本文關(guān)鍵詞：高原環(huán)境下鈣結(jié)合蛋白S100B及S100A4對(duì)成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察高原低壓缺氧環(huán)境對(duì)大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生的影響,探索低氧腦損傷后神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)功能修復(fù)的機(jī)制,為臨床治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷類疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:120只健康成年雄性SD大鼠,隨機(jī)分為兩組:模擬海拔5000米組、氣壓52.9千帕(實(shí)驗(yàn)組)和海拔2200米組、氣壓77.406千帕(對(duì)照組)。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)模擬海拔5000米低壓氧艙處理3天,低壓缺氧3天后進(jìn)入修復(fù)期,轉(zhuǎn)移至海拔2200米環(huán)境下飼養(yǎng),對(duì)照組不經(jīng)模擬海拔5000米低壓氧艙預(yù)處理,直接在海拔2200米環(huán)境飼養(yǎng)。兩組又分為缺氧損傷后低海拔環(huán)境修復(fù)1、3、7、14、28天五個(gè)亞組,每組12只。在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)行腦組織取材。分別采用H-E染色、Nissl染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)的變化;采用Brd U標(biāo)記,免疫組化染色檢測(cè)Brd U陽性細(xì)胞表達(dá),觀察神經(jīng)干細(xì)胞增殖能力變化;免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè)Brd U和DCX、GFAP的共表達(dá),觀察神經(jīng)干細(xì)胞的分化能力;采用免疫組化染色檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白家族S100B(S100蛋白家族B)、S100A4(S100蛋白家族A4)陽性表達(dá)細(xì)胞的分布和數(shù)量變化;并采用q RT-PCR檢測(cè)S100B、S100A4基因表達(dá)情況。結(jié)果:(1)H-E染色結(jié)果顯示,對(duì)照組相比較,實(shí)驗(yàn)組在缺氧損傷后1天至3天,海馬顆粒細(xì)胞損傷明顯,出現(xiàn)形態(tài)不規(guī)則的異性細(xì)胞或呈空泡狀的細(xì)胞,并出現(xiàn)核濃縮的凋亡細(xì)胞。Nissl染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比較,1天、3天及7天實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)變性/壞死細(xì)胞明顯增多(p0.05),神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量減少、細(xì)胞排列較紊亂,可觀察到深染的變性細(xì)胞。(2)Brd U免疫組化染色結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組Brd U陽性細(xì)胞數(shù)在低壓缺氧損傷后第7、14、28天明顯高于對(duì)照組對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(p0.05)。(3)Brd U/DCX和Brd U/GFAP免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果:高海拔環(huán)境中,低氧損傷后海馬齒狀回存在DCX和GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)。(4)S100B免疫組化染色結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組S100B蛋白的表達(dá)在低壓缺氧損傷后第1、3天明顯高于對(duì)照組對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(p0.05),其他時(shí)間點(diǎn)S100B蛋白表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,S100B蛋白的表達(dá)和海馬形態(tài)組織結(jié)構(gòu)損傷的程度基本相一致。(5)S100A4免疫組化染色結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組S100A4蛋白的表達(dá)在低壓缺氧損傷后第3、7、14天明顯高于對(duì)照組對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(p0.05),28天組蛋白表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,和神經(jīng)干細(xì)胞增殖的時(shí)間點(diǎn)基本一致(6)q RT-PCR檢測(cè)S100B、S100A4基因表達(dá),結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組S100A4基因在低氧損傷后3天、7天、14天組表達(dá)明顯高于對(duì)照祖(p0.05);實(shí)驗(yàn)組S100B基因在低氧損傷后1天、3天組表達(dá)明顯高于對(duì)照組(p0.05)。結(jié)論:1、高海拔低壓缺氧刺激,激活大鼠海馬齒狀回顆粒細(xì)胞下層的神經(jīng)干細(xì)胞增殖。2、低壓缺氧腦損傷后大鼠海馬齒狀回增殖的神經(jīng)干細(xì)胞可以分化為神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。3、高海拔低壓缺氧刺激可誘導(dǎo)鈣結(jié)蛋白S100B和S100A4蛋白表達(dá)上調(diào),過度表達(dá)的S100B通過激活一定的信號(hào)途徑,參與誘導(dǎo)海馬細(xì)胞損傷或凋亡;但高表達(dá)的鈣結(jié)合蛋S100A4可能參與海馬神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：低壓缺氧 大鼠 海馬 S100B S100A4 神經(jīng)干細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R741
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮寫一覽表11-12
• 第1章 前言12-15
• 第2章 材料與方法15-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器15-17
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)器材16-17
• 2.2 方法17-21
• 2.2.1 高原缺氧模擬條件17
• 2.2.2 動(dòng)物分組17
• 2.2.3 BrdU標(biāo)記17-18
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑的配置18-20
• 2.2.5 組織取材20
• 2.2.6 腦組織石蠟切片的制備20-21
• 2.3 形態(tài)學(xué)及分子學(xué)水平研究21-29
• 2.3.1 HE染色21-22
• 2.3.2 Nissl染色22
• 2.3.3 免疫組織化學(xué)染色22-25
• 2.3.4 免疫熒光組織化學(xué)染色25-26
• 2.3.5 RT-PCR檢測(cè)S100B、S100A4、HIF-1ɑ 基因表達(dá)水平26-29
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理29-30
• 第3章 結(jié)果30-42
• 3.1 高原缺氧損傷模型的建立30
• 3.2 低壓缺氧環(huán)境下海馬齒狀回形態(tài)學(xué)變化30-32
• 3.2.1 HE染色觀察30-31
• 3.2.2 Nissl染色觀察31-32
• 3.3 低壓缺氧環(huán)境下海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化32-35
• 3.3.1 BrdU免疫組織化學(xué)染色觀察32-33
• 3.3.2 免疫熒光組織化學(xué)染色觀察33-35
• 3.4 低壓缺氧環(huán)境下海馬齒狀回S100A4 和S100B的表達(dá)35-42
• 3.4.1 成年大鼠S100B、S100A4mRNA Real-time PCR結(jié)果35-37
• 3.4.2 不同海拔條件下S100B表達(dá)量比較分析37
• 3.4.3 不同海拔條件下S100A4 表達(dá)量比較分析37-38
• 3.4.4 S100B免疫組織化學(xué)染色觀察38-40
• 3.4.5 S100A4 免疫組織化學(xué)染色觀察40-42
• 第4章 討論42-45
• 第5章 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 致謝49-50
• 綜述50-62
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 作者簡(jiǎn)介62

