tǒng)計(jì)分析51-52
• 3 結(jié)果52-57
• 4 討論57-63
• 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-72
• 綜述 腦出血的發(fā)病機(jī)制與治療的研究進(jìn)展72-92
• 參考文獻(xiàn)86-92
• 個(gè)人簡歷92-93
• 致謝93

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 文明,哈森高娃;腦出血急性期癲癇33例臨床分析[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2000年19期

2 王曉平;腦出血急性期的治療和護(hù)理[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2000年21期

3 劉波,曹桂華,牛建平;腎素-血管緊張素系統(tǒng)與腦出血關(guān)系的探討[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2001年05期

4 孫素紅,蒙定水;腦出血急性期的中醫(yī)藥治療近況[J];廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年04期

5 郭建政;;腦出血急性期治療82例探討[J];實(shí)用心腦肺血管病雜志;2006年07期

6 蘇玉花;王祥安;;影響急性腦出血患者預(yù)后的相關(guān)因素[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2006年16期

7 劉艷艷;盧曉蓉;黃瀟湘;王鵬先;彭顯英;劉春蘭;袁云鵬;;腦出血并發(fā)癱側(cè)下肢靜脈血栓形成的原因及對策[J];重慶醫(yī)學(xué);2008年10期

8 邢洪蕓;;基層醫(yī)院治療腦出血的體會(附40例分析)[J];吉林醫(yī)學(xué);2008年15期

9 班文明;倪代梅;劉磊;;中醫(yī)辨證結(jié)合西醫(yī)分期治療急性腦出血研究進(jìn)展[J];中國中醫(yī)急癥;2009年01期

10 ;腦出血護(hù)理點(diǎn)滴體會[J];鐵道醫(yī)學(xué);1978年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高長玉;陳桂英;王志紅;賁瑩;劉桂宇;王彩娟;張?jiān)茣?;腦出血分期分型與中醫(yī)辨證的相關(guān)性分析[A];第五次全國中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

2 趙英霖;;腦出血中醫(yī)治療之思考[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會老年神經(jīng)病專題學(xué)術(shù)研討會論文專輯[C];2006年

3 牟歌童;孫鴻輝;;丹參類制劑治療腦出血急性期療效的系統(tǒng)評價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 吳渝憲;;腦出血急性期的活血化瘀治療探討[A];第五次全國中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

5 張?zhí)K明;;腦出血研究的新進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

6 王麗娟;馮加純;;腦出血急性期血壓變化與預(yù)后的關(guān)系[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

7 田野;馮加純;;腦出血患者急性期若干生化指標(biāo)水平與死亡率的關(guān)系[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

8 鮑遠(yuǎn)程;;腦出血中西醫(yī)診療指南解讀[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會養(yǎng)生學(xué)與康復(fù)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委員會議暨第八次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

9 陳輝庭;;腦出血急性期治療回顧(附71例臨床分析)[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國內(nèi)科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];1995年

10 吳興田;胡秋霞;;腦出血急性期的個(gè)體化治療[A];2001年全國中西醫(yī)結(jié)合急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2001年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 本報(bào)記者 曹玉祥;數(shù)九寒天警惕腦出血[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年

2 ;腦出血臨床治療仍以藥物為主[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

3 孫怡;中西醫(yī)結(jié)合治療腦出血幾個(gè)關(guān)鍵問題[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2007年

4 常怡勇;腦出血為啥還用活血化瘀藥[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

5 執(zhí)業(yè)藥師 常怡勇;腦出血為啥還用活血化瘀藥？[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

6 顧維明;腦出血急性期活血化瘀藥的應(yīng)用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

7 陳維旗邋謝娜;腦出血為啥還用活血化瘀藥？[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2008年

8 衣曉峰;針刺治療急性腦出血機(jī)理探析[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

9 董巧云;安全·科學(xué)·客觀[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

10 何云澤;活血化瘀與出血性中風(fēng)[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫長青;腦出血急性期腦皮層蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

2 楊仲義;熄風(fēng)化痰祛瘀治療腦出血的機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2007年

3 周華軍;凝血酶啟動腦出血后血管新生的作用機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2011年

4 崔元孝;腦出血患者微創(chuàng)穿刺引流術(shù)后血清膠質(zhì)纖維酸性蛋白動態(tài)變化的研究[D];山東大學(xué);2009年

5 趙彥青;腦出血誘發(fā)心肌損傷的機(jī)制研究及扶正護(hù)腦膠囊對其干預(yù)的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

6 梁迪賽;NSE、S100 mRNA和蛋白水平與中醫(yī)藥治療急性腦出血最佳臨界出血量相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2009年

7 常誠;活血通瘀法治療急性腦出血及抗腦水腫的臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2003年

8 楊樹旭;實(shí)驗(yàn)大鼠腦出血后神經(jīng)細(xì)胞再生的研究[D];浙江大學(xué);2009年

9 余震;缺氧誘導(dǎo)因子-1a對腦出血后神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、遷移、分化及血管新生作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

10 王渙群;復(fù)元醒腦與活血通腑治療急性腦出血臨床對照研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 官念;南充地區(qū)腦出血患者病因?qū)W與預(yù)后調(diào)查研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

2 張英菊;當(dāng)歸對腦出血大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

3 丁銳;血紅蛋白誘導(dǎo)一氧化氮合酶過表達(dá)與過氧化亞硝酸鹽產(chǎn)生在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 劉建峰;中風(fēng)顆粒配合治療急性腦出血（瘀水阻竅型）的臨床療效研究[D];山西中醫(yī)學(xué)院;2014年

5 任虹宇;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對腦出血恢復(fù)期大鼠神經(jīng)功能的影響[D];河南大學(xué);2015年

6 王東方;腦出血后外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化與腦出血預(yù)后的相關(guān)性研究[D];河南大學(xué);2015年

7 袁浩森;補(bǔ)陽還五湯對腦出血患者術(shù)后的影響[D];山西中醫(yī)學(xué)院;2015年

8 左方芳;黃體酮促進(jìn)腦出血小鼠遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)的機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2016年

9 余尚貞;冰黃五苓液直腸滴注治療急性腦出血的臨床研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2006年

10 張顯彬;大黃治療腦出血急性期的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2005年

  本文關(guān)鍵詞：黃體酮促進(jìn)腦出血小鼠遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)的機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：504326