目的構(gòu)建攜帶NGF及髓磷脂相關(guān)糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)基因序列的雙基因共表達(dá)腺病毒(adenovirus expressing NGF and MAG,Ad-NGF-MAG),探討其在大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)中的作用。方法將NGF和MAG共同克隆至5型腺病毒穿梭質(zhì)粒p CA 13,并在HEK 293細(xì)胞中包裝得到重組腺病毒Ad-NGF-MAG并測序鑒定。取雄性SD大鼠32只,體質(zhì)量180²00 g;隨機(jī)分成4組(n=8):對照組(正常對照)、空病毒組(Ad組)、單獨表達(dá)NGF組(Ad-NGF組)和共表達(dá)NGF、MAG組(Ad-NGF-MAG組)。Ad組、AdNGF組和Ad-NGF-MAG組大鼠制備右側(cè)坐骨神經(jīng)損傷模型后,分別于術(shù)側(cè)腓腸肌注射空腺病毒、Ad-NGF及AdNGF-MAG(1×108 PFU),隔天1次,共3次。對照組僅暴露右側(cè)坐骨神經(jīng)后關(guān)閉切口,術(shù)后對應(yīng)時間點注射生理鹽水10μL。術(shù)后31 d,分別行坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(sciatic nerve function index,SFI)、神經(jīng)電生理檢測;切...

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圖1各質(zhì)粒酶切鑒定結(jié)果

中國修復(fù)重建外科雜志2016年8月第30卷第8期1031圖1各質(zhì)粒酶切鑒定結(jié)果apCA13-SV40promoter-EGFP質(zhì)粒酶切鑒定M：Marker1：XbaⅠ、BamHⅠ雙酶切pCA13-SV40promoter-EGFP質(zhì)粒產(chǎn)物2：NheⅠ、BamHⅠ雙酶切pCA13-....

圖3RT-PCR檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGFmRNA表達(dá)1：Ad組2：Ad-NGF組3：Ad-NGF-MAG組圖4Westernblot檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGF蛋白表達(dá)1：Ad組2：Ad-NGF組3：Ad-NGF-MAG組圖5RT-PCR檢測各組NGF和MAGmRNA表達(dá)1：對照組2：Ad組3：Ad-NGF組4：Ad-NGF-MAG組圖6Westernblot檢測各組NGF和MAG蛋白表達(dá)1：對照組2：Ad組3：Ad-NGF組4：Ad-NGF-MAG組圖7各組組織學(xué)觀察（HE×100）

1032ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,August2016,Vol.30,No.8圖3RT-PCR檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGFmRNA表達(dá)1：Ad組2：Ad-NG....

圖1各質(zhì)粒酶切鑒定結(jié)果

中國修復(fù)重建外科雜志2016年8月第30卷第8期1031圖1各質(zhì)粒酶切鑒定結(jié)果apCA13-SV40promoter-EGFP質(zhì)粒酶切鑒定M：Marker1：XbaⅠ、BamHⅠ雙酶切pCA13-SV40promoter-EGFP質(zhì)粒產(chǎn)物2：NheⅠ、BamHⅠ雙酶切pCA13-....

圖3RT-PCR檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGFmRNA表達(dá)1：Ad組2：Ad-NGF組3：Ad-NGF-MAG組圖4Westernblot檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGF蛋白表達(dá)1：Ad組2：Ad-NGF組3：Ad-NGF-MAG組圖5RT-PCR檢測各組NGF和MAGmRNA表達(dá)1：對照組2：Ad組3：Ad-NGF組4：Ad-NGF-MAG組圖6Westernblot檢測各組NGF和MAG蛋白表達(dá)1：對照組2：Ad組3：Ad-NGF組4：Ad-NGF-MAG組圖7各組組織學(xué)觀察（HE×100）

1032ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,August2016,Vol.30,No.8圖3RT-PCR檢測Ad-NGF或Ad-NGF-MAG感染HEK293細(xì)胞后MAG和NGFmRNA表達(dá)1：Ad組2：Ad-NG....

本文編號：3934382