發(fā)布時(shí)間：2017-06-04 06:17

  本文關(guān)鍵詞：腦膠質(zhì)瘤新生血管變化特征與動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)磁共振成像實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的:膠質(zhì)瘤是威脅人類健康的惡性程度較高的顱內(nèi)腫瘤,高級(jí)別膠質(zhì)瘤是新生血管最為豐富的惡性腫瘤之一。新生血管是腫瘤組織內(nèi)新生毛細(xì)血管產(chǎn)生、重塑,并形成相對(duì)成熟血管的過(guò)程,包括血管共生(Vascular co-option)、血管生成(Angiogenesis)、血管發(fā)生(Vasculogenesis)、馬賽克樣新生血管形成(Mosaic vessel formation)、血管擬態(tài)(Vascular mimicry)和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤內(nèi)皮轉(zhuǎn)分化(Glioblastoma-endothelial cell transdifferentiation)等類型。膠質(zhì)瘤新生血管的類型和數(shù)量在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中存在顯著的差異,不同類型的膠質(zhì)瘤新生血管對(duì)抗腫瘤藥物以及抗血管生成治療的敏感性不同,研究新生血管在膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化特征對(duì)制定更加有效的抗腫瘤治療方案有積極的促進(jìn)作用。磁共振成像(Magnetic resonance imaging)技術(shù)可以無(wú)創(chuàng)的對(duì)活體組織進(jìn)行重復(fù)監(jiān)測(cè),在腫瘤診斷、療效監(jiān)測(cè)等方面發(fā)揮重大作用。動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)磁共振成像(Dynamic contrast-enhanced MRI,DCE-MRI)可以描述血管通透性、有效灌注面積等生理狀態(tài)。目前已應(yīng)用于惡性程度的分級(jí)、療效監(jiān)測(cè)等方面,用于新生血管的評(píng)價(jià)尚無(wú)詳細(xì)的病理學(xué)及影像學(xué)的對(duì)照研究報(bào)道,其多參數(shù)的特點(diǎn)尚未得到完全有效的開(kāi)發(fā)利用。膠質(zhì)瘤新生血管在組織學(xué)上無(wú)論是數(shù)量還是類型都具有較大的異質(zhì)性,新生血管對(duì)膠質(zhì)瘤的惡性程度、患者的預(yù)后都有重要的影響,DCE-MRI可較好的評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤新生血管的功能狀態(tài)。血管出芽、血管共生、血管套疊以及血管擬態(tài)等新生血管方式隨膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。MRI可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)新生血管及腫瘤細(xì)胞的生理、代謝等狀態(tài),前期工作已經(jīng)證實(shí)Ktrans等參數(shù)與膠質(zhì)瘤微血管密度(Microvessel density,MVD)及腫瘤分級(jí)有較好的相關(guān)性,其與新生血管類型定量參數(shù)的相關(guān)性有待進(jìn)一步的證實(shí)。在本實(shí)驗(yàn)中,我們利用膠質(zhì)瘤原位模型研究膠質(zhì)瘤新生血管類型的存在形式及其動(dòng)態(tài)變化過(guò)程,同時(shí)探討DCE-MRI與新生血管組織學(xué)定量參數(shù)的相關(guān)性,為DCE-MRI顯示新生血管特征和動(dòng)態(tài)變化過(guò)程提供影像學(xué)與病理組織學(xué)相對(duì)應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料和方法:研究由膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型新生血管特征的組織學(xué)分析以及膠質(zhì)瘤新生血管特征與磁共振成像相關(guān)性研究?jī)刹糠纸M成。動(dòng)物模型采用三種常用的不同來(lái)源的膠質(zhì)瘤模型,分別為大鼠源性的c6膠質(zhì)瘤模型和人源性的u87、u251膠質(zhì)瘤模型。小動(dòng)物磁共振成像采用t2wi以及dce-mri技術(shù)。1.建立c6、u87、u251膠質(zhì)瘤原位模型:用量程為20μl的微量進(jìn)樣器吸取10μl膠質(zhì)瘤細(xì)胞懸液,將注射器固定于腦立體定位儀上,垂直進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)中,控制進(jìn)針深度為5mm,再回退1mm,手動(dòng)將膠質(zhì)瘤細(xì)胞懸液緩慢注入腦實(shí)質(zhì)內(nèi),控制注射時(shí)間為10min左右。