目的:探討Notch1/JNK信號(hào)通路在缺氧引起的神經(jīng)元損傷中的作用。方法:原代培養(yǎng)新生SD大鼠皮層神經(jīng)元,利用低氧條件培養(yǎng)建立缺氧模型。利用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在低氧誘導(dǎo)的不同時(shí)間,神經(jīng)元的活性及siRNA干擾后神經(jīng)元的活性;利用RT-q PCR與Western Blot檢測(cè)對(duì)照組與低氧組神經(jīng)元中NICD,p-JNK,Caspase-3mRNA與蛋白的表達(dá)情況;利用siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)轉(zhuǎn)染Notch1 siRNA或JNK siRNA至神經(jīng)元中后,利用Western Blot檢測(cè)低氧組與轉(zhuǎn)染組神經(jīng)元中NICD,p-JNK,Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:缺氧情況下神經(jīng)元活性較低,具有時(shí)間依賴(lài)性;缺氧情況下,神經(jīng)元的NICD,p-JNK,Caspase-3 mRNA及蛋白的表達(dá)均顯著升高。抑制神經(jīng)元中Notch1的活性,可進(jìn)一步抑制JNK,Caspase-3的表達(dá),改善神經(jīng)元活性。結(jié)論:缺氧導(dǎo)致神經(jīng)元Notch1信號(hào)被激活,Notch信號(hào)調(diào)節(jié)JNK的磷酸化,磷酸化的JNK進(jìn)一步促進(jìn)Caspase-3的激活,從而降低神經(jīng)細(xì)胞的活性或促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的死亡。

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑
    2 方法
        2.1 大鼠皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞分組
        2.3 神經(jīng)元活性檢測(cè)
        2.4 RT-q PCR檢測(cè)
        2.5 Western Blot檢測(cè)
        2.6 Notch1 siRNA的轉(zhuǎn)染
結(jié)果
    1低氧處理對(duì)神經(jīng)元活性的影響
    2低氧誘導(dǎo)神經(jīng)元中NICD、JNK和Caspase-3 mR-NA的表達(dá)
    3 低氧誘導(dǎo)神經(jīng)元中NICD、p-JNK和活化的Caspase-3蛋白的表達(dá)
    4 siRNA干擾對(duì)神經(jīng)元活性的影響
    5 siRNA干擾神經(jīng)元中NICD、p-JNK和Caspase-3蛋白的表達(dá)
討論



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