本文關(guān)鍵詞：HHV6、HPV16、HSV在局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙中的表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景和目的:皮質(zhì)發(fā)育障礙(malformations of cortical development,MCD)又稱作皮質(zhì)發(fā)育不良、皮質(zhì)發(fā)育畸形[1]等,是一組局灶性或彌漫性皮質(zhì)結(jié)構(gòu)異常病變的總稱[2]。常引起癲癇、發(fā)育遲緩、局部神經(jīng)功能障礙和精神發(fā)育不全等多種臨床表現(xiàn)。由于皮質(zhì)組建異常,離子通道病變(channelopathies)等,常引起異常神經(jīng)元電位形成,神經(jīng)元興奮-抑制失衡的興奮毒性作用,是觸發(fā)癲癇的重要病理生理機制。占癲癇病因的24%,占耐藥性癲癇大約40%,是難治性癲癇的主要病因。局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙(focal cortical dysplasia,FCD)是MCD的重要亞型之一,1971年由泰勒及其同事[3]首先發(fā)現(xiàn)并詳細描述。FCD是難治性癲癇的重要病因,也是癲癇手術(shù)中最常見的皮質(zhì)發(fā)育障礙類型[4]。FCD主要影響大腦皮質(zhì)區(qū)域,以皮質(zhì)分層異常和異形細胞為特點,并據(jù)此分為三型(FCDI,FCDII,FCDIII),其中,FCDII是最重要的亞型,出現(xiàn)特征性的異形神經(jīng)元(FCDIIa)和氣球樣細胞(FCDIIb),與藥物難治性癲癇關(guān)系尤為密切[4]。FCD作為難治性癲癇最重要的病因,其具體的形成機制仍不清楚。目前,有報道表明,哺乳動物類雷帕霉素靶蛋白受體(mTOR)信號途徑的破壞可導(dǎo)致FCD的異常組織結(jié)構(gòu)。其他機制,比如胚胎期的基因突變及外部環(huán)境誘導(dǎo)的損傷(病毒感染,局部缺血或缺氧等)也被認為是誘導(dǎo)FCD的主要病因[5]�；蛲蛔円呀�(jīng)被臨床樣本及動物實驗證實[5,6]。外部環(huán)境誘導(dǎo)的損傷,比如致畸性化學(xué)試劑,外傷等也已通過動物實驗證實[6,7]。然而,病毒感染在FCD中的作用尚不清楚。已有大量研究顯示,病毒感染及其誘發(fā)的炎癥反應(yīng)是癲癇發(fā)病的重要原因,病毒感染可引起臨床癲癇發(fā)作,利用病毒感染可建立癲癇發(fā)作模型。同時,胚胎期病毒感染及其誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)尚可通過NF?B和mTOR等信號的激活,影響神經(jīng)干細胞的增殖、遷移和分化,導(dǎo)致腦發(fā)育異常形成FCD。已經(jīng)發(fā)現(xiàn),胚胎期易感病毒,如單純皰疹病毒(Herpes simplex virus,HSV),人乳頭瘤病毒16(Human papillomavirus16,HPV16),人皰疹病毒6(Human herpesvirus6,HHV6)在癲癇患者的腦組織中檢出率也明顯高于正常人,進一步支持胚胎期病毒感染可能是FCD形成和癲癇發(fā)生的重要原因,但病毒感染在臨床fcd手術(shù)切除標(biāo)本尚未證實。因此,本課題將檢測胚胎期易感病毒在fcd的表達,探討fcd癲癇和胚胎期易感病毒的相關(guān)關(guān)系,為臨床上治療fcd癲癇提供新的思路。方法:1.收集不同病人的腦組織切除標(biāo)本(包括fcdiia、fcdiib以及對照)。2.提取上述病人腦組織dna,采用nested-pcr技術(shù),檢測標(biāo)本中hsv1,hsv2,hhv6a,hhv6b,hpv16的感染情況。3.