注射細(xì)胞懸液完畢后留針5min,骨蠟封口。2.動(dòng)物生存狀態(tài)觀察:記錄每組荷瘤鼠的建模時(shí)間與死亡日期,分析、比較荷瘤鼠生存率及半數(shù)生存期。3.病理組織學(xué)觀察:1)he染色對(duì)腫瘤組織學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行觀察;2)cd34、tnc、pas-cd34免疫組織化學(xué)染色判斷并定量分析膠質(zhì)瘤模型新生血管的類型;3)α-sma、desmin免疫組織化學(xué)染色研究膠質(zhì)瘤新生血管的成熟方式;4)pcna、mmp-2免疫組織化學(xué)染色比較不同類型新生血管對(duì)腫瘤增殖、侵襲能力的影響;4.膠質(zhì)瘤mri動(dòng)態(tài)觀察1)觀察6個(gè)時(shí)相點(diǎn)模型膠質(zhì)瘤的常規(guī)mri表現(xiàn)及dce-mri特征;2)測(cè)量6個(gè)時(shí)相點(diǎn)模型膠質(zhì)瘤dce-mri相關(guān)參數(shù),包括ktrans、kep、vp;3)分析比較ktrans、kep、vp值與新生血管類型組織學(xué)定量參數(shù)之間的相關(guān)性。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:應(yīng)用spss18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料均采用±s記錄。使用kaplan-meier法計(jì)算并繪制三種膠質(zhì)瘤模型荷瘤鼠的生存曲線,log-rank檢驗(yàn)比較三組膠質(zhì)瘤模型的半數(shù)生存期。采用one-wayanova方差分析比較三種模型之間組織學(xué)定量參數(shù)的差異,ktrans、kep、vp及組織學(xué)定量的組間差異,t-test比較數(shù)據(jù)的組內(nèi)差異。spearman相關(guān)性分析比較mri參數(shù)與新生血管類型定量參數(shù)的相關(guān)性并計(jì)算pearson相關(guān)系數(shù)。規(guī)定p0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:一、腦膠質(zhì)瘤原位模型新生血管組織學(xué)定量研究1.依照單盲實(shí)驗(yàn)的要求,經(jīng)兩位病理科醫(yī)生獨(dú)立診斷,參考who2007年膠質(zhì)瘤分級(jí)的標(biāo)準(zhǔn),明確c6、u87、u251膠質(zhì)瘤模型分別對(duì)應(yīng)的人膠質(zhì)瘤whoⅢ/Ⅳ的分級(jí)x診斷。2.生存分析顯示c6大鼠膠質(zhì)瘤模型半數(shù)生存期為30天,u87、u251人源性膠質(zhì)瘤模型的中位生存時(shí)間分別為50和53天。c6模型與其他兩種膠質(zhì)瘤模型的半數(shù)生存期存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,u87、u251半數(shù)生存期不存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.三種膠質(zhì)瘤均具有較強(qiáng)的增殖能力,pcna指數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4.三種模型新生血管均異常豐富,mvd計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三種膠質(zhì)瘤模型新生血管的成熟存在兩種方式:一是α-sma陽(yáng)性表達(dá)的血管周細(xì)胞的募集,二是desmin陽(yáng)性的血管壁細(xì)胞的募集。u87、u251模型高表達(dá)α-sma陽(yáng)性的血管周細(xì)胞,而c6模型則更多的募集desmin陽(yáng)性的血管周細(xì)胞。5.tnc染色觀察到三種模型中大部分腫瘤微血管通過(guò)血管出芽的方式新生。在模型生存終末期可以觀察到部分腫瘤微血管存在血管套疊生成。he染色配合cd34、gfap免疫組織化學(xué)染色在膠質(zhì)瘤瘤旁組織鑒定出血管共生現(xiàn)象。cd34-pas復(fù)染鑒定出膠質(zhì)瘤壞死周圍存在血管擬態(tài)這種特殊的新生血管類型。除血管擬態(tài)數(shù)量無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異外,三種模型之間血管出芽、血管套疊和血管共生均存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。二、腦膠質(zhì)瘤新生血管動(dòng)態(tài)變化特征與mri相關(guān)性研究1.c6膠質(zhì)瘤病理表現(xiàn):大體標(biāo)本觀察到荷瘤鼠右側(cè)基底節(jié)區(qū)出現(xiàn)“魚(yú)肉樣”新生腫塊組織,he染色見(jiàn)腫塊組織異常豐富的新生血管以及特征性“柵欄樣壞死”,c6膠質(zhì)瘤組織侵潤(rùn)性生長(zhǎng)的區(qū)域?yàn)榫嗄[瘤邊緣約437.8±153.6μm的范圍。2.膠質(zhì)瘤新生血管存在形式和動(dòng)態(tài)變化:移植細(xì)胞后第12和第16天血管共生現(xiàn)象最少,與其他四個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。