發(fā)布時(shí)間：2024-02-07 04:43

　　膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤，具有發(fā)病率、復(fù)發(fā)率、死亡率高，治愈率低等特點(diǎn)。雖然各種現(xiàn)代技術(shù)迅速發(fā)展，膠質(zhì)瘤的診斷和治療取得了一定進(jìn)步，但是生存期、生活質(zhì)量等指標(biāo)仍無突破性進(jìn)展，因此探索一種新的、有效的治療方法顯得尤為重要。目前基因治療被認(rèn)為是最具有應(yīng)用前景的治療手段之一，而選擇合適的靶基因是基因治療的關(guān)鍵。環(huán)指蛋白R(shí)NF138為含有RING finger結(jié)構(gòu)的蛋白家族成員，該家族蛋白與鋅指蛋白家族類似，通過蛋白‐蛋白、蛋白‐DNA相互作用，參與許多生理功能的調(diào)節(jié)及腫瘤的發(fā)生。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于RNF138在惡性膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及功能研究尚少，因此本研究擬通過PCR、Western blot、免疫組化技術(shù)檢測(cè)RNF138在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及通過慢病毒（Lentivirus）介導(dǎo)的siRNA工具感染惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251對(duì)其功能進(jìn)行體外研究。 本課題從兩個(gè)方面對(duì)RNF138進(jìn)行研究：①通過PCR、Western blot、免疫組化方法分別檢測(cè)其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株及膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)。②通過Lentivirus介導(dǎo)的siRNA工具感染惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251，體外觀察敲減RNF138基因后對(duì)U25...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1RNF138在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中的表達(dá)PCR電泳圖

圖1RNF138在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中的表達(dá)PCR電泳138在五株膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中擴(kuò)增出144bp大小特異性條帶GAPDH在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中擴(kuò)增出496bp大小特異性條帶檢測(cè)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株SHG44、U87、U251、A172、光結(jié)果示SHG44、U87、U25....

圖2細(xì)胞免疫熒光示RNF138在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中表達(dá)（放大倍數(shù)400倍）

圖2細(xì)胞免疫熒光示RNF138在膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中表達(dá)（放大倍數(shù)400倍）其中紅色示RNF138蛋白的表達(dá)，藍(lán)色為DAPI染細(xì)胞核情況，Merge為前兩幅圖片融得；SHG44、U251、A172、U373RNF138陽性率高，U87陽性率稍低膠質(zhì)瘤組織及....

圖3各級(jí)別膠質(zhì)瘤組織與非瘤腦組織RNF138mRNA相對(duì)表達(dá)水平

膠質(zhì)瘤Ⅰ級(jí)*毛細(xì)胞星形細(xì)胞瘤41.79±0.38膠質(zhì)瘤Ⅱ級(jí)*彌漫性星形細(xì)胞瘤10少枝星形細(xì)胞瘤22.11±0.23中樞神經(jīng)細(xì)胞瘤1膠質(zhì)瘤Ⅲ級(jí)*間變性少枝星形細(xì)胞瘤1間變室管膜瘤32.27±0.44間變性星形細(xì)胞瘤7膠質(zhì)瘤Ⅳ級(jí)*髓母細(xì)胞瘤21.45±0.41膠質(zhì)....

圖4腦膠質(zhì)瘤組織與非瘤腦組織RNF138mRNA相對(duì)表達(dá)水平

17圖4腦膠質(zhì)瘤組織與非瘤腦組織RNF138mRNA相對(duì)表達(dá)水平esternblot法檢測(cè)RNF138在膠質(zhì)瘤組織及非瘤腦組織中的表達(dá)水平以RNF138與β-actinWestern印跡結(jié)果的光密度值之比作為組織中RNF138對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果顯示非瘤....

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