干細(xì)胞移植對MCAO模型鼠腦組織miR-34a及Survivin表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2017-05-14 06:08
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【摘要】:目的:研究缺血再灌注損傷后大鼠腦組織mi R-34a、Survivin的表達(dá)水平,探討B(tài)MSCs移植的抗凋亡和神經(jīng)保護(hù)作用。方法:1.構(gòu)建模型:選取體重約250-300g左右的健康雄性SD大鼠,采用改良Longa線栓法制作大鼠大腦中動脈閉塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。2.成功模型的判定:5分制評分法評分,1-3分的為造模成功模型,TTC染色驗證腦組織梗死范圍。3.實驗分組:符合實驗納入條件的大鼠隨機分為空白對照組、模型對照組、PBS液移植組、干細(xì)胞移植組。干細(xì)胞移植組和PBS液移植組于造模成功后分別通過尾靜脈注射1ml(含有l(wèi)×l06個)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和1ml PBS液,B組造模后無特殊處理,A組不做處理。各組分別于造模成功后12h、1d、3d、7d觀察相關(guān)指標(biāo)的變化。4.觀測指標(biāo):改良大鼠神經(jīng)功能缺損評分(m NSS)評估神經(jīng)功能缺損;免疫組化檢測Survivin的表達(dá);實時熒光定量PCR技術(shù)檢測mi R-34a的表達(dá)。結(jié)果:1.根據(jù)5分制評分法評估,造模成功率為72.22%。最終可用于相關(guān)指標(biāo)檢測的實驗動物成功率為54.17%。2.神經(jīng)功能缺損評分顯示:在12h、1d、3d、7d時間點,空白對照組:0±0.00;模型對照組:9.83±2.04、15.17±1.47、12.17±2.23、10.83±1.47;PBS液移植組:9.67±1.97、15.00±1.67、12.00±2.10、11.00±2.37;干細(xì)胞移植組:10.00±2.53、13.33±2.16、8.33±1.21、6.83±0.75。模型組、PBS液移植組、干細(xì)胞移植組在各時間點均高于空白對照組(P0.01);模型組與PBS液移植組比較無明顯差異(P0.05);12h、1d時干細(xì)胞移植組與模型組、PBS液移植組比較無明顯差異(P0.05);3d、7d時干細(xì)胞移植組明顯低于模型組和PBS液移植組(P0.05)。3.免疫組化結(jié)果顯示:Survivin陽性細(xì)胞率(%)在12h、1d、3d、7d時間點,空白對照組:0±0.00;模型對照組:11.00±2.61、19.17±3.76、31.00±3.03、13.00±2.61;PBS液移植組:10.67±2.16、20.00±3.46、32.33±4.18、14.33±3.14;干細(xì)胞移植組:16.33±2.16、29.00±5.48、44.83±3.76、25.00±4.60。模型組、PBS液移植組、干細(xì)胞移植組在各時間點均明顯高于空白對照組(P0.01);模型組與PBS液移植組無明顯差異(P0.05);干細(xì)胞移植組在各時間點均顯著高于模型組和PBS液移植組(P0.05)。4.實時熒光定量PCR結(jié)果顯示:mi R-34a表達(dá)量在12h、1d、3d、7d時間點,空白對照組:1.1187±0.1241;模型對照組:4.7698±0.2569、3.7305±0.2985、3.0697±0.2067、2.6898±0.1998;PBS液移植組:4.7388±0.2147、3.7705±0.2378、2.9782±0.2153、2.6682±0.1879;干細(xì)胞移植組:4.0532±0.2082、2.8338±0.2391、2.5525±0.1101、2.0438±0.2608。模型組、PBS液移植組、干細(xì)胞移植組在各時間點均明顯高于空白對照組(P0.01);模型組與PBS液移植組無明顯差異(P0.05);干細(xì)胞移植組在各時間點均顯著低于模型組和PBS液移植組(P0.01)。結(jié)論:1.干細(xì)胞移植可改善腦缺血—再灌注大鼠的神經(jīng)功能,對缺血性腦損傷具有一定的保護(hù)作用。2.大鼠腦缺血—再灌注損傷可致病灶區(qū)mi R-34a的表達(dá)上調(diào);移植干細(xì)胞可能通過下調(diào)病灶區(qū)mi R-34a、上調(diào)Survivin的表達(dá)發(fā)揮抗凋亡作用。
【關(guān)鍵詞】:腦缺血再灌注 干細(xì)胞移植 miR-34a Survivin 抗凋亡
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R743
【目錄】:
- 摘要4-7
- Abstract7-11
- 主要英文縮略語11-14
- 第1章 緒論14-28
- 1.1 干細(xì)胞及細(xì)胞移植的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀14-21
- 1.2 缺血性腦損傷中Survivin蛋白表達(dá)的變化及其意義21-22
- 1.3 micro RNA分子可能通過影響相關(guān)蛋白質(zhì)的生成調(diào)節(jié)疾病的進(jìn)展和康復(fù)22-26
- 1.4 本實驗的主要內(nèi)容26-28
- 第2章 材料與方法28-42
- 2.1 主要儀器與試劑28-30
- 2.2 實驗動物及分組30-31
- 2.3 實驗?zāi)P偷臉?gòu)建及成功模型的判定31-32
- 2.4 尾靜脈注射法行干細(xì)胞移植32-34
- 2.5 標(biāo)本的制備34-35
- 2.6 評估及檢測方法35-41
- 2.7 統(tǒng)計學(xué)處理41-42
- 第3章 實驗結(jié)果42-50
- 3.1 大腦中動脈缺血-再灌注模型的制備42-43
- 3.2 神經(jīng)功能缺損評分結(jié)果43-44
- 3.3 免疫組化結(jié)果44-46
- 3.4 實時熒光定量PCR結(jié)果46-50
- 第4章 討論50-58
- 第5章 結(jié)論58-60
- 參考文獻(xiàn)60-64
- 綜述64-71
- 參考文獻(xiàn)68-71
- 攻讀學(xué)位期間的科研成果71-72
- 致謝72
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2 金世柱;韓明子;裴鳳華;;粒細(xì)胞集落刺激因子在干細(xì)胞移植中的應(yīng)用進(jìn)展[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2008年03期
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6 朱_g ,時o踥
本文編號:364420
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