膠質(zhì)瘤來(lái)源的Exosome沖擊樹(shù)突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)特異性CTL的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2024-03-24 01:09
目的:旨在證實(shí)膠質(zhì)瘤原代細(xì)胞可以分離出外來(lái)體,從外周血誘導(dǎo)分離能夠培養(yǎng)出樹(shù)突狀細(xì)胞,將膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)液分離出的外來(lái)體致敏樹(shù)突狀細(xì)胞,觀察其體外所引起的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)殺傷活性。 方法:選取臨床上高度惡性膠質(zhì)瘤標(biāo)本,制作成單個(gè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞懸浮液,將懸浮液分成兩份,取其中一份進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng),收集培養(yǎng)兩周的細(xì)胞培養(yǎng)液,采用差速離心法分離出膠質(zhì)瘤細(xì)胞所分泌的外來(lái)體;取另一份膠質(zhì)瘤單個(gè)細(xì)胞懸浮液,通過(guò)反復(fù)離心和凍融的方法制備出膠質(zhì)瘤冷凍抗原;采取同一患者外周血,利用淋巴細(xì)胞裂解液并采用離心的方法,從外周血中獲取單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞,其中這些單核細(xì)胞在細(xì)胞因子IL-4、GM-CSF作用下進(jìn)行培養(yǎng),使其轉(zhuǎn)變成為不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞,然后添加細(xì)胞因子TNF-α繼續(xù)培養(yǎng),使其變?yōu)槌墒斓臉?shù)突狀細(xì)胞;將膠質(zhì)瘤來(lái)源的外來(lái)體、膠質(zhì)瘤冷凍抗原分別沖擊樹(shù)突狀細(xì)胞并與T淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng),通過(guò)MTT法檢測(cè)兩種免疫方法體外對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng),并對(duì)所得結(jié)果采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:膠質(zhì)瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)過(guò)程中,在倒置相差顯微鏡下觀察生長(zhǎng)良好,貼壁細(xì)胞成長(zhǎng)梭狀,大小均勻、形態(tài)單一,呈彌漫型分布; ...
【文章頁(yè)數(shù)】:36 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
附表
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3936739
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
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討論
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