目的:觀察實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠腸道菌群變化,探討益生菌對EAE小鼠腸道菌群及TLR4/NF-κB信號通路的影響。方法:選擇30只SPF級雌性C57BL/6小鼠隨機分為正常對照組、EAE模型組和益生菌組,每組10只。正常對照組不做任何處理,EAE模型組、益生菌組采用MOG35-55多肽制備EAE模型,益生菌組從造模次日起以0.4 ml/d的益生菌溶液灌胃,正常對照組、EAE模型組每日灌胃等量生理鹽水,觀察小鼠發(fā)病情況。取腦組織行LFB染色;取小鼠糞便定量檢測腸道菌群數(shù)量,計算雙歧桿菌與腸桿菌細(xì)菌數(shù)量的比值(B/E值);ELISA檢測腦組織IL-1β、IL-6、TNF-α表達(dá);免疫組織化學(xué)法檢測NF-κBp65核表達(dá);分別采用RT-PCR和Western blot法檢測腦組織中TLR4和NF-κBp65 mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果:正常對照組小鼠均未發(fā)病,EAE模型組、益生菌組發(fā)病小鼠出現(xiàn)不同程度的尾部下垂、行走不穩(wěn)、后肢無力等。益生菌組與EAE模型組相比潛伏期、高峰期延遲,神經(jīng)功能評分降低(P<0.05)。正常對照組腦組織髓鞘結(jié)構(gòu)清晰,EAE模型組髓鞘纖維結(jié)構(gòu)紊亂,...

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圖1 神經(jīng)功能缺損評分變化示意圖

表1兩組發(fā)病潛伏期、高峰期、高峰期神經(jīng)功能障礙評分比較(xˉ±s,n=10)Tab.1Comparisonoflatentperiod,peakperiodandneuro-functionaldeficiencyscoresintwogrou....

圖2 各組小鼠腦組織LFB染色情況(×200)

圖1神經(jīng)功能缺損評分變化示意圖2.7各組小鼠TLR4、NF-κBp65蛋白表達(dá)情況

圖4 Western blot檢測各組小鼠腦組織蛋白表達(dá)

表5各組小鼠TLR4和NF-κBp65蛋白表達(dá)(xˉ±s,n=10)Tab.5ExpressionsofTLR4andNF-κBp65proteinsineachgroupofmice(xˉ±s,n=10)GroupsTLR4NF-....

圖3 各組小鼠腦組織NF-κBp65細(xì)胞核表達(dá)的IHC檢測結(jié)果(×200)

表3各組小鼠腦組織IL-1β、IL-6、TNF-α含量比較(xˉ±s,n=10,ng/L)Tab.3ComparisonofIL-1β,IL-6,TNF-αcontentsinbraintissueofeachgroupofmice(x....

本文編號：4042196