背景:蛛網(wǎng)膜下腔出血（Subarachnoid hemorrhage,SAH）是由于腦部的血管破裂出血,血液侵入蛛網(wǎng)膜下腔所致的一類高死亡率和高致殘率的疾病,分原發(fā)性和繼發(fā)性SAH。,近十幾年來(lái)臨床上對(duì)于SAH后血管痙攣的治療已經(jīng)有了很大的進(jìn)步,但是對(duì)于SAH的預(yù)后改善尚無(wú)明顯進(jìn)展,常引起嚴(yán)重的神經(jīng)功能損傷,包括腦炎性反應(yīng)等引起的繼發(fā)性腦損傷會(huì)直接影響到SAH患者的生活質(zhì)量和生存率。SAH發(fā)生后72小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)的全腦直接損傷（即早期腦損傷）包括早期腦水腫、氧化應(yīng)激性損害、神經(jīng)細(xì)胞凋亡以及腦梗死。因此,本研究針對(duì)早期腦損傷相關(guān)的因子CIRP、及抑制劑C23蛋白、延遲繼發(fā)性腦損傷相關(guān)的因子RBM3在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)反應(yīng),以及如何調(diào)節(jié)此類反應(yīng)因子和減輕神經(jīng)元損傷的機(jī)制進(jìn)行研究。方法:本課題首先從C57BL/6小鼠上獲取神經(jīng)元細(xì)胞,通過(guò)培養(yǎng)建立穩(wěn)定的神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)系,建立細(xì)胞SAH模型。通過(guò)視交叉池注血法,建立大鼠SAH模型。通過(guò)大鼠SAH模型,觀察腦部顳葉皮層神經(jīng)細(xì)胞的免疫熒光染色,確定CIRP和RBM3在腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的分布特點(diǎn),使用real-time PCR和Western Blot法檢測(cè)神... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
第一章 緒論
    第一節(jié) 蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷的臨床特征和治療現(xiàn)狀
        1.1.1 蛛網(wǎng)膜下腔出血發(fā)病特征,病因和發(fā)病率
        1.1.2 蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷治療現(xiàn)狀
        1.1.3 蛛網(wǎng)膜下腔出血并發(fā)癥及治療
    第二節(jié) 蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障破壞機(jī)制和治療靶點(diǎn)
        1.2.1 蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障破壞的特點(diǎn)
        1.2.2 蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障破壞的機(jī)制
        1.2.3 內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙或細(xì)胞凋亡作為潛在目標(biāo)
        1.2.4 破壞緊密連接
    第三節(jié) 蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷低溫保護(hù)機(jī)制和出血后繼發(fā)腦損傷炎性反應(yīng)抑制在臨床上的作用
        1.3.1 低溫在蛛網(wǎng)膜下腔出血中的腦損傷治療進(jìn)展
        1.3.2 CIRP在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究進(jìn)展
        1.3.3 RBM3在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究進(jìn)展
        1.3.4 C23在疾病治療中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
第二章 低溫影響CIRP表達(dá)在蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷中的保護(hù)作用研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 主要試劑的配制方法
        2.2.4 主要實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 大鼠分組建模后死亡率及腦組織形態(tài)
        2.3.2 大鼠顳葉皮層CIRP mRNA和蛋白的表達(dá)
        2.3.3 大鼠顳葉皮層凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)(線粒體凋亡途徑)
        2.3.4 CIRP主要表達(dá)在神經(jīng)元細(xì)胞,在星形膠質(zhì)細(xì)胞中只有少部分表達(dá)
        2.3.5 凋亡染色(四組大鼠建模后1d,冰凍切片TUNEL染色)
        2.3.6 免疫組化DAB染色(四組大鼠建模后1d,石蠟切片)
        2.3.7 尼氏染色(四組大鼠建模后3d,石蠟切片Nissl染色)
        2.3.8 電鏡結(jié)果(四組大鼠建模后1d,電鏡超薄切片)
        2.3.9 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)
        2.3.10 神經(jīng)元的體外實(shí)驗(yàn)中Western blot檢測(cè)CIRP和Caspase3的表達(dá)
        2.3.11 原代培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡染色
    2.4 討論
        2.4.1 治療性低溫對(duì)正常大鼠產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激損傷,運(yùn)動(dòng)功能下降
        2.4.2 治療性低溫減輕了SAH大鼠線粒體途徑的細(xì)胞凋亡,改善了運(yùn)動(dòng)功能
        2.4.3 CIRP是新發(fā)現(xiàn)的重要促炎因子,治療性低溫降低了SAH大鼠腦部皮層CIRP的表達(dá),減輕了早期腦損傷
    2.5 結(jié)論
    2.6 參考文獻(xiàn)
第三章 低溫影響RBM3表達(dá)在蛛網(wǎng)膜下腔出血繼發(fā)性腦損傷中的保護(hù)作用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 主要試劑的配制方法
        3.2.4 主要實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 四組大鼠顳葉皮層RBM3蛋白和mRNA的表達(dá)
        3.3.2 大鼠(建模三天后)腦組織中RBM3蛋白在神經(jīng)元細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)
        3.3.3 大鼠(建模三天后)腦組織切片RBM3免疫組化染色
        3.3.4 四組大鼠顳葉皮層凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)(線粒體凋亡途徑)
        3.3.5 大鼠(建模三天后)腦組織的細(xì)胞凋亡染色
        3.3.6 大鼠(建模七天后)腦組織石蠟切片尼氏染色
        3.3.7 四組大鼠的轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
    3.6 參考文獻(xiàn)
第四章 C23在蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷中保護(hù)作用研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.3 主要試劑的配制方法
        4.2.4 主要實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 大鼠顳葉皮層CIRP的表達(dá)(WB檢測(cè),建模后1d)
        4.3.2 大鼠顳葉皮層凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)(線粒體凋亡途徑,建模后1d)
        4.3.3 大鼠腦組織中IL-6、IL-1β、TNF-a的表達(dá)水平(建模后1d)
        4.3.4 凋亡染色結(jié)果(建模后1d)
        4.3.5 免疫組化染色結(jié)果(建模后1d)
        4.3.6 尼氏染色結(jié)果(建模后1d)
        4.3.7 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)結(jié)果(建模后1d)
    4.4 討論
    4.5 結(jié)論
    4.6 參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Lessons from tenascin-C knockout mice and potential clinical application to subarachnoid hemorrhage[J]. Masato Shiba,Hidenori Suzuki.  Neural Regeneration Research. 2019(02)
[2]Matricellular proteins as possible biomarkers for early brain injury after aneurysmal subarachnoid hemorrhage[J]. Hidenori Suzuki,Hirofumi Nishikawa,Fumihiro Kawakita.  Neural Regeneration Research. 2018(07)
[3]Implications of periostin in the development of subarachnoid hemorrhage-induced brain injuries[J]. Hirofumi Nishikawa,Hidenori Suzuki.  Neural Regeneration Research. 2017(12)
[4]Toll-like receptor 4 as a possible therapeutic target for delayed brain injuries after aneurysmal subarachnoid hemorrhage[J]. Takeshi Okada,Hidenori Suzuki.  Neural Regeneration Research. 2017(02)



本文編號(hào)：3708286