Notch1對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞“干性”及多藥耐藥性的調(diào)節(jié)
發(fā)布時間:2017-06-11 02:10
本文關(guān)鍵詞:Notch1對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞“干性”及多藥耐藥性的調(diào)節(jié),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:1.研究Notch1基因與人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞“干性”的關(guān)系。2.探討人膠質(zhì)瘤中Notch1信號與多藥耐藥之間的關(guān)系。方法:1.通過慢病毒包裝、轉(zhuǎn)染、篩選,分別獲得高表達NICD的U251細胞株和Notch1基因敲低的U251細胞株,并通過Western Blotting及免疫熒光染色進行鑒定。2.流式細胞術(shù)檢測和比較NICD高表達和Notch1基因敲低的U251細胞中CD133+細胞的比例。3.免疫熒光染色檢測NICD高表達和Notch1基因敲低的U251細胞的Nestin、GFAP的表達情況。4.腫瘤細胞球培養(yǎng),計算和比較NICD高表達和Notch1基因敲低的U251細胞球形成率。5.SCID小鼠致瘤實驗,檢測NICD高表達的U251細胞的成瘤能力。6.MTT法檢測上述各組細胞經(jīng)化療藥物BCNU、VM-26處理后細胞生存率的變化。7.Rhodamine123檢測各組細胞藥物外排功能。結(jié)果:1.成功建立了高表達NICD和Notch1基因敲低的U251細胞株。2.流式細胞術(shù)結(jié)果顯示NICD高表達的U251細胞中CD133+細胞率與對照組相比明顯增高,Notch1基因敲低的U251細胞中CD133+細胞率與對照組相比降低。3.免疫熒光染色結(jié)果顯示,NICD高表達組細胞的Nestin熒光強度明顯強于其對照組,GFAP熒光強度明顯低于其對照組;而Notch1基因敲低組細胞的Nestin熒光強度明顯弱于其對照組,GFAP則明顯強于其對照組。4.腫瘤干細胞培養(yǎng)結(jié)果顯示NICD高表達組細胞球形成率高于對照組,Notch1基因敲低組細胞球形成率低于其對照組。5.SCID小鼠致瘤實驗結(jié)果顯示,NICD高表達組細胞的致瘤能力明顯強于對照組細胞。6.MTT實驗結(jié)果顯示,在化療藥物VM-26(1.5μM)或BCNU(150μM)作用下,NICD高表達組細胞生存率明顯高于對照組細胞;Notch1基因敲低組細胞生存率則明顯低于對照組細胞。7.藥物外排實驗結(jié)果顯示,NICD高表達組細胞的藥物外排功能強于其對照組,Notch1基因敲低組細胞的藥物外排功能弱于其對照組。結(jié)論:Notch1基因表達水平的改變可以影響人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U251的干細胞特性及多藥耐藥性,Notch1可望作為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥性的潛在靶點。
【關(guān)鍵詞】:神經(jīng)膠質(zhì)瘤 干性 多藥耐藥 Notch1 CD133 Rhodamine123
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R739.41
【目錄】:
- 英文縮略詞表4-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 前言11-13
- 材料與方法13-30
- 1 材料13-19
- 2 方法19-30
- 結(jié)果30-45
- 討論45-50
- 結(jié)論50
- 參考文獻50-55
- 綜述55-66
- 參考文獻61-66
- 致謝66
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 畢長龍;方加勝;陳風華;王延金;伍軍;;CD133~+膠質(zhì)瘤干細胞化療耐受機制分析[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年04期
本文關(guān)鍵詞:Notch1對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞“干性”及多藥耐藥性的調(diào)節(jié),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:440546
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