目的:γ-tocotrienol（GT3）是一種天然維生素E亞型,具有強(qiáng)的抗氧化能力。本研究將用Dystrophin基因敲除（DMD）小鼠為模型,應(yīng)用GT3作用于DMD小鼠后,對(duì)肌肉干細(xì)胞的表型和功能進(jìn)行評(píng)估,并分析GT3對(duì)杜氏進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（DMD）的作用及其機(jī)制。方法:首先,我們用40周齡的C57BL/6J雄鼠（n=6）和DMD雄鼠（n=6）,觀察肌肉干細(xì)胞的基本生理特性。然后,分別將40周齡的C57BL/6J雄鼠和DMD雄鼠分為4組:WT+PBS（n=6）、DMD+PBS（n=6）、WT+GT3（n=6）和DMD+GT3（n=6）。通過(guò)HE染色觀察肌細(xì)胞形態(tài),基本病理改變;通過(guò)免疫組化檢測(cè)Dystrophin,PAX7,PCNA等相關(guān)蛋白的表達(dá);通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)對(duì)肌肉干細(xì)胞的氧化自由基（ROS）、老化、凋亡和DNA損傷進(jìn)行分析;通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:1.與正常對(duì)照組小鼠比較,DMD基因敲除小鼠肌束周長(zhǎng)增加;DMD基因敲除小鼠肌肉干細(xì)胞數(shù)量減少;2.與正常對(duì)照組小鼠比較,DMD基因敲除小鼠脛骨前肌PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加;3.與正常對(duì)照組小鼠比較,DM... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.2 動(dòng)物模型制備
        2.2.3 肌肉組織單細(xì)胞懸液的制備
        2.2.4 活性氧測(cè)定
        2.2.5 老化測(cè)定
        2.2.6 細(xì)胞凋亡測(cè)定
        2.2.7 細(xì)胞周期分析
        2.2.8 DNA損傷檢測(cè)
        2.2.9 脛骨前肌橫截面HE染色和免疫組化
        2.2.10 qRT-PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因表達(dá)
        2.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 DMD基因敲除鼠的構(gòu)建
    3.2 Dystrophin蛋白的表達(dá)
    3.3 DMD基因敲除小鼠肌束周長(zhǎng)增加
    3.4 肌肉干細(xì)胞數(shù)量變化
    3.5 PCNA陽(yáng)性增殖細(xì)胞數(shù)量變化
    3.6 肌肉干細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)量變化
    3.7 肌肉干細(xì)胞氧自由基水平變化
    3.8 肌肉干細(xì)胞老化水平變化
    3.9 肌肉干細(xì)胞DNA損傷水平變化
    3.10 GT3能增加DMD基因敲除小鼠脛骨前肌周長(zhǎng)
    3.11 GT3影響了小鼠脛骨前肌肌肉干細(xì)胞數(shù)量變化
    3.12 GT3影響了小鼠脛骨前肌PCNA陽(yáng)性增殖細(xì)胞數(shù)量變化
    3.13 GT3處理對(duì)DMD基因敲除小鼠肌肉干細(xì)胞的影響
    3.14 GT3處理對(duì)小鼠脛骨前肌干細(xì)胞凋亡的影響
    3.15 GT3處理對(duì)小鼠脛骨前肌干細(xì)胞氧化自由基的影響
    3.16 GT3對(duì)小鼠脛骨前肌干細(xì)胞老化的影響
    3.17 GT3對(duì)小鼠脛骨前肌干細(xì)胞DNA損傷的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3638627