本研究利用實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型，觀察不同神經(jīng)功能評(píng)分EAE的病理學(xué)變化，并檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及CD4+T細(xì)胞的變化，觀察二者的相互作用，試圖探討小膠質(zhì)細(xì)胞在MS/EAE發(fā)病和緩解中的作用。應(yīng)用熒光定量PCR觀察CD4+T細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞在mRNA水平上的變化，同時(shí)觀察腦組織內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ、IL-17、IL-10的變化，探討這些細(xì)胞因子在EAE發(fā)病過(guò)程中的作用。為此，我們用MOG35-55抗原輔以完全弗氏佐劑免疫C57BL/6小鼠，通過(guò)對(duì)小鼠體重、癥狀及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理改變的觀察，評(píng)估EAE模型的建立情況，采用國(guó)際公認(rèn)的神經(jīng)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)發(fā)病小鼠的臨床癥狀進(jìn)行評(píng)分。同時(shí)利用病理學(xué)染色觀察EAE小鼠不同時(shí)期的病理學(xué)改變，用HE染色、LuxolFast Blue髓鞘染色和Bielschowsky銀染分別評(píng)估炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、髓鞘脫失和軸索損傷情況。利用免疫組織化學(xué)染色法對(duì)CD4+T細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，觀察兩種細(xì)胞的變化及二者之間是否存在相互作用。應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)驗(yàn)證二者在mRNA水平上的變化。用半定量PCR和熒光定量PCR檢測(cè)不同病程分期EAE小鼠腦組織...

【文章頁(yè)數(shù)】：36 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
一、前言
二、材料和方法
    1 試劑和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 EAE 模型的建立和病理學(xué)觀察
        2.2 CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及形態(tài)變化
        2.3 半定量和定量 PCR 檢測(cè)細(xì)胞因子的變化
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
三、結(jié)果
    1 EAE 模型的建立和病理學(xué)觀察
        1.1 小鼠行為學(xué)變化
        1.2 小鼠脊髓病理學(xué)染色結(jié)果
    2 CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量及形態(tài)變化
        2.1 CD4+T 細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果
        2.2 小膠質(zhì)細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果
        2.3 小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化結(jié)果
        2.4 熒光定量 PCR 檢測(cè) CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞 mRNA 的表達(dá)
    3 半定量和定量 PCR 檢測(cè)細(xì)胞因子的變化
        3.1 半定量 PCR 檢測(cè)小鼠腦組織內(nèi)細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá)
        3.2 熒光定量 PCR 檢測(cè)小鼠腦組織內(nèi)細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá)
四、討論
    1. EAE 模型建立
    2. CD4+T 細(xì)胞在 EAE 中的作用
    3. 小膠質(zhì)細(xì)胞在 EAE 中的作用
    4. CD4+T 細(xì)胞與小膠質(zhì)細(xì)胞的關(guān)系
五、結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3956474