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低氧聯(lián)合GDNF誘導大鼠神經干細胞分化為多巴胺能神經元的實驗研究

發(fā)布時間:2024-02-06 20:55
  背景: 神經干細胞是目前頗具前景的基因工程細胞,具有自我更新、增殖及多向分化潛能。神經干細胞的增殖及分化受其所處微環(huán)境的影響,體內多種組織特別是含有干細胞的組織中氧濃度遠遠低于大氣氧濃度,低氧對神經干細胞的增殖及分化均產生影響。 目的: 本試驗在低氧環(huán)境下利用膠質源性神經營養(yǎng)因子對大鼠胚胎神經干細胞進行定向誘導分化,從而研究低氧對神經干細胞向多巴胺能神經元分化的影響,并獲得相當數(shù)量的多巴胺能神經元,為下一步的細胞移植奠定基礎。 方法: 分離培養(yǎng)孕14d-16d Wistar大鼠大腦神經干細胞,通過傳代培養(yǎng)獲得相當數(shù)量的神經干細胞并檢測其自我更新能力,對傳代至第三代的細胞進行Nestin及Brdu蛋白鑒定,在不同氧濃度下利用膠質源性神經營養(yǎng)因子對大鼠神經干細胞進行定向誘導分化,通過免疫細胞化學方法檢測TH陽性細胞表達。 結果: 傳代至第三代的神經干細胞仍能形成懸浮的細胞球,生長迅速,球體較規(guī)則,生長至1w時細胞球體積明顯增大,球體規(guī)則,且第三代神經干細胞均表達Nestin及Brdu;低氧可明顯促進神經干細胞向多巴胺能神經元分化,與常氧對照組比較有顯著差異(p<0.01),且在3%低...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖4.1不同氧濃度下GDNF誘導分化后多巴胺能神經元比率

圖4.1不同氧濃度下GDNF誘導分化后多巴胺能神經元比率

表4.1不同氧濃度下GDNF誘導分化后多巴胺能神經元比率(%,x±s)氧濃度(%)常氧1%3%5%10%多巴胺能神經元比率(%)9.78±1.1014.56±1.02△25.54±1.19△14.17±0.63△11.10±0.81△不同氧濃度組與對照....


圖4.2原代培養(yǎng)24小時細胞克。ā200)

圖4.2原代培養(yǎng)24小時細胞克隆(×200)

圖4.2原代培養(yǎng)24小時細胞克。ā200)圖4.3原代培養(yǎng)48小時細胞克。ā200)圖4.4原代培養(yǎng)3天細胞克。ā200)圖4.5原代培養(yǎng)4天細胞克。ā200)


圖4.3原代培養(yǎng)48小時細胞克隆(×200)

圖4.3原代培養(yǎng)48小時細胞克。ā200)

圖4.2原代培養(yǎng)24小時細胞克隆(×200)圖4.3原代培養(yǎng)48小時細胞克。ā200)圖4.4原代培養(yǎng)3天細胞克隆(×200)圖4.5原代培養(yǎng)4天細胞克。ā200)


圖4.4原代培養(yǎng)3天細胞克隆(×200)

圖4.4原代培養(yǎng)3天細胞克。ā200)

圖4.4原代培養(yǎng)3天細胞克隆(×200)圖4.5原代培養(yǎng)4天細胞克。ā200)圖4.6原代培養(yǎng)5天細胞克。ā200)圖4.7原代培養(yǎng)6天細胞克。ā200)



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