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CX3CR1對缺血再灌注小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)控的研究

發(fā)布時間:2017-05-16 16:17

  本文關(guān)鍵詞:CX3CR1對缺血再灌注小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)控的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:觀察不同時間點(diǎn)的腦缺血再灌注小鼠病灶區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量和形態(tài)的變化,探討CX3CR1對小膠質(zhì)細(xì)胞的影響。方法:1.將25只野生型(Wild-type,WT) C57BL/6小鼠進(jìn)行隨機(jī)分組:6h組、12h組、24h組、48h組、72h組,每組5只,建立小鼠腦缺血再灌注模型。2.術(shù)后進(jìn)行神經(jīng)功能缺失評分。在術(shù)后6h、12h、24h、48h、72h處死小鼠并灌注取腦,石蠟包埋切片,HE染色觀察并分析腦梗死面積情況;免疫組織化學(xué)方法行anti-Iba1(小膠質(zhì)細(xì)胞/外周血巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志物)染色,動態(tài)觀察梗塞側(cè)皮層、半暗帶、紋狀體、海馬4個部位及對側(cè)的相同部位,計算每側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量,觀察細(xì)胞形態(tài)。3.選梗死面積和小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量最多的時間組進(jìn)行WT小鼠和CX3CR1基因敲除(Knock-out, KO) C57BL/6小鼠進(jìn)行對比,分析腦梗死面積和小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量。結(jié)果:1.WT小鼠從術(shù)后蘇醒、6h、12h、24hh、48h、72h神經(jīng)功能缺失評分逐漸升高。2.HE染色確定小鼠腦缺血再灌注模型制作成功,WT小鼠腦梗死面積在6h、12h、24h、48h、72h時間軸上逐漸增多,6h、12h、24h組間統(tǒng)計分析有顯著差異性(P0.05),24h、48h、72h各組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。在72h,WT小鼠腦梗死面積比KO小鼠多,且有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。3.WT小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量梗死側(cè)較對側(cè)多,且有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);梗死側(cè)WT小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量在6h、12h、24h、48h、72h時間軸上逐漸增多,除48h和72h組間統(tǒng)計分析無差異性,其余各組均有差異性(P0.05)。WT小鼠12h、24h、48h、72h梗死側(cè)的小膠質(zhì)細(xì)胞阿米巴樣改變明顯。在72h,WT小鼠腦梗死側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量比KO小鼠多,且有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1.WT小鼠腦缺血再灌注后6h、12h、24h、48h、72h,梗死側(cè)的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量逐漸增多,并且與梗死面積和神經(jīng)功能缺失評分顯著性正相關(guān)。2.在缺血再灌注的早期,CX3CR1信號缺失可以減少腦缺血再灌注小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量和腦梗死面積。3.抑制CX3CR1信號表達(dá)表現(xiàn)出保護(hù)神經(jīng)的作用,可以作為腦缺血早期的治療方法。
【關(guān)鍵詞】:CX3CR1 Fractalkine 小膠質(zhì)細(xì)胞 腦缺血 再灌注損傷
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R743
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 中英文縮略詞表10-12
  • 引言12-17
  • 材料與方法17-30
  • 1. 材料17-21
  • 1.1 主要儀器設(shè)備17-18
  • 1.2 主要實驗試劑及材料18-19
  • 1.3 實驗動物19-20
  • 1.4 試劑配制20-21
  • 2. 方法21-30
  • 2.1 實驗動物分組21
  • 2.2 模型建立21-22
  • 2.3 神經(jīng)功能缺失評分22-24
  • 2.4 標(biāo)本采集24-25
  • 2.5 石蠟包埋25-27
  • 2.6 石蠟切片27
  • 2.7 蘇木素與伊紅染色27-28
  • 2.8 免疫組織化學(xué)染色28
  • 2.9 主要觀察指標(biāo)及結(jié)果判定28-29
  • 2.10 圖像分析和統(tǒng)計學(xué)處理29-30
  • 結(jié)果30-38
  • 1 實驗動物大體觀察30
  • 2 神經(jīng)功能缺失評分結(jié)果30-31
  • 3 HE染色結(jié)果31-32
  • 4 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果32-34
  • 5 神經(jīng)功能缺失評分、梗死面積和梗死側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性分析34-36
  • 6 WT小鼠和KO小鼠的腦梗死面積、梗死側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞對比分析36-38
  • 討論38-45
  • 結(jié)論45-46
  • 參考文獻(xiàn)46-53
  • 綜述53-60
  • 參考文獻(xiàn)57-60
  • 在讀碩士期間論文發(fā)表情況60-61
  • 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 丁鵬;馮忠堂;余化霖;王嘉滬;李玉保;嚴(yán)琪;薛黎萍;林榮安;;趨化因子Fractalkine體外趨化骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移的實驗研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2006年12期

2 孫健;李淑梅;鄭柳穎;雷明明;;FKN影響動脈粥樣硬化信號傳導(dǎo)機(jī)制及G-蛋白在其中作用的研究[J];中國老年學(xué)雜志;2007年06期

3 毛德軍;宮相聰;唐詠春;郭瑞友;;燈盞生脈膠囊干預(yù)急性進(jìn)展性腦梗死的前瞻性研究[J];中國新藥雜志;2010年11期


  本文關(guān)鍵詞:CX3CR1對缺血再灌注小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)控的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:371329

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