目的:γ-tocotrienol（GT3）是一種天然維生素E亞型,具有強的抗氧化能力。本研究將用Dystrophin基因敲除（DMD）小鼠為模型,應用GT3作用于DMD小鼠后,對肌肉干細胞的表型和功能進行評估,并分析GT3對杜氏進行性肌營養(yǎng)不良癥（DMD）的作用及其機制。方法:首先,我們用40周齡的C57BL/6J雄鼠（n=6）和DMD雄鼠（n=6）,觀察肌肉干細胞的基本生理特性。然后,分別將40周齡的C57BL/6J雄鼠和DMD雄鼠分為4組:WT+PBS（n=6）、DMD+PBS（n=6）、WT+GT3（n=6）和DMD+GT3（n=6）。通過HE染色觀察肌細胞形態(tài),基本病理改變;通過免疫組化檢測Dystrophin,PAX7,PCNA等相關蛋白的表達;通過流式細胞術對肌肉干細胞的氧化自由基（ROS）、老化、凋亡和DNA損傷進行分析;通過熒光定量PCR檢測細胞凋亡相關基因的表達。結果:1.與正常對照組小鼠比較,DMD基因敲除小鼠肌束周長增加;DMD基因敲除小鼠肌肉干細胞數(shù)量減少;2.與正常對照組小鼠比較,DMD基因敲除小鼠脛骨前肌PCNA陽性細胞數(shù)增加;3.與正常對照組小鼠比較,DM... 

【文章來源】：南昌大學江西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗儀器設備
        2.1.3 主要實驗試劑
        2.1.4 主要實驗試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗分組
        2.2.2 動物模型制備
        2.2.3 肌肉組織單細胞懸液的制備
        2.2.4 活性氧測定
        2.2.5 老化測定
        2.2.6 細胞凋亡測定
        2.2.7 細胞周期分析
        2.2.8 DNA損傷檢測
        2.2.9 脛骨前肌橫截面HE染色和免疫組化
        2.2.10 qRT-PCR法檢測凋亡相關基因表達
        2.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
第3章 實驗結果
    3.1 DMD基因敲除鼠的構建
    3.2 Dystrophin蛋白的表達
    3.3 DMD基因敲除小鼠肌束周長增加
    3.4 肌肉干細胞數(shù)量變化
    3.5 PCNA陽性增殖細胞數(shù)量變化
    3.6 肌肉干細胞凋亡細胞數(shù)量變化
    3.7 肌肉干細胞氧自由基水平變化
    3.8 肌肉干細胞老化水平變化
    3.9 肌肉干細胞DNA損傷水平變化
    3.10 GT3能增加DMD基因敲除小鼠脛骨前肌周長
    3.11 GT3影響了小鼠脛骨前肌肌肉干細胞數(shù)量變化
    3.12 GT3影響了小鼠脛骨前肌PCNA陽性增殖細胞數(shù)量變化
    3.13 GT3處理對DMD基因敲除小鼠肌肉干細胞的影響
    3.14 GT3處理對小鼠脛骨前肌干細胞凋亡的影響
    3.15 GT3處理對小鼠脛骨前肌干細胞氧化自由基的影響
    3.16 GT3對小鼠脛骨前肌干細胞老化的影響
    3.17 GT3對小鼠脛骨前肌干細胞DNA損傷的影響
第4章 討論
第5章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3638627