miR-155在ApoE -/- 小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化中的表達(dá)及雷帕霉素的干預(yù)作用
發(fā)布時(shí)間:2024-03-17 04:38
目的:目前認(rèn)為頸動(dòng)脈粥樣硬化是復(fù)雜的炎癥性代謝增生性血管性疾病,是腦血管病發(fā)生的主要發(fā)病機(jī)制。動(dòng)脈粥樣硬化的疾病的發(fā)生和發(fā)展受多種因素的影響,如炎癥細(xì)胞的浸潤、高脂因素和細(xì)胞自噬等。據(jù)報(bào)道m(xù)icro RNAs(mi Rs)能夠靶向調(diào)控相關(guān)目的蛋白基因,調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化病理生理的某個(gè)階段。已有的研究指出巨噬細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞中的mi R-155能夠靶定位于相關(guān)自噬蛋白基因從而調(diào)控自噬的活性,而動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組織中mi R-155的表達(dá)及其與自噬關(guān)系如何卻很少有報(bào)道。因此,我們的研究主要是為了探討mi R-155及自噬相關(guān)蛋白基因在Apo E-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化中的表達(dá),以及雷帕霉素的干預(yù)作用。方法:將36只8周齡雄性Apo E-/-小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組,模型組及雷帕霉素組,(每組12只)。對(duì)照組給予(右頸總動(dòng)脈旁套管術(shù),0.5 mg/kg/d PBS灌胃;模型組給予(右頸總動(dòng)脈套管術(shù),0.5 mg/kg/d PBS灌胃),雷帕霉素組給予(右頸總動(dòng)脈套管術(shù),0.5mg/kg/d雷帕霉素灌胃),所有小鼠給予西方飲食(0.25%膽固醇+15%脂肪),自由飲水8周。術(shù)后8周末處死三組小鼠,并檢測...
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 主要儀器設(shè)備
3 主要試劑與藥品
4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
5 ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立
6 雷帕霉素的配制及給予方式
7 血脂水平測定
8 頸總動(dòng)脈組織病理觀察及透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)
9 RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
9.1 頸總動(dòng)脈斑塊組織總RNA提取
9.2 cDNA的合成
9.3 qRT-PCR
10 Western Blot檢測LC3-Ⅱ,p-mTOR, mTOR的蛋白水平
10.1 試劑配制
10.2 蛋白樣品的提取
10.3 BCA法檢測蛋白濃度
10.4 做膠前的準(zhǔn)備
10.5 配制分離膠和濃縮膠
10.6 上樣及SDS-PAGE凝膠電泳
10.7 切膠
10.8 轉(zhuǎn)膜
10.9 封閉
10.10 孵育抗體
10.11 顯色
11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
1 動(dòng)物體血脂水平檢測結(jié)果
2 頸動(dòng)脈內(nèi)膜病理學(xué)改變
3 組織透射電鏡(TEM)下觀察頸動(dòng)脈斑塊中自噬體數(shù)目變化
4 頸動(dòng)脈斑塊中自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ的表達(dá)變化
5 頸動(dòng)脈斑塊中miR-155 的表達(dá)變化
6 頸動(dòng)脈斑塊中mTOR、p-mTOR相對(duì)蛋白表達(dá)水平的變化
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
在學(xué)期間參加的研究項(xiàng)目
縮略詞表(附錄)
致謝
本文編號(hào):3930521
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2 主要儀器設(shè)備
3 主要試劑與藥品
4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
5 ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立
6 雷帕霉素的配制及給予方式
7 血脂水平測定
8 頸總動(dòng)脈組織病理觀察及透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)
9 RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
9.1 頸總動(dòng)脈斑塊組織總RNA提取
9.2 cDNA的合成
9.3 qRT-PCR
10 Western Blot檢測LC3-Ⅱ,p-mTOR, mTOR的蛋白水平
10.1 試劑配制
10.2 蛋白樣品的提取
10.3 BCA法檢測蛋白濃度
10.4 做膠前的準(zhǔn)備
10.5 配制分離膠和濃縮膠
10.6 上樣及SDS-PAGE凝膠電泳
10.7 切膠
10.8 轉(zhuǎn)膜
10.9 封閉
10.10 孵育抗體
10.11 顯色
11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
1 動(dòng)物體血脂水平檢測結(jié)果
2 頸動(dòng)脈內(nèi)膜病理學(xué)改變
3 組織透射電鏡(TEM)下觀察頸動(dòng)脈斑塊中自噬體數(shù)目變化
4 頸動(dòng)脈斑塊中自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ的表達(dá)變化
5 頸動(dòng)脈斑塊中miR-155 的表達(dá)變化
6 頸動(dòng)脈斑塊中mTOR、p-mTOR相對(duì)蛋白表達(dá)水平的變化
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
在學(xué)期間參加的研究項(xiàng)目
縮略詞表(附錄)
致謝
本文編號(hào):3930521
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