目的:探討氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖(Oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。方法:將小膠質(zhì)細(xì)胞隨機(jī)分為空白對(duì)照組、氧糖剝奪(OGD)2h、OGD4h、OGD6h。從普通培養(yǎng)箱中取出小膠質(zhì)細(xì)胞,將原培養(yǎng)基更換為無(wú)糖Earles平衡鹽溶液(Earles Balanced Salt Solution,EBSS)培養(yǎng),并置于缺氧培養(yǎng)箱內(nèi),建立小膠質(zhì)細(xì)胞OGD模型。OGD后換回原培養(yǎng)基,重新置于普通培養(yǎng)箱,復(fù)糖、復(fù)氧24h后觀察及收集培養(yǎng)上清。ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量。結(jié)果:隨著OGD時(shí)間的延長(zhǎng),小膠質(zhì)細(xì)胞損傷逐漸加重,以O(shè)GD6小時(shí)為甚。與對(duì)照組相比較,OGD各組IL-1β、IL-6的分泌明顯增加(P<0.05),其中IL-1β表達(dá)在OGD 2h組達(dá)到高峰,IL-6表達(dá)在OGD 4h組達(dá)到高峰,OGD6h組炎癥因子的表達(dá)出現(xiàn)回落。結(jié)論:氧糖剝奪2-4小時(shí)后再?gòu)?fù)糖復(fù)氧能較好地在體外誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng),且細(xì)胞損傷較...

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圖1 倒置熒光顯微鏡觀察小膠質(zhì)細(xì)胞不同時(shí)長(zhǎng)OGD后形態(tài)學(xué)改變。對(duì)照組（A）小膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)良好，細(xì)胞呈細(xì)長(zhǎng)或橢圓，從胞體發(fā)出細(xì)長(zhǎng)而有分枝的突起，細(xì)胞形態(tài)正常。OGD 2h組（B）部分細(xì)胞分枝剝離消失，細(xì)胞固縮。OGD 4h組（C）細(xì)胞突觸剝離消失較OGD2h明顯且固縮更為嚴(yán)重，受損細(xì)胞數(shù)目也更多。OGD 6h組（D）出現(xiàn)更為明顯且范圍更廣的突觸剝離及細(xì)胞固縮等結(jié)構(gòu)破壞，出現(xiàn)較多細(xì)胞死亡。

倒置熒光顯微鏡下觀察未進(jìn)行OGD/R處理的小膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)良好，細(xì)胞呈細(xì)長(zhǎng)或橢圓，從胞體發(fā)出細(xì)長(zhǎng)而有分枝的突起，細(xì)胞形態(tài)正常。OGD/R后小膠質(zhì)細(xì)胞損傷明顯，OGD2h后復(fù)糖復(fù)氧主要表現(xiàn)為部分細(xì)胞分枝剝離消失，細(xì)胞固縮，OGD4h后復(fù)糖復(fù)氧細(xì)胞突觸剝離消失較OGD2h明顯且固....

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