目的采用膜片鉗技術(shù)研究大麻素、食欲素受體通路對海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元放電的影響及可能的作用機制。方法將出生15-20天的Wistar大鼠取腦,急性分離出單個CA1區(qū)錐體神經(jīng)元,用膜片鉗技術(shù)記錄神經(jīng)元電活動,觀察非選擇性大麻素受體激動劑Win55212-2、非選擇性食欲素受體激動劑Orexin A對神經(jīng)元靜息電位、自發(fā)發(fā)放頻率等影響。在大麻素實驗中,根據(jù)神經(jīng)元對Win55212-2的反應(yīng)分為超極化組和去極化組;在食欲素實驗中,根據(jù)神經(jīng)元自身放電頻率,將其分為低頻組和高頻組。采用MTT染色法驗證組織切片及神經(jīng)元活性。結(jié)果第一部分(大麻素實驗組):給予大麻素受體激動劑Win55212-2,與給藥前比較,給藥期間超極化組神經(jīng)元動作電位頻率減少、膜電位顯著降低[0 Hz vs. (4.3 ±3.2)Hz,p<0.05;(-57.0±4.6)mVvs. (-54.1 ±3.8)mV,p<0.01];與給藥期間比較,停止給藥后神經(jīng)元動作電位頻率增加、膜電位升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。與給藥前比較,給藥期間去極化組神經(jīng)元動作電位頻率顯著減少[0 Hz vs. (6.2 ±...

【文章頁數(shù)】：36 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．提取細(xì)胞所用海馬組織活性檢測圖１Ａ?．?ＭＴＴ染色的海馬組織，用于提取??

２．１腦片ＭＴＴ染色??腦片外觀完整，著色紋理自然且與腦組織結(jié)構(gòu)分布相一致，獲取細(xì)胞標(biāo)本的??腦組織定位在ＣＡ１區(qū)錐體細(xì)胞層（圖１）。??圖１．提取細(xì)胞所用海馬組織活性檢測圖１Ａ?．?ＭＴＴ染色的海馬組織，用于提取??細(xì)胞的ＣＡ１區(qū)錐體細(xì)胞層組織部位（箭頭所示）圖１Ｂ．剖面圖示圖....

圖２．?＼Ｖｉｎ５５２１２－２致神經(jīng)元超極化／去極化基本特性散點圖圖２Ａ．靜息電位散點??圖圖２Ｂ．自發(fā)發(fā)放頻率散點圖２Ｃ．半值寬度散點圖圖２Ｄ．峰值和谷值散點圖??

０??－８０??圖２．?＼Ｖｉｎ５５２１２－２致神經(jīng)元超極化／去極化基本特性散點圖圖２Ａ．靜息電位散點??圖圖２Ｂ．自發(fā)發(fā)放頻率散點圖２Ｃ．半值寬度散點圖圖２Ｄ．峰值和谷值散點圖??注：藍(lán)色代表超極化組，紅色代表去極化組；菱形代表峰值，三角形代表谷值??與給藥前比較，給藥期間超極....

圖４．?Ｗｉｎ５５２１２－２致神經(jīng)元去極化典型圖例?圖４Ａ．?Ｗｉｎ５５２Ｉ２－２抑制神經(jīng)元放??電，且其作用完全被選杼性ＣＢＲ１拮抗劑ＡＭ２５１拮抗圖４Ｂ．神經(jīng)元相差顯微鏡??

與給藥期間比較，停止給藥后的神經(jīng)元膜電位顯著降低，動作電位頻率顯著增加，??差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５）；給藥前與停止給藥后比較，神經(jīng)元膜電位及動作電??位頻率相差不大，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＞〇．〇５，圖４，表２）。??ＡＭ２５１??Ａ?Ｗｉｎ５５２１２－２?Ｗｉｎ５５２１２....

圖５．?ＴＥＡ對Ｗｉｎ５５２１２－２的影響?圖５Ａ．單獨應(yīng)用Ｗｉｎ５５２１２－２，神經(jīng)元表現(xiàn)為??，Ｗｉｎ５５２１２－２＋ＴＥＡ，?ＴＥＡＷｉｎ５５２１２－２

?Ｄ?２０ｍＶ｜?０．５ｓ??－５２?ｍＶ??圖５．?ＴＥＡ對Ｗｉｎ５５２１２－２的影響?圖５Ａ．單獨應(yīng)用Ｗｉｎ５５２１２－２，神經(jīng)元表現(xiàn)為??超極化，聯(lián)合應(yīng)用Ｗｉｎ５５２１２－２＋ＴＥＡ，?ＴＥＡ幾乎完全逆轉(zhuǎn)Ｗｉｎ５５２１２－２的作用圖??５Ｂ．神經(jīng)元相差顯微鏡像圖５Ｃ．應(yīng)用Ｗ....

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