背景： 神經(jīng)干細(xì)胞是目前頗具前景的基因工程細(xì)胞，具有自我更新、增殖及多向分化潛能。神經(jīng)干細(xì)胞的增殖及分化受其所處微環(huán)境的影響，體內(nèi)多種組織特別是含有干細(xì)胞的組織中氧濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于大氣氧濃度，低氧對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖及分化均產(chǎn)生影響。 目的： 本試驗(yàn)在低氧環(huán)境下利用膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化，從而研究低氧對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元分化的影響，并獲得相當(dāng)數(shù)量的多巴胺能神經(jīng)元，為下一步的細(xì)胞移植奠定基礎(chǔ)。 方法： 分離培養(yǎng)孕14d-16d Wistar大鼠大腦神經(jīng)干細(xì)胞，通過傳代培養(yǎng)獲得相當(dāng)數(shù)量的神經(jīng)干細(xì)胞并檢測(cè)其自我更新能力，對(duì)傳代至第三代的細(xì)胞進(jìn)行Nestin及Brdu蛋白鑒定，在不同氧濃度下利用膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化，通過免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)TH陽性細(xì)胞表達(dá)。 結(jié)果： 傳代至第三代的神經(jīng)干細(xì)胞仍能形成懸浮的細(xì)胞球，生長(zhǎng)迅速，球體較規(guī)則，生長(zhǎng)至1w時(shí)細(xì)胞球體積明顯增大，球體規(guī)則，且第三代神經(jīng)干細(xì)胞均表達(dá)Nestin及Brdu；低氧可明顯促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元分化，與常氧對(duì)照組比較有顯著差異（p<0.01），且在3%低...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖4.1不同氧濃度下GDNF誘導(dǎo)分化后多巴胺能神經(jīng)元比率

表4.1不同氧濃度下GDNF誘導(dǎo)分化后多巴胺能神經(jīng)元比率（%,x±s）氧濃度（%）常氧1%3%5%10%多巴胺能神經(jīng)元比率（%）9.78±1.1014.56±1.02△25.54±1.19△14.17±0.63△11.10±0.81△不同氧濃度組與對(duì)照....

圖4.2原代培養(yǎng)24小時(shí)細(xì)胞克�。ā�200）

圖4.2原代培養(yǎng)24小時(shí)細(xì)胞克隆（×200）圖4.3原代培養(yǎng)48小時(shí)細(xì)胞克�。ā�200）圖4.4原代培養(yǎng)3天細(xì)胞克隆（×200）圖4.5原代培養(yǎng)4天細(xì)胞克�。ā�200）

圖4.3原代培養(yǎng)48小時(shí)細(xì)胞克�。ā�200）

圖4.2原代培養(yǎng)24小時(shí)細(xì)胞克隆（×200）圖4.3原代培養(yǎng)48小時(shí)細(xì)胞克�。ā�200）圖4.4原代培養(yǎng)3天細(xì)胞克隆（×200）圖4.5原代培養(yǎng)4天細(xì)胞克�。ā�200）

圖4.4原代培養(yǎng)3天細(xì)胞克�。ā�200）

圖4.4原代培養(yǎng)3天細(xì)胞克隆（×200）圖4.5原代培養(yǎng)4天細(xì)胞克�。ā�200）圖4.6原代培養(yǎng)5天細(xì)胞克隆（×200）圖4.7原代培養(yǎng)6天細(xì)胞克�。ā�200）

本文編號(hào)：3896175