本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤中ASPM與MGMT表達及其臨床意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)和免疫組織化學法(Immunohistochemistry, IHC)分別測定人類異常紡錘體樣小頭畸形相關(guān)蛋白基因(Abnormal Spindle-Like Microcephaly, ASPM)及甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT)在人腦膠質(zhì)瘤中的表達情況和表達位點,統(tǒng)計分析二者在人腦膠質(zhì)瘤中的表達水平與腫瘤病理學分級的相關(guān)性,結(jié)合術(shù)后隨訪患者生存期數(shù)據(jù),驗證ASPM作為潛在分子靶點治療膠質(zhì)瘤的可行性,為臨床開展膠質(zhì)瘤分子靶向治療提供理論依據(jù)和新策略。方法：收集蘭州大學第二醫(yī)院神經(jīng)外科經(jīng)近3年經(jīng)病理診斷證實的神經(jīng)膠質(zhì)瘤病例41例,所有標本取自術(shù)中新鮮腫瘤組織,一部分存入潔凈凍存管,置于液氮中速凍保存,另一部分置于4%多聚甲醛溶液中固定,并制作石蠟包埋組織標本保存。同時選取經(jīng)皮質(zhì)造瘺顱內(nèi)腫瘤切除術(shù)中的正常腦組織10例為對照組。通過使用RT-PCR和IHC檢測ASPM、MGMT在納入病例中的表達水平,采用Gene Tools影像分析軟件、SPSS19和GraphPad Prism軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析,分析二者表達水平與腫瘤級別、患者生存期的相關(guān)性及二者之間表達的相關(guān)性。結(jié)果：1.41例膠質(zhì)瘤組織標本經(jīng)PCR檢測ASPMmRNA陽性表達21例,陽性表達率為51.21%,其中Ⅱ級膠質(zhì)瘤陽性率為27.27%(3/11),Ⅲ級膠質(zhì)瘤陽性率為53.33%(8/15),Ⅳ級膠質(zhì)瘤陽性率為66.67%(10/15),但是三組數(shù)據(jù)間無統(tǒng)計學差異性(P0.05),正常腦組織中未檢測到表達。單因素方差檢驗證實,ASPM mRNA相對表達水平在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級腫瘤之間無統(tǒng)計學差異性(P=0.220.05),T檢驗顯示低度惡性組與高度惡性組之間具有顯著差異性(P=0.050.05)。Kaplan-Meier生存曲線顯示ASPM mRNA陽性表達患者生存期小于陰性表達者,經(jīng)Log-rank和Breslow檢驗,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05); ASPM mRNA低度表達患者比中、高度表達患者有更長的中位生存期,但是二者之間無統(tǒng)計學差異性P0.05)。MGMT mRNA在神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中均陽性表達41例,陽性表達率為100%。MGMT的mRNA相對表達量在不同病理學分級和低度、高度惡性組之間均無統(tǒng)計學差異性(P=0.280.05,P=0.170.05)。Spearman相關(guān)性分析表明膠質(zhì)瘤ASPM mRNA表達量與腫瘤病理級別存在正相關(guān)性(r=0.3150, P0.05), MGMT mRNA表達量與腫瘤病理分級無相關(guān)性(P=0.9110.05), ASPM與MGMT mRNA在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中表達無相關(guān)性(P0.05)。2.免疫組化檢測顯示ASPM蛋白在不同級別膠質(zhì)瘤細胞中表達陽性率不同,但無統(tǒng)計學差異性(P0.05),與腫瘤病理學分級無相關(guān)性(P0.05)。3.T檢驗患者低度惡性組、高度惡性組在發(fā)病年齡上的區(qū)別可知,高度惡性組患者發(fā)病年齡明顯高于低度惡性組患者,兩組數(shù)據(jù)有顯著統(tǒng)計學差異性(P=0.0030.05),其中低度惡性組中位發(fā)病年齡為41.09±3.03歲,高度惡性組為52.03+1.79歲, spearman相關(guān)性分析可知腫瘤惡性程度與年齡呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.445,P=0.0040.05)。結(jié)論：LASPMmRNA在神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中表達明顯高于正常腦組織,腫瘤級別越高,其表達量越高,其蛋白主要表達定位于腫瘤細胞核內(nèi),提示ASPM可能參與神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞分裂增殖。ASPM mRNA表達陽性患者生存期明顯短于陰性表達者,ASPM mRNA中、高度表達患者比低度表達的患者中位生存期更短,提示ASPM表達程度增強可能提示患者預后較差,生存期較短。2.MGMT的mRNA表達程度在不同病理學分級腫瘤中存在異質(zhì)性,與腫瘤分級無相關(guān)性,MGMT表達水平與膠質(zhì)瘤惡性程度無關(guān)。3.膠質(zhì)瘤ASPM與MGMT在基因和蛋白層面表達無相關(guān)性,提示ASPM可能與MGMT引起的腫瘤化療耐藥及耐藥所致的生存期縮短無關(guān)。4.膠質(zhì)瘤患者發(fā)病年齡越高,其腫瘤惡性程度可能越高。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤 ASPM MGMT 聚合酶鏈式反應(yīng) 生存期 免疫組織化學
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-8
• 英文縮略詞表8-11
• 前言11-17
• 1.1 研究背景11-13
• 1.1.1 膠質(zhì)瘤的分類12
• 1.1.2 膠質(zhì)瘤的發(fā)病機制12-13
• 1.2 ASPM和MGMT研究進展13-17
• 1.2.1 ASPM研究進展13-15
• 1.2.2 MGMT研究進展15-17
• 實驗方法17-25
• 2.1 材料與方法17-25
• 2.1.1 研究對象17-18
• 2.1.2 實驗條件及實驗原理與步驟18-24
• 2.1.3 實驗結(jié)果判定及統(tǒng)計學分析24-25
• 實驗結(jié)果與統(tǒng)計分析25-31
• 3.1 RT-PCR檢測ASPM、MGMT表達結(jié)果25-26
• 3.2 免疫組化法檢測ASPM表達結(jié)果26-28
• 3.3 ASPM在膠質(zhì)瘤中的陽性表達與患者生存期的關(guān)系28-30
• 3.4 腫瘤惡性程度與發(fā)病年齡的關(guān)系30-31
• 討論31-36
• 4.1 ASPM與神經(jīng)膠質(zhì)瘤31-33
• 4.1.1 ASPM在膠質(zhì)瘤中的表達情況分析31-32
• 4.1.2 ASPM在膠質(zhì)瘤研究中的臨床應(yīng)用價值32-33
• 4.2 MGMT與神經(jīng)膠質(zhì)瘤33-34
• 4.2.1 MGMT的表達與神經(jīng)膠質(zhì)瘤的關(guān)系33
• 4.2.2 MGMT在膠質(zhì)瘤研究中的臨床應(yīng)用價值33-34
• 4.3 ASPM與MGMT的表達關(guān)系34-35
• 4.4 發(fā)病年齡與腫瘤惡性程度35-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻37-40
• 文獻綜述40-54
• 綜述參考文獻50-54
• 在學期間研究成果54-55
• 致謝55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 仇志坤;馮冰虹;陳忠平;;MGMT在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中表達的研究進展[J];中國神經(jīng)腫瘤雜志;2010年01期

2 梁振;牛華濤;羅林;;MGMT在腦膠質(zhì)瘤中的表達及其意義[J];科協(xié)論壇(下半月);2012年05期

  本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤中ASPM與MGMT表達及其臨床意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：369237