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡志梅;梁玉;劉皓;陳祖培;;碘過量對(duì)成年大鼠海馬膠質(zhì)原纖維酸性蛋白的影響[J];中國(guó)地方病防治雜志;2007年02期

2 邵建林;梁榮畢;王雁;劉曼;衡新華;羅用宇;;七氟烷保護(hù)腦缺血-再灌注損傷大鼠海馬機(jī)制的研究[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊;2008年09期

3 邵淑紅;李尊嶺;潘芳;;差異性應(yīng)激對(duì)青、老年大鼠海馬HSP70 mRNA表達(dá)的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2010年02期

4 王順旺;徐平;劉海軍;陳群;劉艷芳;張麗;龔其海;李彬;;反式白藜蘆醇對(duì)Aβ_(25-35)致癡大鼠海馬誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2010年18期

5 王國(guó)明;朱建忠;陳俊榮;李積勝;張戟風(fēng);周紅軍;;牛磺酸鋅對(duì)慢性氟接觸大鼠海馬的保護(hù)性研究[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2012年03期

6 秦文熠;羅勇;余超;;電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠海馬內(nèi)白介素-1β及轉(zhuǎn)錄核因子κB抑制蛋白激酶的影響[J];針刺研究;2013年04期

7 朱蕙霞,陳蓉,金國(guó)華,秦建兵,田美玲;非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳在大鼠海馬組織蛋白分離中的應(yīng)用[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年04期

8 譚吉林,李國(guó)輝,陳惠,劉杏琴,孫立,鄭士富;復(fù)聰靈片對(duì)擬血管性癡呆大鼠海馬區(qū)體視學(xué)參數(shù)的影響[J];中藥材;2004年01期

9 怡悅;柴胡加龍骨牡蠣湯對(duì)大鼠海馬過度釋放谷氨酸的抑制作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè));2005年05期

10 胡志梅;梁玉;劉皓;陳祖培;;碘過量對(duì)成年大鼠海馬膠質(zhì)原纖維酸性蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];河北醫(yī)學(xué);2006年12期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 史艷紅;徐平;宋凱英;潘成玉;;阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征大鼠海馬損害及其機(jī)制的研究[A];貴州省第六屆中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

2 雍政;顏玲娣;周培嵐;高翔;宮澤輝;;噻吩諾啡對(duì)大鼠海馬區(qū)突觸可塑性的影響[A];第十五屆中國(guó)神經(jīng)精神藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2012年

