目的建立模擬缺血/再灌注（I/R）模型觀察促紅細胞生成素（EPO）衍生肽（HBSP）對I/R的腦微血管內(nèi)皮細胞（BMECs）的保護作用,并探討其作用的可能信號傳導(dǎo)通路。方法分離培養(yǎng)大鼠BMECs,建立模擬SI/R損傷模型,隨機分為對照組、I/R組、I/R+HBSP組（HBSP組分別選擇2.5、25.0、50.0、100.0 ng/ml濃度）,通過噻唑藍（MTT）法檢測細胞增殖情況,原位細胞凋亡檢測（TUNEL）法檢測BMECs的凋亡,以確定藥物作用的最適濃度。采用Western印跡法檢測蛋白激酶B（Akt）及磷酸化的Akt、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及磷酸化的mTOR、核糖體40 S小亞基S6蛋白激酶（p70S6K）及磷酸化的p70S6K蛋白表達。結(jié)果 I/R損傷抑制實驗組細胞增殖,促進其凋亡。HBSP可以改善I/R后實驗細胞的增殖情況,抑制其凋亡。HBSP可上調(diào)Akt,mTOR及p70S6K蛋白的磷酸化表達。結(jié)論 HBSP通過激活磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/Akt/mTOR信號通路對I/R損傷的BMECs起到保護作用。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 大鼠BMECs制備
    1.3 構(gòu)建模擬I/R模型
    1.4 分組
    1.5 采用MTT法檢測BMECs增殖數(shù)目
    1.6 TUNEL法檢測BMECs的凋亡
    1.7 Western印跡法檢測蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖體40 S小亞基S6蛋白激酶(p70S6K)的表達及磷酸化(p)水平
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 BMECs增殖能力
    2.2 HBSP對I/R誘導(dǎo)的BMECs凋亡的影響
    2.3 pAkt、pmTOR、pp70S6K蛋白水平
3 討 論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3708551