一、研究目的1.研究腦卒中患者中ABCBl基因多態(tài)性的分布特征。2.探討腦卒中患者的ABCBl基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與基因多態(tài)性的相關(guān)性。3.初步探究腦卒中患者ABCBl基因多態(tài)性及啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與阿司匹林抵抗的相關(guān)性。二、研究方法1.檢測(cè)樣本的ABCBl基因的多態(tài)性本研究共納入腦卒中患者302例,根據(jù)其血栓彈力圖(thrombelastogram,TEG)的檢測(cè)報(bào)告分組:阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)組及阿司匹林敏感(aspirin sensitive,AS)組。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析技術(shù)(PCR-RFLP)和DNA直接測(cè)序兩種方法共同對(duì)ABCB1基因的C1236T、G2677T/A和C3435T三個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行基因多態(tài)性的檢測(cè)。腦卒中患者ABCBl基因各位點(diǎn)的基因多態(tài)性采用SHEsis軟件進(jìn)行在線分析。2.檢測(cè)樣本ABCBl基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化程度使用重亞硫酸鹽修飾后的限制性?xún)?nèi)切酶(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)法對(duì)入組的腦卒中患者進(jìn)行ABCBl基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平的檢測(cè)...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 ABCB1基因多態(tài)性與AR
    第一章 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 研究對(duì)象及納入標(biāo)準(zhǔn)
            1.1.2 主要儀器及設(shè)備
            1.1.3 主要試劑及配置溶液
            1.1.4 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 標(biāo)本采集
            1.2.2 提取全基因組DNA
            1.2.3 紫外光度計(jì)鑒定提取的 DNA 濃度和純度
            1.2.4 PCR擴(kuò)增
            1.2.5 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳
            1.2.6 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切
            1.2.7 酶切產(chǎn)物的電泳
            1.2.8 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的直接測(cè)序
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    第二章 結(jié)果
        2.1 AS組和AR組臨床資料的比較
        2.2 ABCB1基因SNPs位點(diǎn)的基因型
        2.3 ABCB1基因SNPs位點(diǎn)的單倍體分析
    第三章 討論
第二部分 ABCB1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與AR
    第一章 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 研究對(duì)象及納入標(biāo)準(zhǔn)
            1.1.2 主要儀器和設(shè)備
            1.1.3 主要試劑及溶液配置
            1.1.4 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 標(biāo)本采集
            1.2.2 全基因組DNA的提取
            1.2.3 DNA的重亞硫酸鹽修飾
            1.2.4 甲基化PCR反應(yīng)
            1.2.5 甲基化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳
            1.2.6 甲基化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切
            1.2.7 酶切產(chǎn)物的電泳
            1.2.8 甲基化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序DNA
            1.2.9 甲基化水平的掃描
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    第二章 結(jié)果
        2.1 ABCB1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)與AR的相關(guān)性分析
        2.2 ABCB1基因多態(tài)性與啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平的相關(guān)性
        2.3 ABCB1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與AA%的相關(guān)性
    第三章 討論
    第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的科研成果
中英文對(duì)照
致謝



本文編號(hào)：3823529