發(fā)布時間：2023-11-07 20:31

　　目的:探討心肌營養(yǎng)素1(cardiotrophin 1,CT1)對人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilical cord blood-derived MSCs,h UCB-MSCs)誘導(dǎo)神經(jīng)分化的促進(jìn)作用及MAPK/ERK和PI3K/Ak信號通路在此過程中是否存在交互作用。方法:(1)h UCB-MSCs分離、培養(yǎng)及鑒定:采集人臍血標(biāo)本,采用改良密度梯度離心法及貼壁篩選法分離培養(yǎng)及純化h UCB-MSCs,采用流式細(xì)胞術(shù)鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記;(2)腺病毒轉(zhuǎn)染:用Adv-CT1及Adv-EGFP以感染復(fù)數(shù)(MOI)=100PFU/cell分別轉(zhuǎn)染h UCB-MSCs;(3)神經(jīng)誘導(dǎo)分化:采用神經(jīng)誘導(dǎo)劑(全反式維甲酸、谷氨酰胺及無血清高糖培養(yǎng)基)誘導(dǎo)h UCB-MSCs向神經(jīng)方向分化,于誘導(dǎo)后6h及4d觀察各組形態(tài)學(xué)變化,共聚焦顯微鏡觀察神經(jīng)元特異性核蛋白(Neu N)及膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)情況;(4)選用不同si RNA濃度(25n M、50n M、100n M)摸索最佳轉(zhuǎn)染效率;(5)用si RNA-ERK及si RNA-Akt以最佳轉(zhuǎn)染效率的si RNA濃度轉(zhuǎn)染神...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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