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MiR-34a通過Wnt/β-catenin信號通路影響神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖及凋亡

發(fā)布時間:2023-04-01 15:42
  目的: 應(yīng)用文獻(xiàn)檢索和生物信息庫預(yù)測,尋找miR-34a參與調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路的線索。通過分子生物學(xué)技術(shù)在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(SK-N-SH細(xì)胞)中過表達(dá)miR-34a,而后檢測Wnt/β-catenin信號通路活性的變化,以及腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的情況。為闡明miR-34a和Wnt/β-catenin信號通路在神經(jīng)母細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制中的作用提供依據(jù),也為進(jìn)一步研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤發(fā)生的分子機(jī)制和基因治療方法提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 1、檢索相關(guān)文獻(xiàn)資料并應(yīng)用生物信息學(xué)方法——靶基因預(yù)測軟件(PicTar、TargetScan、microRNA.org、RNA22)預(yù)測并分析可能調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路的microRNA,同時預(yù)測miR-34a潛在的靶基因。 2、構(gòu)建miR-34a的模擬物并將其轉(zhuǎn)入SK-N-SH細(xì)胞中,再以半定量反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測miR-34a在細(xì)胞中的表達(dá)情況。 3、在SK-N-SH細(xì)胞中過表達(dá)miR-34a后,蟲熒光素報(bào)告實(shí)驗(yàn)分析Wnt1和catenin-δ-1的mRNA轉(zhuǎn)...

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學(xué)位級別】:碩士

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