樹突狀細胞在實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠中的作用研究
發(fā)布時間:2024-04-22 05:09
目的:建立慢性-非緩解型EAE模型,運用流式、RT-PCR、ELISA等方法從細胞膜表面分子和基因水平檢測樹突狀細胞(DC)成熟度,CD4+CD25+Treg數(shù)量,F(xiàn)oxP3mRNA及Ror-γt mRNA表達水平、小鼠外周血IL-6及TGF-β分泌水平,以探討樹突狀細胞(DC)在慢性EAE小鼠模型中誘導(dǎo)免疫學(xué)相關(guān)機制。 方法:54只10-12周近交系健康清潔級雌性C57BL/6小鼠,隨機分為兩組:EAE組(n=30只)和佐劑對照組(n=24只)。各組按病程又分為:發(fā)病初期、高峰期及慢性期。EAE組用乳化好MOG35-55多肽和完全弗氏佐劑(CFA)免疫C57BL/6小鼠,佐劑對照組則用等量的PBS代替MOG35-55,按Ingunn[1]評分標(biāo)準(zhǔn)進行臨床癥狀評分,運用流式細胞術(shù)檢測DC表面CD11c、CD83以及CD4+CD25+Treg數(shù)量;應(yīng)用RT-PCR方法檢測小鼠淋巴細胞FoxP3mRNA及Ror-γtmRNA表達水平;應(yīng)用ELISA方法檢測小鼠外周血中IL-6及TGF-β的分泌水平。 結(jié)...
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞簡表
第一章 前言
第二章 材料和方法
2.1 主要試劑和藥品
2.2 主要儀器及耗材
2.3 主要試劑及動物的準(zhǔn)備
2.4 動物分組
2.5 模型制作過程
2.6 模型評價
2.7 流式細胞學(xué)檢測
2.8 實時熒光定量 RT-PCR
2.9 ELISA
2.10 分析及統(tǒng)計方法
第三章 結(jié)果
3.1 實驗小鼠發(fā)病情況
3.2 流式細胞術(shù)檢測結(jié)果
3.3 RT-PCR 結(jié)果
3.4 ELISA 結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述
參考文獻
本文編號:3961974
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
Abstract
縮略詞簡表
第一章 前言
第二章 材料和方法
2.1 主要試劑和藥品
2.2 主要儀器及耗材
2.3 主要試劑及動物的準(zhǔn)備
2.4 動物分組
2.5 模型制作過程
2.6 模型評價
2.7 流式細胞學(xué)檢測
2.8 實時熒光定量 RT-PCR
2.9 ELISA
2.10 分析及統(tǒng)計方法
第三章 結(jié)果
3.1 實驗小鼠發(fā)病情況
3.2 流式細胞術(shù)檢測結(jié)果
3.3 RT-PCR 結(jié)果
3.4 ELISA 結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
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本文編號:3961974
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