Pumilio-2在難治性癲癇患者及匹羅卡品致癇大鼠腦組織中的表達(dá)研究
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【摘要】:目的:檢測(cè)Pumilio2 (Pum2)在難治性癲癇患者和氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇大鼠模型腦組織中的表達(dá)變化情況,以探討其在癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:1.收集20例難治性癲癇患者的手術(shù)切除顳葉腦標(biāo)本,并收集20例嚴(yán)重腦外傷患者的顳葉手術(shù)切除標(biāo)本作為對(duì)照。2.選擇成年雄性S-D大鼠建立氯化鋰-匹羅卡品癲癇模型,按照癲癇發(fā)展的不同階段將大鼠隨機(jī)分成7個(gè)組,分別是生理鹽水對(duì)照組、癲癇大發(fā)作后1天、3天、7天、14天、30天和60天組。3.用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miR-134、Pum2和Nav1.6的表達(dá)水平,免疫印跡和免疫組織化學(xué)染色技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證Pun2的表達(dá)水平,用免疫組織熒光雙標(biāo)技術(shù)對(duì)Pum2進(jìn)行細(xì)胞定位,用Golgi染色檢測(cè)神經(jīng)元樹(shù)突形態(tài)的變化。結(jié)果:1.miR-134在大鼠癲癇模型中各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均升高,除外癲癇大發(fā)作后7天和14天,在1天、3天、30天和60天時(shí)與對(duì)照組相比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。2.Pum2在難治性癲癇患者腦組織中的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組(p0.05)。3.Pum2在大鼠癲癇模型中的表達(dá)下降,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫印跡分析結(jié)果表明Pum2在癲癇大發(fā)作后各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)均顯著低于正常對(duì)照組(p0.05),免疫組織化學(xué)染色顯示Pum2在癲癇大發(fā)作后3天、7天、14天、30天和60天的表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組(p0.05),1天時(shí)Pum2的表達(dá)降低,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4.免疫組織熒光雙標(biāo)技術(shù)提示Pum2定位于神經(jīng)元胞漿和樹(shù)突內(nèi),在細(xì)胞核以及星形膠質(zhì)細(xì)胞中均無(wú)表達(dá)。5.匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元樹(shù)突的分支和長(zhǎng)度增加,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。6.Nav1.6在大鼠癲癇模型中各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均升高,除外癲癇大發(fā)作后60天,其余時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組相比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:Pum2在難治性癲癇患者和氯化鋰/匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇大鼠模型中的表達(dá)降低,其可能在癲癇的發(fā)生和發(fā)病機(jī)制中具有一定的作用。
【關(guān)鍵詞】:癲癇 Pumilio2 匹羅卡品 興奮性環(huán)路
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R742.1
【目錄】:
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-8
- 中文摘要8-10
- 英文摘要10-13
- 前言13-16
- 1 材料與方法16-29
- 2 結(jié)果29-36
- 3 討論36-39
- 4 小結(jié)39-40
- 全文總結(jié)40-41
- 參考文獻(xiàn)41-45
- 文獻(xiàn)綜述45-53
- 參考文獻(xiàn)50-53
- 致謝53-54
- 碩士期間發(fā)表的論文54
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本文編號(hào):378901
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