目的:探究轉(zhuǎn)錄因子E2F-1對膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞增殖和侵襲的影響。腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤,占顱內(nèi)原發(fā)腫瘤的50%以上,發(fā)病人群跨越不同年齡段。手術(shù)切除為主,輔助放化療為其主要治療方案。膠質(zhì)瘤呈高浸潤性生長,術(shù)后容易復(fù)發(fā),嚴(yán)重威脅著患者的生存期。準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤的微衛(wèi)星灶,利用載體攜帶治療藥物或基因靶向作用于膠質(zhì)瘤部位,成為近年來探索膠質(zhì)瘤治療的新方向,有望能為膠質(zhì)瘤的治療探索出更有效和精確的方法。E2F-1是轉(zhuǎn)錄因子E2F家族成員之一,它和異源性蛋DP1/2結(jié)合后,成為細(xì)胞周期素依賴的蛋白激酶（CDKs）,是下游調(diào)控細(xì)胞周期和凋亡的重要因子。E2F-1在多種惡性腫瘤中表達(dá)異常,為腫瘤發(fā)生發(fā)展中的一個重要致病因素,但對E2F-1與腦膠質(zhì)瘤的研究相對較少。本實驗利用RNAi技術(shù),敲低膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中E2F-1基因的表達(dá),通過MTT、Transwell實驗觀察U251細(xì)胞增殖能力及侵襲能力的改變。從而為E2F-1對U251細(xì)胞生物學(xué)特征的影響作用機(jī)制,以及為探索腦膠質(zhì)瘤治療新途徑奠定基礎(chǔ)。材料和方法:本研究通過對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),以人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞為研究對象,以制備... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料與儀器
        2.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)所需試劑
        2.1.2 轉(zhuǎn)染敲低慢病毒
        2.1.3 Real-time PCR所需主要試劑
        2.1.4 蛋白免疫印跡所需主要試劑
        2.1.5 細(xì)胞增殖
        2.1.6 細(xì)胞侵襲
        2.1.7 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 適宜的嘌呤霉素濃度的選擇
        2.2.3 慢病毒轉(zhuǎn)染U251 細(xì)胞,嘌呤霉素篩選,構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
        2.2.4 Real-time PCR、Western-blot測定轉(zhuǎn)染后U251 細(xì)胞中E2F-1 基因的沉默效果
        2.2.5 MTT法檢測各組U251 細(xì)胞OD490 繪制并比較生長曲線變化
        2.2.6 Transwell實驗檢測各組U251 細(xì)胞的侵襲能力
    2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 熒光顯微鏡下鑒定轉(zhuǎn)染效果
    3.2 Real-time PCR檢測各組U251 細(xì)胞E2F-1 mRNA的表達(dá)
    3.3 Western blot檢測各組U251 細(xì)胞E2F-1 蛋白的表達(dá)
    3.4 MTT檢測各組U251 細(xì)胞的增殖能力
    3.5 Transwell檢測各組U251 細(xì)胞的侵襲能力
4 討論
5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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