本文關(guān)鍵詞：辛伐他汀對神經(jīng)源性肺水腫大鼠血清孵育的肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究辛伐他汀對神經(jīng)源性肺水腫(neurogenic pulmonary edema,NPE)大鼠血清孵育的人肺微血管內(nèi)皮細胞(Human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC)凋亡的影響,并探討其可能的機制。方法:健康的雄性SD大鼠50只,體重250-300g,參考Ishikawa N和Hamdy O建立大鼠NPE模型,收集NPE大鼠的血清備用。將在體外培養(yǎng)的HPMEC,隨機地分為3組,分別為對照組,NPE組,辛伐他汀組,每組6個樣本,培養(yǎng)24h后收集細胞進行以下檢測:MTT法檢測各組HPMEC的細胞毒性;流式細胞儀檢測各組HPMEC的凋亡率;RT-PCR檢測各組HPMEC Bcl-2 m RNA和Bax m RNA的表達水平;WB檢測各組HPMEC Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表達水平。結(jié)果:MTT:與NPE組相比,辛伐他汀組細胞培養(yǎng)24h及48h后活性明顯升高(P0.01)。流式細胞儀檢測結(jié)果:對照組各樣本HPMEC平均凋亡率為4.28%,NPE組各樣本HPMEC平均凋亡率為35.96%,辛伐他汀組各樣本HPMEC平均凋亡率為16.98%;與對照組比較,NPE組、辛伐他汀組細胞凋亡率明顯增加(P0.01);與NPE組比較,辛伐他汀組細胞凋亡率明顯下降(P0.01)。RT-PCR:與對照組相比,NPE組及辛伐他汀組,Bcl-2 m RNA、Bax m RNA均高表達(P0.01);與NPE組相比,辛伐他汀組Bcl-2m RNA高表達(P0.01),Bax m RNA低表達(P0.01)。WB:與對照組相比,NPE組、辛伐他汀組,Bcl-2、Bax蛋白均高表達(P0.01);與NPE組相比,辛伐他汀組Bcl-2 m RNA高表達(P0.01),Bax m RNA低表達(P0.05)。結(jié)論:辛伐他汀可抑制NPE大鼠血清孵育的HPMEC的凋亡,其機制之一可能與其上調(diào)Bcl-2表達,下調(diào)Bax表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：辛伐他汀 神經(jīng)源性肺水腫 微血管內(nèi)皮細胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R741
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 主要英文縮略語索引8-11
• 第1章 緒論11-15
• 第2章 材料和方法15-27
• 2.1 實驗材料15-18
• 2.1.1 主要藥物和試劑15-16
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備16
• 2.1.3 主要試劑配制16-18
• 2.2 實驗方法18-19
• 2.2.1 實驗動物處理18-19
• 2.2.2 HPMEC分組方案19
• 2.3 檢測指標19-25
• 2.3.1 四唑鹽比色法（MTT法）檢測細胞代謝活性19
• 2.3.2 流式細胞儀檢測各組HPMEC的凋亡率19-20
• 2.3.3 Real-time PCR檢測Bcl-2、Bax mRNA在各組肺微血管內(nèi)皮細胞中的表達20-22
• 2.3.4 Western Blot檢測Bcl-2、Bax蛋白在各組HPMEC中的表達22-25
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)分析25-27
• 第3章 結(jié)果27-33
• 3.1 辛伐他汀對NPE大鼠血清誘導(dǎo)的HPMEC活性的影響27
• 3.2 流式細胞儀檢測各組HPMEC的凋亡率的表達27-29
• 3.3 RT-PCR 檢測 HPMEC 中 Bcl-2、Bax m RNA 的表達29
• 3.4 WB檢測肺微血管內(nèi)皮細胞Bcl-2、Bax蛋白的表達29-33
• 第4章 討論33-39
• 第5章 結(jié)論39-41
• 參考文獻41-45
• 文獻綜述45-53
• 參考文獻50-53
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文及參與課題53-55
• 致謝55

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本文編號：374529