本研究利用實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型，觀察不同神經(jīng)功能評分EAE的病理學(xué)變化，并檢測中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及CD4+T細(xì)胞的變化，觀察二者的相互作用，試圖探討小膠質(zhì)細(xì)胞在MS/EAE發(fā)病和緩解中的作用。應(yīng)用熒光定量PCR觀察CD4+T細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞在mRNA水平上的變化，同時觀察腦組織內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ、IL-17、IL-10的變化，探討這些細(xì)胞因子在EAE發(fā)病過程中的作用。為此，我們用MOG35-55抗原輔以完全弗氏佐劑免疫C57BL/6小鼠，通過對小鼠體重、癥狀及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理改變的觀察，評估EAE模型的建立情況，采用國際公認(rèn)的神經(jīng)功能評分標(biāo)準(zhǔn)對發(fā)病小鼠的臨床癥狀進行評分。同時利用病理學(xué)染色觀察EAE小鼠不同時期的病理學(xué)改變，用HE染色、LuxolFast Blue髓鞘染色和Bielschowsky銀染分別評估炎性細(xì)胞浸潤、髓鞘脫失和軸索損傷情況。利用免疫組織化學(xué)染色法對CD4+T細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞進行標(biāo)記，觀察兩種細(xì)胞的變化及二者之間是否存在相互作用。應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)驗證二者在mRNA水平上的變化。用半定量PCR和熒光定量PCR檢測不同病程分期EAE小鼠腦組織...

【文章頁數(shù)】：36 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
一、前言
二、材料和方法
    1 試劑和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 EAE 模型的建立和病理學(xué)觀察
        2.2 CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及形態(tài)變化
        2.3 半定量和定量 PCR 檢測細(xì)胞因子的變化
        2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
三、結(jié)果
    1 EAE 模型的建立和病理學(xué)觀察
        1.1 小鼠行為學(xué)變化
        1.2 小鼠脊髓病理學(xué)染色結(jié)果
    2 CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量及形態(tài)變化
        2.1 CD4+T 細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果
        2.2 小膠質(zhì)細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果
        2.3 小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化結(jié)果
        2.4 熒光定量 PCR 檢測 CD4+T 細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞 mRNA 的表達
    3 半定量和定量 PCR 檢測細(xì)胞因子的變化
        3.1 半定量 PCR 檢測小鼠腦組織內(nèi)細(xì)胞因子 mRNA 的表達
        3.2 熒光定量 PCR 檢測小鼠腦組織內(nèi)細(xì)胞因子 mRNA 的表達
四、討論
    1. EAE 模型建立
    2. CD4+T 細(xì)胞在 EAE 中的作用
    3. 小膠質(zhì)細(xì)胞在 EAE 中的作用
    4. CD4+T 細(xì)胞與小膠質(zhì)細(xì)胞的關(guān)系
五、結(jié)論
參考文獻
在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3956474