選取nested-pcr陽性結(jié)果作為實驗組,以正常腦組織作為對照組,采用免疫組化、免疫熒光的方法驗證nested-pcr的結(jié)果,并觀察病毒感染的形態(tài)學(xué)分布。4.用westernblot進一步驗證之前的實驗結(jié)果。5.以上述結(jié)果中感染病毒的標(biāo)本作為實驗組提取rna,以無病毒感染的正常人大腦皮層提rna作為對照組。采用rt-pcr技術(shù)檢測病毒感染后下游信號tlr3及trif的表達。結(jié)果:1.成功收集實驗組(fcd組)標(biāo)本37例,對照組標(biāo)本22例。根據(jù)臨床及病理分型結(jié)果,實驗組中:fcdiia20例,fcdiib17例;對照組中:外傷8例、腦出血4例,其他腫瘤周圍正常組織10例。2.nested-pcr檢測hhv6a在fcd組的感染率為20/37(54.1%),其中,fcdiia感染率為9/20(45.0%),fcdiib感染率為11/17(64.7%),對照組感染率為2/22(9.1%)(與fcd組比較存在顯著差異,p0.05);hhv6b在fcd組的感染率為25/37(67.6%),其中,fcdiia感染率為14/20(70.0%),fcdiib感染率為11/17(64.7%),對照組感染率為5/22(22.7%)(與fcd組比較存在顯著差異,p0.05);基因測序、免疫組化和westernblot檢測證實了hhv6a和hhv6b病毒及其表達產(chǎn)物的存在。3.nested-pcr檢測hpv16在fcd組的感染率為18/37(48.6%),其中,fcdiia感染率為9/20(45.0%),fcdiib感染率為9/17(52.9%),對照組感染率為4/22(18.2%)(與fcd組比較存在顯著差異,p0.05);免疫組化和westernblot檢測證實了hpv16病毒表達產(chǎn)物的存在。4.nested-pcr檢測hsv1在fcd組的感染率為33/37(89.2%),其中,fcdiia感染率為18/20(90.0%),fcdiib感染率為15/17(88.2%),對照組感染率為5/22(22.7%)(與fcd組比較存在顯著差異,p0.05);hsv2在fcd組的感染率為30/37(81.1%),其中,fcdiia感染率為16/20(80.0%),fcdiib感染率為14/17(82.4%),對照組感染率為2/22(9.1%)(與FCD組比較存在顯著差異,P0.05);免疫組化和Western Blot檢測證實了上述HSV1和HSV2病毒表達產(chǎn)物的存在。5.在病毒感染陽性標(biāo)本中,下游信號分子TLR3及TRIF的表達水平明顯高于無病毒感染的對照組(TLR3:t=39.220,P=0.000;TRIF:t=22.226,p=0.000)。結(jié)論:1.HHV6A、HHV6B、HPV16、HSV1和HSV2在FCD組的感染率明顯高于正常對照組,表明上述胚胎期易感病毒與FCD相關(guān),可能是FCD形成和癲癇發(fā)生的重要原因。2.伴病毒感染的FCD標(biāo)本存在明顯的TLR3-TRIF炎癥信號通路激活,提示FCD內(nèi)存在病毒激活的炎癥反應(yīng),可能是參與FCD癲癇的發(fā)病機制。
【關(guān)鍵詞】：局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙 人皰疹病毒6 人乳頭瘤病毒16 單純皰疹病毒 難治性癲癇
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.8
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 英文摘要5-9
• 中文摘要9-12
• 1. 前言12-14
• 2. 材料與方法14-30
• 3. 結(jié)果30-47
• 4. 討論47-55
• 全文總結(jié)55-56
• 參考文獻56-62
• 文獻綜述 炎癥在癲癇中作用的研究現(xiàn)狀62-76
• 參考文獻67-76
• 研究生期間主要發(fā)表論文76-77
• 致謝77

