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膦胺霉素抑制膠質(zhì)瘤中烯醇化酶的機制探究

發(fā)布時間:2023-02-10 17:58
  目的:本研究目的在于探究膦胺霉素對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖是否產(chǎn)生影響及其作用機制,為膠質(zhì)瘤的藥物治療和控制提供新的線索。方法:收集2017-2018年間在皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科行病理組織檢查患者的膠質(zhì)瘤樣本18份,對瘤組織進行免疫組化實驗,采用陽性面積百分比法計算表達量。根據(jù)膠質(zhì)瘤的惡性程度,對不同惡性程度膠質(zhì)瘤中的神經(jīng)元特異性烯醇化酶的表達量進行分析。細(xì)胞實驗采用惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87進行培養(yǎng),并用siRNA技術(shù)沉默神經(jīng)元特異性烯醇化酶同工酶α-烯醇化酶的表達,應(yīng)用熒光定量PCR和蛋白免疫印跡法檢測α-烯醇化酶的沉默效率后,加入膦胺霉素作用不同時間。細(xì)胞增殖毒性實驗檢測膦胺霉素對U87的增殖毒性,細(xì)胞凋亡實驗檢測膦胺霉素對U87細(xì)胞的凋亡的影響;采用比色法來檢測U87細(xì)胞內(nèi)的磷酸烯醇式丙酮酸的含量。結(jié)果:1、免疫組化實驗結(jié)果顯示,所有樣本中,膠質(zhì)瘤惡性程度越高,陽性面積所占據(jù)的比例越大,神經(jīng)元特異性烯醇化酶的組織表達量就越高(χ2=9.843,P=0.014)。神經(jīng)元特異性烯醇化酶的表達與性別(Z=-1.910,P=0.028)、組織類型(χ2=8.200,P=0.042)之間的差異均...

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料(資料、內(nèi)容)與方法
    1.主要儀器及來源
    2.主要試劑及來源
    3.研究內(nèi)容與方法
        3.1 臨床組織樣本的收集
        3.2 免疫組化
        3.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.4 最佳siRNA片段的篩選
        3.5 膦胺霉素干預(yù)
        3.6 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖毒性
        3.7 Annexin V和 PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡
        3.8 比色法檢測PEP含量
        3.9 統(tǒng)計分析
        3.10 質(zhì)量控制
        3.11 技術(shù)路線圖
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝



本文編號:3739641

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