6個(gè)時(shí)相點(diǎn)均顯示血管出芽生長(zhǎng)是c6膠質(zhì)瘤最重要的新生血管方式,不同時(shí)相點(diǎn)血管出芽定量有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。血管套疊為在血管腔內(nèi)見(jiàn)到柱狀分隔,高倍鏡下觀察到血管套疊生長(zhǎng)的三個(gè)典型階段,即套疊式血管生成、套疊式血管擴(kuò)張和套疊式血管重塑。血管套疊僅在移植細(xì)胞第8天才出現(xiàn),且隨腫瘤的增大而增多,不同時(shí)相點(diǎn)血管套疊數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。6個(gè)時(shí)相點(diǎn),血管擬態(tài)數(shù)量較少,均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.膠質(zhì)瘤mri動(dòng)態(tài)特點(diǎn):腫瘤體積隨移植推移而逐漸增大(p0.05)。腫瘤組織dce-mri灌注參數(shù)均隨著腫瘤生長(zhǎng)不斷升高(p0.05)。瘤旁組織ktrans、kep隨腫瘤生長(zhǎng)出現(xiàn)“先升高后下降”的變化規(guī)律(p0.05),vp值的變化則無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。4.mri參數(shù)與組織學(xué)參數(shù)的相關(guān)性:瘤旁組織dce-mri灌注參數(shù)ktrans和kep與c6膠質(zhì)瘤血管共生指數(shù)有較強(qiáng)負(fù)相關(guān),kep、vp與套疊血管、血管出芽呈正相關(guān)(p0.05)。結(jié)論:1.三種膠質(zhì)瘤原位模型中均存在四種新生血管類型,即血管出芽,血管共生,血管套疊以及血管擬態(tài)等,不同的膠質(zhì)瘤模型中新生血管類型的數(shù)量不同。2.大鼠C6膠質(zhì)瘤原位模型生長(zhǎng)過(guò)程中,四種新生血管方式的表達(dá)數(shù)量不同,呈明顯的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。3.大鼠C6新生血管組織的定量參數(shù)與DCE-MRI參數(shù)有較好的相關(guān)性,MRI有望成為無(wú)創(chuàng)的監(jiān)測(cè)膠質(zhì)瘤新生血管動(dòng)態(tài)變化特征的影像學(xué)標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：磁共振成像 動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)磁共振成像 膠質(zhì)瘤 新生血管
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R445.2;R739.41
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-13
• 第一章 前言13-16
• 第二章 腦膠質(zhì)瘤原位模型新生血管組織學(xué)定量研究16-37
• 2.1 材料與方法16-21
• 2.2 結(jié)果21-34
• 2.3 討論34-37
• 第三章 腦膠質(zhì)瘤新生血管動(dòng)態(tài)變化特征與DCE-MRI相關(guān)性研究37-62
• 3.1 材料與方法37-40
• 3.2 結(jié)果40-59
• 3.3 討論59-62
• 全文結(jié)論62-63
• 參考文獻(xiàn)63-69
• 文獻(xiàn)綜述 膠質(zhì)瘤新生血管類型及機(jī)制69-78
• 參考文獻(xiàn)74-78
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果78-79
• 致謝79

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7 姬云翔;磷酸化Cx43蛋白在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)及其與腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

8 朱峰;OPN的異常表達(dá)與膠質(zhì)瘤的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 劉兵;SENP1表達(dá)水平對(duì)人腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制及其相關(guān)性[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李文華;Slit2/Robo1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：腦膠質(zhì)瘤新生血管變化特征與動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)磁共振成像實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：420206