本文關(guān)鍵詞：HO-1、SOD2和Mfn2在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠中的表達(dá)及丁苯酞保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:多發(fā)性硬化(Multiple Sclerosis,MS)是一種累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的慢性炎性脫髓鞘性疾病,其發(fā)病機(jī)制尚不明確。研究表明,氧化應(yīng)激和線粒體損傷在MS的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究不同劑量丁苯酞對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠脊髓組織中氧化應(yīng)激指標(biāo)HO-1和線粒體損傷標(biāo)志物SOD2、Mfn2表達(dá)水平的影響。初步探討丁苯酞對EAE小鼠神經(jīng)功能障礙的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法:C57BL/6小鼠使用MOG35-55作為抗原免疫建立EAE模型。以神經(jīng)功能評分2分及以上為模型成功,隨機(jī)分為低劑量NBP組、高劑量NBP組、地塞米松組和EAE組,并設(shè)正常對照組。低劑量NBP組(LDN)、高劑量NBP組(HDN)小鼠分別腹腔注射丁苯酞80mg/kg/d、120mg/kg/d。地塞米松組(DXM)小鼠給予地塞米松磷酸鈉注射液0.07mg/kg/d腹腔注射;正常對照組及EAE組小鼠每日腹腔注射等體積DMSO,共14天。分別于發(fā)病后第0天、第7天及第14天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察C57BL/6小鼠自免疫后的精神狀態(tài)、活動情況、發(fā)病情況及神經(jīng)功能評分。隨后處死小鼠取脊髓組織,以HE染色在光學(xué)顯微鏡下觀察小鼠脊髓炎癥細(xì)胞的浸潤情況;以免疫組化方法觀察小鼠脊髓腰膨大部位HO-1、SOD2及Mfn2的表達(dá)情況;黃嘌呤氧化法測定血清SOD的濃度;使用q RT-PCR方法測定小鼠脊髓腰膨大部位HO-1m RNA、SOD2m RNA以及Mfn2m RNA的表達(dá)水平。結(jié)果:1各組小鼠臨床表現(xiàn)觀察:正常對照組小鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中均正常,且體重逐漸增加。EAE組小鼠抗原免疫后出現(xiàn)精神萎靡、食欲下降、體重下降等表現(xiàn)。EAE組小鼠發(fā)病達(dá)高峰期時(shí)癥狀最嚴(yán)重,小鼠出現(xiàn)背部潰瘍、四肢癱瘓及大小便失禁。低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組小鼠發(fā)病給予藥物治療后,與EAE組小鼠比較,體重下降程度較輕,臨床癥狀表現(xiàn)相對較輕。2神經(jīng)功能評分比較:計(jì)算各組中每只小鼠的最高神經(jīng)功能評分的均數(shù),并進(jìn)行比較。EAE組小鼠神經(jīng)功能評分高于低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組(P0.05)。高劑量NBP組神經(jīng)功能評分明顯低于EAE組、低劑量NBP組及地塞米松組(P0.05);低劑量NBP組與地塞米松組小鼠神經(jīng)功能評分相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3各組小鼠脊髓組織HO-1表達(dá)情況比較:分別于后第0天、第7天及第14天時(shí),EAE組、低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組與對照組相比,小鼠脊髓組織HO-1m RNA表達(dá)水平、HO-1陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。于發(fā)病高峰期及緩解期小鼠脊髓組織中,低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組上述指標(biāo)高于EAE組(P0.05);高劑量NBP組上述指標(biāo)明顯高于EAE組、低劑量NBP組及地塞米松組(P0.05);低劑量NBP組與地塞米松組上述指標(biāo)相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4各組小鼠脊髓組織SOD2表達(dá)情況比較:分別于后第0天、第7天及第14天時(shí),EAE組、低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組與對照組相比,小鼠脊髓組織SOD2m RNA表達(dá)水平、SOD2陽性細(xì)胞數(shù)明顯減少,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。于發(fā)病高峰期及緩解期小鼠脊髓組織中,低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組上述指標(biāo)高于EAE組(P0.05);高劑量NBP組上述指標(biāo)明顯高于EAE組、低劑量NBP組及地塞米松組(P0.05);低劑量NBP組與地塞米松組上述指標(biāo)相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5各組小鼠脊髓組織Mfn2表達(dá)情況比較:分別于后第0天、第7天及第14天時(shí),EAE組、低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組與對照組相比,小鼠脊髓組織Mfn2m RNA表達(dá)水平、Mfn2陽性細(xì)胞數(shù)明顯減少,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。于發(fā)病高峰期及緩解期小鼠脊髓組織中,低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組上述指標(biāo)高于EAE組(P0.05);高劑量NBP組上述指標(biāo)明顯高于EAE組、低劑量NBP組及地塞米松組(P0.05);低劑量NBP組與地塞米松組上述指標(biāo)相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6血清中超氧化物歧化酶(SOD)含量比較:分別于后第0天、第7天及第14天時(shí),EAE組、低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組與對照組相比,小鼠血清SOD濃度明顯增多,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。低劑量NBP組、高劑量NBP組及地塞米松組小鼠血清SOD濃度高于EAE組(P0.05);高劑量NBP組小鼠血清SOD濃度明顯高于EAE組、低劑量NBP組及地塞米松組(P0.05);低劑量NBP組與地塞米松組小鼠血清SOD濃度相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 EAE發(fā)病早期就出現(xiàn)線粒體的損傷,丁苯酞與地塞米松均能降低EAE小鼠的神經(jīng)功能障礙。2丁苯酞對于EAE小鼠神經(jīng)功能缺失的保護(hù)作用存在劑量效應(yīng),大劑量丁苯酞能起到更好的神經(jīng)保護(hù)作用。3丁苯酞對EAE小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用可能是通過增加抗氧化酶HO-1和線粒體中SOD2、Mfn2的水平來阻斷ROS與線粒體損傷之間惡性循環(huán),從減輕氧化應(yīng)激以及保護(hù)線粒體二個(gè)方面對EAE小鼠起到神經(jīng)保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：多發(fā)性硬化 氧化應(yīng)激 線粒體 丁苯酞 血紅素加氧酶-1 線粒體融合蛋白2 超氧化物歧化酶2
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R744.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-23
• 附圖23-33
• 附表33-36
• 討論36-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 綜述47-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 致謝59-60
• 個(gè)人簡歷60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：HO-1、SOD2和Mfn2在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠中的表達(dá)及丁苯酞保護(hù)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：491622