人膠質母細胞瘤干細胞向血管內皮細胞轉化的體外實驗研究
發(fā)布時間:2025-03-29 23:06
[目的] 體外分離并富集人膠質母細胞瘤干細胞(Glioblastoma stem cells, GSCs),觀察其生物學特征,包括形態(tài)學、自我更新能力、多向分化潛能以及在NOD-SCID小鼠腦內形成具有原發(fā)腫瘤相似表型的異種移植腫瘤的能力。 比較不同基因分型GSCs向血管內皮細胞轉分化的潛能。觀察并描述體外人基質細胞型GSCs轉分化為血管內皮細胞,包括在內皮細胞轉分化培養(yǎng)基中誘導培養(yǎng)后,形成管樣結構并表達多個血管內皮細胞標記物。 初步探討人基質細胞型GSCs轉分化為血管內皮細胞的相關機制。分析HIF2α和Twsit1在人基質細胞型GSCs向血管內皮細胞轉分化過程中的作用。 [方法] 人膠質母細胞瘤(Glioblastoma multiforme, GBM)手術標本的獲取均經過患者書面知情同意,并得到復旦大學附屬華山醫(yī)院倫理委員會批準。在無血清培養(yǎng)基(含EGF、bFGF、N2添加劑)中培養(yǎng)人GBM來源細胞。采用神經球克隆形成實驗、免疫熒光技術及Western-blot等方法分別評估腫瘤干細胞的增殖、多向分化分化潛能及其干細胞標記物的表達。采用流式細胞技術從人GBM來源的...
【文章頁數(shù)】:118 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
本文編號:4037793
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圖2.5.CD133+基質細胞型GSCs能夠向內皮細胞轉分化
復旦大學博士學位論文 2.3CD133+基質細胞型GSCs向內皮細胞轉分化,而CD133-細胞無法向血管內皮細胞轉分化為了驗證在基質細胞型GBM中哪種細胞能夠向內皮細胞轉分化,我們采用流式細胞技術將腫瘤細胞分為CD133+和CD133-細胞。隨后將兩種細胞在內皮細胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)....
圖2.6GSCs轉分化后形態(tài)學改變:A.CD133+膠質瘤干細胞來源的GFP+/CD144+細胞能在Matrigel培養(yǎng)體系中發(fā)生一系列形態(tài)變化并最終形成微血管網,而CD144-細胞則無法形成管樣結構(X200);B.在Matrigel培養(yǎng)上24小時后
圖2.6GSCs轉分化后形態(tài)學改變:A.CD133+膠質瘤干細胞來源的GFP+/CD144+細胞能在Matrigel培養(yǎng)體系中發(fā)生一系列形態(tài)變化并最終形成微血管網,而CD144-細胞則無法形成管樣結構(X200);B.在Matrigel培養(yǎng)上24小時后可見繩索樣結構,說明由....
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