3 常曉慧;戰(zhàn)麗彬;白長(zhǎng)川;吳美娟;馮召嵐;;組分中藥金智達(dá)膠囊對(duì)2型糖尿病大鼠海馬認(rèn)知功能的改善作用及相關(guān)機(jī)制的研究[A];2011全國(guó)老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

4 王良;董大翠;蔡秋云;朱長(zhǎng)庚;;谷氨酸鈉致癇大鼠海馬mGluR5的表達(dá)變化[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 戴薇薇;金國(guó)琴;張學(xué)禮;趙偉康;;左舊丸、右舊丸對(duì)老年大鼠海馬、杏仁核氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量變化的影響[A];第七次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合虛證與老年病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2003年

6 李茂進(jìn);謝林;胡俊峰;李國(guó)珍;;天麻對(duì)鉛所致大鼠海馬損害的拮抗作用[A];山東預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2003年

7 史艷紅;徐平;宋凱英;潘成玉;;阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征大鼠海馬損害機(jī)制及其與低氧的相關(guān)性[A];貴州省第六屆中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

8 馮榮芳;馮亞青;郭振華;邢邯英;李淑琴;;膠質(zhì)纖維酸性蛋白在老年癡呆大鼠海馬中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 劉瓊;朱海燕;俞瑾;米文麗;毛應(yīng)啟梁;王彥青;吳根誠(chéng);;大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞在抑郁癥及電針抗抑郁模型治療中的作用研究[A];第九屆全國(guó)針刺麻醉針刺鎮(zhèn)痛及針刺調(diào)整效應(yīng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

10 陳琛;朱文榮;耿德勤;;氟西汀+電針治療對(duì)抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)精神醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;電針能激活老年癡呆大鼠海馬蛋白激酶信號(hào)通路[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 段開明;異氟烷對(duì)成齡和老齡大鼠海馬蛋白質(zhì)組影響的差異性研究[D];中南大學(xué);2007年

2 周爽;電針對(duì)高血壓性腦出血大鼠海馬信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2003年

3 杜會(huì)枝;乙酰膽堿酯酶抑制劑和金屬離子對(duì)大鼠海馬細(xì)胞膜離子通道的作用研究[D];山西大學(xué);2006年

4 楊惠云;老年性癡呆大鼠海馬突觸體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

5 羅松;電針對(duì)老年癡呆大鼠海馬神經(jīng)元突觸形態(tài)可塑性的影響機(jī)制[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

6 劉瓊;針刺治療實(shí)驗(yàn)性抑郁癥時(shí)成年大鼠海馬神經(jīng)發(fā)生的變化[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

7 劉雨星;電針對(duì)老年性癡呆大鼠海馬組織信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)介質(zhì)的調(diào)節(jié)作用研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

8 姜碩;電針修復(fù)慢性應(yīng)激致抑郁大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2013年

9 鮑娟;GGA誘導(dǎo)AD大鼠海馬HSP70表達(dá)及其抗細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2008年

10 湯慧芹;甲狀腺激素對(duì)海馬內(nèi)源性生長(zhǎng)激素及其受體的調(diào)節(jié)[D];武漢大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄒艷萍;歸脾湯對(duì)抑郁模型大鼠海馬形態(tài)學(xué)及皮質(zhì)醇水平的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2006年

2 董海影;柴胡疏肝散對(duì)抑郁模型大鼠海馬乙酰膽堿代謝的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2009年

3 賈慧娟;不同游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠海馬cAMP影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西大學(xué);2010年

4 金鎮(zhèn)國(guó);電針對(duì)腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū)胰島素樣生長(zhǎng)因子-1表達(dá)的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2005年

5 韓玉霞;絞股藍(lán)皂苷對(duì)谷氨酸所致大鼠海馬組織損傷的保護(hù)作用[D];山東大學(xué);2008年

6 趙衍;氧化苦參堿對(duì)青霉素致癇大鼠海馬組織ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2010年

7 蒯建科;麻醉藥對(duì)新生大鼠海馬谷氨酸受體及轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)和認(rèn)知功能的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

8 敬開權(quán);慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激對(duì)大鼠海馬自噬作用和HMGB1/TLR4通路的影響[D];南華大學(xué);2013年

9 劉國(guó)軍;NF-κB信號(hào)通路中炎癥因子在慢性致癇大鼠海馬的表達(dá)及PDTC干預(yù)的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

10 謝鑫;慢性鋁暴露對(duì)大鼠海馬LTP的影響及其機(jī)制研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：高原環(huán)境下鈣結(jié)合蛋白S100B及S100A4對(duì)成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：397604