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1 文明;晏勇;;皮質(zhì)發(fā)育障礙的分子生物學(xué)研究現(xiàn)狀[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2005年06期

2 馬勛泰,晏寧,晏勇;伴癲癇的皮質(zhì)發(fā)育障礙相關(guān)基因研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年01期

3 馬勛泰,晏勇,馮占輝,羅春陽,晏寧,王學(xué)峰;谷氨酸在實驗誘導(dǎo)皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠腦皮質(zhì)中的分布[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年04期

4 龍莉莉;肖波;王康;;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型的建立及其致沲敏感性的研究[J];中國臨床神經(jīng)科學(xué);2006年04期

5 龍莉莉;肖波;宋延民;王康;;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型大鼠海馬區(qū)陽離子-氯離子轉(zhuǎn)運體基因表達變化的研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年19期

6 劉照;張進;陳懷紅;肖波;丁美萍;桂雅星;王靜;;皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道功能的變化[J];中國病理生理雜志;2008年12期

7 馮占輝;呂發(fā)金;黃華;彭娟;晏勇;;兒童大腦局限性皮質(zhì)發(fā)育障礙磁共振影像與臨床分析[J];中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2008年04期

8 劉仕勇;安寧;楊輝;;皮質(zhì)發(fā)育障礙及其致癇機制的研究[J];立體定向和功能性神經(jīng)外科雜志;2008年03期

9 羅春陽;晏勇;馬勛泰;王學(xué)峰;;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型鼠腦γ-氨基丁酸的表達[J];重慶醫(yī)學(xué);2009年22期

10 晏勇;皮質(zhì)發(fā)育障礙與癲癇發(fā)作[J];重慶醫(yī)學(xué);2001年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 肖波;劉照;李國良;柳茵;劉人愷;;皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道和鈣通道功能的變化[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

2 晏勇;文明;何選麗;晏寧;黃華;馬勛太;官云里;蔣萍;;兩種皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠模型共同差異基因表達的研究[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

3 馬勛泰;李小剛;呂洋;承歐梅;晏勇;;皮質(zhì)發(fā)育障礙性難治性癲癇的病理和神經(jīng)遞質(zhì)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 張建剛;宋延波;張毅;黃敏;馮占輝;賀興;晏勇;;X-射線照射損傷后皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠模型的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 張進;;皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道和HVA鈣通道功能的研究[A];2006年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

6 晏寧;彭惠民;晏勇;;原鈣粘蛋白21在皮質(zhì)發(fā)育障礙致難治性癲癇中作用研究[A];第二屆中國醫(yī)學(xué)細胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會暨細胞生物學(xué)教學(xué)改革會議論文集[C];2008年

7 馮占輝;楚蘭;晏勇;黃敏;;X射線照射建立大鼠皮質(zhì)發(fā)育障礙模型研究[A];貴州省醫(yī)學(xué)會第八屆神經(jīng)病學(xué)年會論文集[C];2010年

8 張曼曼;郭誼;丁美萍;;卡莫司汀致大鼠皮質(zhì)發(fā)育不良模型癲癇易感性研究[A];2011年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉照;皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道和鈣通道功能的變化[D];中南大學(xué);2006年

2 馮占輝;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型鼠海馬基因芯片和蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

3 李松;基質(zhì)金屬蛋白酶9在腦皮質(zhì)發(fā)育障礙中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 黃華;皮質(zhì)發(fā)育障礙的致癇機制及所致難治性癲癇的臨床治療研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

5 馬勛泰;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型鼠大腦的病理特征和體視學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

6 張建剛;X射線誘導(dǎo)皮質(zhì)發(fā)育障礙模型及相關(guān)致癲機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

7 張春青;血管內(nèi)皮生長因子-C在大腦皮質(zhì)發(fā)育障礙中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

8 樹海峰;SVZ來源的神經(jīng)前體細胞參與皮質(zhì)發(fā)育障礙致癇機制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

9 文明;RBFOX1高表達與皮質(zhì)發(fā)育障礙伴難治性癲癇發(fā)病機制的臨床及細胞學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

10 賀教江;IL-17在大腦皮質(zhì)發(fā)育障礙癲癇發(fā)生中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫杰;IL-6在局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠腦皮質(zhì)中的表達[D];貴陽醫(yī)學(xué)院;2015年

2 陸林香;HHV6、HPV16、HSV在局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙中的表達[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 張曼曼;卡莫司汀致大鼠皮質(zhì)發(fā)育障礙模型癲癇易感性研究[D];浙江大學(xué);2011年

4 文明;兩種皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠模型形態(tài)學(xué)研究和相關(guān)基因篩選[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

5 馬勛泰;皮質(zhì)發(fā)育障礙模型鼠大腦的病理學(xué)和主要神經(jīng)遞質(zhì)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

6 馮飛;皮質(zhì)發(fā)育障礙大鼠海馬神經(jīng)元的體視學(xué)方法定量研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

7 羅春陽;大鼠皮質(zhì)發(fā)育障礙模型研究及γ-氨基丁酸檢測[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

8 何選麗;卡莫司汀誘導(dǎo)大鼠皮質(zhì)發(fā)育障礙模型及相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

9 郭為;骨形成蛋白-4在大腦皮質(zhì)發(fā)育障礙中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

10 杜陽;Reelin在皮質(zhì)發(fā)育障礙癲癇大鼠海馬區(qū)表達變化的研究[D];中南大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：HHV6、HPV16、HSV在局灶性皮質(zhì)發(fā)育障礙中的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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